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ECL Western Blotting Detection Kit(Goat IgG)
990
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")ECL化学发光法检测试剂盒(山羊IgG)哪里卖,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:ECL化学发光法检测试剂盒(山羊IgG)哪里卖
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:1盒
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗山羊IgG二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。
试剂盒组分:
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记山羊IgG二抗——————0.3ml,效价1:500~1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB
常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项:
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
除ECL化学发光法检测试剂盒(山羊IgG)哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
·去内毒素质粒小量提取试剂盒
编号:QN0900
英文名称:Free Endotoxin Plasmid Extraction Mini Kit
规格:50T|100T
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 百奥莱博公司研制的内毒素清除剂,可最大限度地除去内毒素。从1-5ml大肠杆菌LB培养液中,可快速提取515μg高纯度质粒DNA,提取率达85-90%。使用本试剂盒提取的质粒DNA纯度高,可直接用于细胞转染等要求较高的实验,以及其他各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
英储存条件:常温干燥保存,有效期一年。
·顺丁烯二酸(马来酸)
编号:QN0633
英文名称:Maleic acid
规格:100g
CAS号:110-16-7
分子式:C4H4O4
分子量:116.07
纯度:≥99%
性状:白色结晶性粉末
熔点:137~140℃
密度:1.59 g/mL(25℃)
溶解性:溶于水,参考浓度25g/75ml
储存条件:室温密封
·多效唑
编号:QN0217
英文名称:Paclobutrazol
规格:100g
别名:PP333;*丁唑
CAS号:76738-62-0
分子量:293.79
·DL-α-硫辛酸
编号:QN0591
英文名称:DL-Thioctic acid
规格:5g
CAS号:1077-28-7
分子式:C8H14O2S2
分子量:206.33
储存条件:2~8℃
·2×SYBR Green PCR Mastermix
编号:QN0949
英文名称:DL-Thioctic acid
规格:50T|200T
本产品为应用SYBR Green Ⅰ染料进行Realtime PCR扩增反应的高效预混系统。该预混系统提供了经过优 化的缓冲液、dNTP、HotStart Taq DNA 聚合酶、SYBR Green I染料和MgCl2,使用者只需加入适量的引物、 模板和水,即可进行荧光定量PCR检测。 该预混系统中的优化缓冲液和 HotStart Taq DNA 聚合酶等可大大提高 PCR 产物的灵敏度和特异性。 Realtime PCR MasterMix 采用高效 HotStart Taq DNA 聚合酶,使 PCR 反应具有更高灵敏度和特异性。 本产品可用于荧光 PCR 检测,获得灵敏、准确且可靠的结果。可适合任意荧光定量 PCR 仪,如 ABI7000/7700/7900HT/7300/7500 Realtime PCR System、FTC2000、lightcycler 等。
产品特点:
高特异性:本产品采用热启动 DNA 聚合酶,90℃以上2min后具有扩增活性,可大大提高PCR产物的特异性。
高灵敏度:本产品包含的优化的缓冲液可检测低拷贝数的模板,且重复性好。
高适用性:本产品可适用于任意荧光定量 PCR 仪。
应用实例:模版:提取RNA,反转录成cDNA,模版稀释倍数102﹑103﹑104﹑105,设计的引物扩增的目的片段长度是125bp。
储存条件:-20℃
ECL化学发光法检测试剂盒(山羊IgG)哪里卖关键词:山羊IgG,QN1156,ECL化学发光法检测试剂盒(山羊IgG),ECL Western Blotting Detection Kit(Goat IgG)
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焦磷酸* Pancreatin 7320-34-5
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ECL化学发光法检测试剂盒(山羊IgG)哪里卖关键词:山羊IgG,QN1156,ECL化学发光法检测试剂盒(山羊IgG),ECL Western Blotting Detection Kit(Goat IgG)
·EDTA二*盐
编号:QN0802
英文名称:EDTA-2K DIHYDRATE
规格:100g
本品具有血液抗凝作用,是实验室常用的抗凝剂,也可用作络合剂,*、*及其他金属试剂,金属掩蔽剂
别名:乙二*(代"胺")四乙酸二*盐;EDTA二*盐
CAS号:25102-12-9
分子式:C10H18K2N2O10
分子量:404.45
性状:白色结晶性粉未
·纤维素酶
编号:QN0504
英文名称:Cellulase
规格:5g
本纤维素酶主要用于植物细胞杂交研究。催化水解纤维素分子为低聚纤维素和糖,能作用于纤维素中的1,4-β-D-葡萄糖苷键。
CAS号:9012-54-8
分子量:相对分子质量:52000~61000
储存条件:2~8℃
酶活:3units/mg
性状:黄褐色冻干粉
纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称,它不是单体酶,而是起协同作用的多组分酶系,是一种复合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成,还有很高活力的木聚糖酶。作用于纤维素以及从纤维素衍生出来的产物。微生物纤维素酶在转化不溶性纤维素成葡萄糖以及在果蔬汁中破坏细胞壁从而提高果汁得率等方面具有非常重要的意义。
·SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(AP显色)
编号:QN1228
英文名称:SABC(Rabbit IgG)-AP Kit
规格:100T-200T
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验,采用AP显色。
试剂盒组成:
封闭液(5%BSA)—————————10ml
Bio-羊抗兔IgG浓缩液——————100ul
SABC-AP浓缩液—————————100ul
稀释液-————————————30ml
1×AP反应缓冲液————————30ml
25×BCIP-———————————1ml
25×NBT————————————1ml
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
实验步骤:(以石蜡切片为例,仅作参考)
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*,三次乙醇)。
2. 可选步聚:
a、热修复抗原
b、酶消化
c、跳过此步,直接进入下一步。
3. 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体,不洗。
4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。具体稀释度和孵育时间参考一抗生产厂家说明书。)
5. 根据用量,用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗兔IgG浓缩液混匀。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4) 洗2分钟×3次。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-AP浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-AP浓缩液混匀。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-AP工作液,20-37℃,30分钟。PBS (pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.根据用量,1ml AP缓冲液中加入40ul NBT溶液,混匀后再加入40ul BCIP溶液。此工作液现用现配。室温显色, 镜下控制反应时间。蒸馏水洗涤终止反应。
**对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,接上述第二步。**
注意事项:
1、如果染色背景过高,在SABC反应之后,AP显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后AP显色。
2、因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
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