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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 细胞类型:
正常细胞/癌细胞
- 组织来源:
详询
- 相关疾病:
详询客服人员
- 物种来源:
鼠源
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 器官来源:
详询
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
永久
- 生长状态:
优良
细胞名称:MS1 小鼠胰岛内皮细胞
组织来源:正常胰岛内皮,SV40转染
培养条件:DMEM +5% FBS
形 态:贴壁;上皮细胞样
背 景:MS1是1994年建株的胰岛内皮细胞株。原代培养的胰岛内皮细胞用抗G418的温度敏感型SV40大T抗原(tsA-58-3)转染。抗性克隆用克隆环分离,并筛选吸收dil-Ac-LDL的。这株细胞保留了内皮细胞的许多特性,如吸收乙酰化LDL和表达八因子相关抗原及BEGF受体。
购买细胞注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5-6ml完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数细胞培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验指数(RI) b.变化小于10 ppm 的质量精度(MS1) c.高正反双向的 MS/MS 得分(MS2) 图 | 该文章中关于 3 个鉴定条件的描述 而在前一个月,同样是 Cell 主刊在线发布的一篇关于孕妇代谢动力学与妊娠年龄及分娩时间的预测文章中同样提到关于代谢物鉴定的过程和标准, 主要基于以下几个方面: a.变化小于 5 ppm 的质量精度(MS1) b.保留时间 RT 在 30s 的波动范围内 c.MS/MS 匹配 总结来说,鉴定准确度排序:standards>MS/MS>MetDNA
,然而该方法的灵敏度似乎比专用的SRM低一个数量级。可能会出现如下图所示的实验工作流程,即从基于DDA的定量方法(如MS1-XICs)开始,然后是高复用分析(如SWATH),在一次分析中可以精确监测数量最庞大的蛋白质。随着技术的发展,需要监测的蛋白质数量会减少,从而产生一种可以通过高分辨率SRM进行的分析方法,并最终作为基于高灵敏度三联四极杆仪器上的标准SRM分析。这一工作流程提供了一种从低置信度结果开始,最后使用可靠且经过验证的技术作为最终分析的方案,并可能成为未来在生物标记物发现方面的实验
非标记定量蛋白质组学 (Label Free)近年来成为重要的质谱定量方法,按照其原理进行分类,可以分为两类。Spectrum counts类的非标记定量方法,发展比较早,也形成了多种算法进行定量,但是主要的原理都是根据MS2的鉴定结果作为定量的基础,各种方法的差别在于后期算法在大规模数据上的修正。第二种非标记定量方法的原理是以MS1为基础,计算每个肽段信号在LCMS质谱上的积分,目前Label Free主要的数据分析方法是利用Maxquant软件,根据一级质谱相关的肽段峰强度、峰面积、液相
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