嘌呤霉素试剂 抗生素类

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名称：嘌呤霉素试剂 抗生素类
品牌：百奥莱博
英文名：Puromycin
规格：25mg|100mg
编号：QN0078
产地：国产|进口
本品是蛋白质合成抑制剂。抑制细菌、藻类原生物和哺乳动物细胞生长。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
储存条件：-20℃
纯度：≥98%(TLC)
性状：白色或白中带有黄色的粉末
别名：二盐*(代"酸")嘌呤霉素;嘌呤霉素盐*(代"酸")盐
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)发酵代谢产生的一种*基糖苷类抗生素，通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌，各种动物和昆虫细胞。某种特殊情况下有效作用大肠杆菌。作用机制在于嘌呤霉素是*酰-tRNA分子3’末端的类似物，能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后，不会参与随后的任何反应，从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素产生菌Streptomyces alboniger内发现的pac基因编码嘌呤霉素N-乙酰转移酶(PAC)，赋予机体对嘌呤霉素产生抗性。这一特性如今普遍应用于筛选特定携带pac基因质粒的哺乳动物稳定转染细胞株。

嘌呤霉素在细胞稳转株筛选中的普遍应用与慢病毒载体的特性有关，现在商业化的慢病毒载体多数都携带pac基因。在某些特定情况下，嘌呤霉素亦可以用来筛选转化携带pac基因质粒的大肠杆菌菌株。

使用方法：

1.建议使用浓度
哺乳动物细胞：1-10 μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定;
大肠杆菌：LB琼脂培养基筛选稳定转化pac基因的大肠杆菌，使用浓度为125μg/mL。注：使用嘌呤霉素筛选大肠杆菌稳转株需要精确的pH值调节，而且受宿主细胞本身的影响。

2.溶解方法
用蒸馏水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，经0.22 μm滤膜过滤除菌后分装于-20℃冻存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的储存液。

3. 嘌呤霉素杀灭曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒转导为例)
嘌呤霉素有效筛选浓度跟细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢情况及细胞所处细胞周期位置等有关。为了筛选到稳定表达的shRNA细胞株，确定杀死未转染/转导细胞的最低浓度嘌呤霉素至关重要。建议初次做实验的客户一定要建立适合自身实验体系的杀死曲线(kill curve)。
1)Day 1：24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。37℃细胞孵育过夜;
2)Day 2：
a)准备筛选培养基：含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0-15μg/mL，至少5个梯度);
b)往孵育过夜后的细胞内更换新鲜配制的筛选培养基;之后37℃孵育细胞;
3)Day 4：更换新鲜的筛选培养基，并观察细胞存活率。
4)根据细胞的生长状态，约2-3天更换新鲜的筛选培养基;
5)每日监测细胞，观察存活细胞率，从而确定抗生素筛选开始4-6天内有效杀死非转染或者所有非转导细胞的药物最低浓度。

4. 哺乳动物稳定转染细胞株的筛选
等转染含有pac基因的质粒后，细胞在含有嘌呤霉素的培养基中增殖，以筛选出稳定转染子。
1)细胞转染48h后，将细胞(原样或稀释)置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养。
注意：当细胞处于分裂活跃期时，抗生素作用最明显。细胞过于密集，抗生素产生的效力会明显下降。最好进行细胞分盘使其密度不超过25%。
2)每隔2-3天，移除和更换含有嘌呤霉素的培养基。
3)筛选7天后评估细胞形成的病灶。病灶可能需要额外的一周或者更多时间，这依赖于宿主细胞系和转染筛选效率。注意：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要48h，有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在3-10天。
4)转移和放置5-10个抗性克隆到一个35mm的培养皿中，用选择培养基继续培养7天。此次富集培养是为日后的细胞毒性实验做准备。

注意事项：
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素为有毒化合物，操作时请小心拿放。

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嘌呤霉素试剂 抗生素类关键词：嘌呤霉素试剂,嘌呤霉素盐*(代"酸")盐,二盐*(代"酸")嘌呤霉素


·葡萄糖-6-磷酸一*
编号：QN0171
英文名称：G-6-P-Na;D-Glucose 6-phosphate sodiu*(代"m") salt
规格：100mg
别名：β-D-葡萄糖-6-磷酸*盐;6-磷酸葡萄糖*盐;6-磷酸葡萄糖酸一*盐
CAS号：54010-71-8
分子式：C6H12O9PNa
分子量：282.12
储存条件：2～8℃
纯度：≥98.0%
性状：白色结晶性粉末

·右旋糖酐10000
编号：QN0841
英文名称：Dextran 10000
规格：10g
CAS号：9004-54-0

·聚乙二醇 PEG 3350
编号：QN0713
英文名称：Poly(ethylene glycol) 3350
规格：100g|500g|1000g
本品常用于蛋白质的分离，仅可用于科学研究领域。

别名：聚氧乙*(代"烯")3350;PEG3350
CAS号：25322-68-3
分子式：H(OCH2CH2)nOH
分子量：3350
性状：白色粉末
储存条件：室温阴凉干燥保存

·棉子糖
编号：QN0191
英文名称：D-Raffinose
规格：10g
本品常用于细菌学用作肠道菌鉴别。

别名：五水棉子糖;蜜三糖;甜菜糖
CAS号：17629-30-0
分子式：C18H32O16 ·5H2O
分子量：594.52
储存条件：室温
纯度：98.0 (HPLC)
性状：白色结晶性粉末

·通用引物 Random
编号：QN0960
英文名称：Universal primers Random
规格：250μl(10uM)
储存条件：-20℃

·L(+)鼠李糖
编号：QN0175
英文名称：L(+)rhamnose monohydrate
规格：5g
别名：异甜糖;6-脱氧-L-甘露糖
CAS号：10030-85-0
分子式：C6H12O5·H2O
分子量：182.17
储存条件：室温干燥保存
纯度：≥99%
性状：白色粉末
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml


嘌呤霉素试剂 抗生素类关键词：嘌呤霉素试剂,嘌呤霉素盐*(代"酸")盐,二盐*(代"酸")嘌呤霉素
  嘌呤霉素试剂等试剂产品的使用注意事项：
（1）、所有试剂、溶液以及样品的包装上必须要有标签。标签要完整、清晰，表明试剂的名称、规格、质量。
（2）、溶液除了表明品名外，还应表明浓度、配置日期等。万一标签脱落，应照原样贴牢。决定不允许在容器内装入与标签不相符的物品。
（3）、无标签的试剂必须取小样检定后才可使用。不能使用的化学试剂要慎重处理，不能随意乱倒。为了保证试剂不受污染，应当用清洁的牛角勺或不锈钢小勺从试剂瓶中取出试剂，绝不可以用手抓取。若试剂结块，可用洁净的玻璃棒或瓷药铲将其捣碎后取出。
（4）液体试剂可用洗干净的量筒到取，不要用吸管伸入原试剂中吸取液体。从试剂瓶中取出的、没有用完的声誉药品，不可再倒回原瓶。



·6-磷酸果糖二*
编号：QN0195
英文名称：D-Fructose -6-phosphate
规格：100mg
本品常用于代谢组学，代谢通路，代谢通路图中的代谢产物和辅酶分子，有氧糖酵解(Warburg效应)，有氧糖酵解(Warburg效应)抑制剂，生化试剂，癌症代谢，癌症研究，糖酵解，细胞生物学，酶、抑制剂和底物。

CAS号：26177-86-6
分子式：C6H11Na2O9P
分子量：304.10 (无水)
储存条件：−20℃
性状：白色粉末

·四甲基*化铵
编号：QN0595
英文名称：Tetramethylammonium bromide
规格：25g|100g
本品常用作极谱分析试剂，用于检定碱金属和碱土金属，也用作催化剂，乳化剂，消毒剂，杀菌剂，抗静电剂等方面。

CAS号：64-20-0
分子式：C4H12BrN
分子量：154.05

·人血清IgM
编号：QN0272
英文名称：Human IgG
规格：10mg
纯度：70-80%
储存条件：-20℃

·生物素-N-羟基丁二酰亚胺活化脂
编号：QN0766
英文名称：NHS-Biotin
规格：25mg
CAS号：35013-72-0
分子式：C14H19N3O5S
分子量：341.38
储存条件：−20℃

·L(+)-乳酸
编号：QN0651
英文名称：L(+)-Lactic acid
规格：5g
本品主要用作科研实验的防腐剂，以及用于制造乳酸*等产物。

CAS号：79-33-4
分子式：C3H6O3
分子量：90.08
纯度：≥85%
储存条件：2～8℃

·磺基水杨酸
编号：QN0624
英文名称：5-Sulfosalicylic Acid dihydrate
规格：100g

别名：5-磺基水杨酸;二水合-2-羟基-5-磺基*甲*(代"酸");磺基水杨酸;磺基水杨酸,二水;二水磺基水杨酸;磺基水楊酸;5-磺酰水杨酸二水合物;5-磺化水杨酸单水合物;5-磺水杨酸单水合物
英文名称：5-Sulfosalicylic Acid dihydrate
CAS号：5965-83-3
分子式：C7H10O8S
分子量：254.21



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