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大量
- 供应商:
深圳市科润达生物工程有限公司
- 检测范围:
科研
- 检测方法:
酶免法的夹心原理
- 应用:
用于EDTA-血浆,尿液或细胞上清中人OPN的体外定量检测
- 适应物种:
人
- 标记物:
人骨桥蛋白(OPN)
- 样本:
EDTA-血浆,尿液或细胞上清
- 规格:
96人份/盒
骨桥蛋白(OPN)来源于骨基质,是一种分泌型糖蛋白。目前已发现多个细胞分泌高酸性的钙结合的糖基化磷蛋白,包括骨细胞,肾小管细胞,巨噬细胞,活化的T细胞和血管平滑肌细胞。分子量的大小取决于其糖基化和磷酸化程度,范围为66~44kDa
OPN的一个重要特点是含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列,如纤维蛋白,连蛋白和其他胞外蛋白,通过该序列可与细胞表面整合素受体结合,如αvβ3
另一重要特点,由于RNA连接,糖基化,磷酸化,硫酸化和对蛋白酶的敏感度不同,OPN在机体内以多种分子形式存在。OPN和凝血酶同时存在于受伤,炎症,血管再生和肿瘤组织位点。OPN易水解,这一过程可能有着重要的生理学意义。OPN片段的氨基末端含有一个隐藏的结合位点,可识别整合素α9β1,而且OPN还含有多个细胞结合位点,与多个受体反应;这些反应都有着不同的功能
实验原理
此试剂盒根据酶免法的夹心原理,利用两种不同的高特异性抗体,TMB作为着色剂,颜色强度与人OPN的量成正比
两种抗体如下:
包被抗体:抗人OPN(O-17)兔IgG,抗体反应部分,人OPN的N-端标记抗体
HRP标记的抗人OPN(10A16)小鼠IgG Fab’, 抗体反应部分,人OPN凝血酶裂解位点的右侧
检测范围
5~320ng/mL(76.9~4920pmol/mL)
预期用途
仅供研究,不能用于诊断
- 此试剂盒可用于EDTA-血浆,尿液或细胞上清中人OPN的体外定量检测。由于OPN分子是不稳定的蛋白,请在使用前将其储存于-80℃,放置室温或反复冻融会使检测值降低
- 建议EDTA-血浆样品用EIA缓冲液或PBS5~10倍的稀释,如果5~10倍的稀释还是超出了最高标准品值,则需进一步稀释
- 血清或肝素血浆样品的检测结果可能不是正确值,因为OPN不稳定,易被凝血酶裂解,而且OPN分子上有若干个肝素结合位点,所以肝素血浆也会影响试验
- 建议尿液样品用EIA缓冲液或PBS200倍稀释,但各实验室应最优化稀释率。由于尿液样品易分解,建议加入PMSF(蛋白酶抑制剂)等。样品采集后不能立即检测,应贮存于-80℃或更低,避免反复冻融,否则其检测值降低。尿液中OPN的量与尿液的体积成反比,建议用肌酸酐补偿进行检测
- 细胞上清的稀释比例因细胞而异,各实验室以最优化稀释比例稀释
- 此试剂盒不能检测凝血酶裂解的人OPN
- 重组的和天然的人OPN都可用此试剂盒检测
- 包被板,96孔,包被有抗人OPN(O-17)兔IgG,亲和纯化
- 标记抗体浓缩,30X,0.4mlx1,HRP标记的抗人OPN(10A16)小鼠IgG Fab’,亲和纯化
- 标准品,0.5mlx2,重组人OPN
- EIA缓冲液,30mlx1,0.05%吐温20的PBS
- 标记抗体稀释液,12mlx1,1%BSA,含0.05%吐温20的PBS
- 显色剂,15mlx1,TMB底物液
- 终止液,12mlx1,1N硫酸
- 洗涤缓冲浓缩液,50mlx1, 40X,含0.05%吐温20的磷酸缓冲液
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文献和实验人 骨桥蛋白(OPN ) 酶联免疫分析(ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本 中 骨桥蛋白(OPN ) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人 骨桥蛋白(OPN ) 水 平。用纯化的 人 骨桥蛋白(OPN ) 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 骨桥蛋白(OPN ) ,再与 HRP 标记的 骨桥蛋白(OPN
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人骨桥素 ( OPN )ELISA 试剂盒 ( 用于母乳、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 OPN 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 OPN与单抗结合,加入生物素化的抗人 OPN ,形成免疫复合物连接
/96T 2000/3000 进口分装 F0211 骨保护素OPG 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0212 人骨保护素配体(OPG-L) 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0213 骨桥素OPN 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0214 抑瘤素Oncostatin M (OSM) 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0215 骨钙素(Osteocalcin) 48T
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