M14细胞【通过STR鉴定】

M14细胞产品概述：

M14  人黑色素瘤细胞
细胞名称	M14 （人黑色素瘤细胞）
种属	人
年龄（性别）
组织来源
生长特性	贴壁
细胞形态	上皮细胞样
背景描述
生长培养基	DMEM高糖＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

收到常温M14细胞后如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
M14细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。
2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
温馨提醒：
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。
订购M14细胞事先需要准备什么？
客户应具有一定细胞培养知识与经验，并具备基本实验设备，如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱，倒置显微镜等；还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么？规格、数量是多少：
细胞发货时，保证细胞处于生长对数期；贴壁细胞达到75%以上汇合度，约5×10^5cells/T25细胞培养瓶；传代次数5代以内；冻存细胞发2个冻存管；无微生物污染。
M14细胞发货形式：
细胞通常用T25细胞培养瓶培养，发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶，密封瓶口后放在包装盒内，以快递的方式发送给客户。天气变冷，最低温低于4℃时，以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
人骨肉癌细胞    Saos-2    MCCOY'S 5A+15%FBS 贴壁
小鼠杂交瘤    SDOW-17     DMEM+10%FBS+1%P/S  悬浮
    SFM  (BHS)     1640+10%FBS+1%P/S  悬浮
人胶质瘤细胞    SHG-44     1640+10%FBS+1%P/S   贴壁
人神经母细胞瘤细胞    SH-SY5Y    MEM 45%；F-12 45%；优质胎牛血清，10%。 
人骨肉瘤细胞    SJSA-1     DMEM+10%FBS+1%P/S 
人乳腺癌细胞    SK-BR-3     DMEM+10%FBS+1%P/S 
人皮肤黑色素瘤细胞    SK-MEL-2    MEM+10%FBS 贴壁
人肺鳞癌细胞    SK-MES-1     MEM+10%FBS+1%P/S   贴壁
人神经上皮瘤细胞    SK-N-MC     MEM+10%FBS+1%P/S   贴壁
人神经母细胞瘤    SK-N-SH     MEM+10%FBS+1%P/S   贴壁
人卵巢癌细胞    SK-OV-3    Mccoy`s 5A +10%FBS 贴壁
人肝癌细胞    smmc-7721    1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
人胶质瘤细胞    SNB-19    1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
人胃癌细胞    SNU216    1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
人肝癌细胞    SNU387    1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
人肝癌细胞    SNU449     1640+10%热灭活FBS+1%P/S   
小鼠胚胎干细胞    SOX1-GFP    DMEM+15%FBS+100×L-glu+100×NEAA+10ng/ml LIF
小鼠骨髓瘤细胞    Sp2/0     1640+10%FBS+1%P/S   圆形贴壁，传代时不可吹打！！！使其自然脱落
小鼠骨髓瘤细胞    Sp2/0-Ag14     DMEM+10%FBS+1%P/S 悬浮 不要用力吹打(生长时会沉到瓶底）
人肺腺癌细胞    SPC-A1     DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
人子宫颈鳞癌细胞    SiHa     MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
小肠内分泌细胞系    STC-1    DMEM+10%FBS+1%P/S  贴壁
人急淋白血病细胞系    SUP-B15     IMDM+0.05mM 巯基乙醇+20% FBS+1% P/S   悬浮
小鼠肾小球系膜细胞    SV40-MES-13     D/F12+10%FBS+1%P/S 贴壁
小鼠淋巴结内皮细胞    SVEC4-10    DMEM+10%FBS(热灭活）
人膀胱上皮永生化细胞    SV-HUC-1    F12K+10%FBS+1%P/S  贴壁
人结肠腺癌细胞    SW1116    L15+10%FBS 贴壁     
人骨肉瘤细胞    sw1353    L15+10%FBS+1%P/S  贴壁
人胰腺癌细胞    SW1990    L15+10%FBS 
    SW480    L15+10%FBS   贴壁     
人甲状腺癌细胞    SW579    L15+10%FBS   贴壁     
人结直肠腺癌细胞    SW620    L15+10%FBS   贴壁     
人淋巴母细胞    T2 (174xcem.T2 )    IMDM+20%FBS 悬浮
人膀胱癌细胞    T24    MACOY'S 5A+10%FBS 贴壁
人乳腺导管癌细胞    T47D    1640+0.2U/ml胰岛素+10%FBS
小鼠肺上皮细胞    TC-1     1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人乳头瘤状甲状腺癌细胞    TPC-1    DMEM+10%FBS  贴壁
神经外胚层肿瘤细胞    TC-71     1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
人尤文氏肉瘤细胞    TC-32    DMEM +10%FBS
人胶质母细胞瘤    T98G     MEM+10%FBS 贴壁