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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
TMB Horseradish Peroxidase Color Development Solution for ELISA
- 库存:
396
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖TMB显色液(ELISA HRP显色用)品牌在内的细胞生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:TMB显色液(ELISA HRP显色用)品牌
规格:100ml
英文名:TMB Horseradish Peroxidase Color Development Solution for ELISA
编号:YT076
产地:国产|进口
本试剂盒是一种采用了最新单一溶液TMB显色技术,通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色,用于ELISA等的显色液。本显色液也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。
通常的TMB显色试剂由多个组份组成,必须在使用前进行配制,并且容易产生沉淀,使用相对不太方便,并且也容易导致检测结果不太稳定。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术,把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中,仅由单一溶液组成,简化了操作步骤,并且使检测结果更加稳定可靠。
TMB,即3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下,TMB会产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm测定吸光度。
辣根过氧化物酶催化TMB显蓝色后可以使用2M H2SO4终止反应。加入硫*(代"酸")后,溶液呈黄色,此时可以在450nm测定吸光度。
本试剂盒最常用于ELISA检测,也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。用于ELISA检测时,每个样品通常使用0.2毫升显色液,一个包装的本产品共可以检测约500个样品。
储存条件:4℃,有效期一年。
TMB显色液(ELISA HRP显色用)品牌极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·PPAR凝胶迁移突变探针(1.75μM)
编号:YT246
英文名称:PPAR Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的PPAR consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-PPAR的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。这里所指的PPAR包括PPARα、PPARβ和PPARγ。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。
PPAR consensus oligo的序列如下:
5"-CAA AAC TAG GTC AAA GGT CA-3"
3"-GTT TTG ATC CAG TTT CCA GT-5"
EMSA突变探针-PPAR中PPAR的公认的结合位点发生了突变,从而使PPAR无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和PPAR的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和PPAR的结合的条带不会被抑制。参考下图。

一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
TMB显色液(ELISA HRP显色用)品牌关键词:YT076,TMB显色液(ELISA HRP显色用),TMB Horseradish Peroxidase Color Development Solut
67-42-5 乙二醇-双-(2-*基乙基)四乙酸 EGTA
102029-73-2 乙酰辅酶A Acetyl coenzyme A
BL1113 亲和硅烷
F040101 牛血清白蛋白偶联克伦特罗 BSA-CLE
PY01-081A 水解乳蛋白 250克
ARB12919 小鼠白细胞介素35(IL-35)Elisa定量检测 Mouse interleukin 35,IL-35 ELISA KIT
BTN130957 免RNA提取RT-PCR试剂盒 Cell Lysate RT-PCR Mix
ARB14090 牛腹泻病毒酶标法分析
海柯皂苷元 Florfenicol 467-55-0
ARB13363 牛卵泡抑素(FS)代做ELISA实验 Bovine follistatin,fs ELISA KIT
ARB12390 大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)elisa检测 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4,trail r4 ELISA KIT
BL0904 FITC标记羊抗马IgG抗体
ARB11546 人凋亡相关半胱*酸肽酶4(CAsp4)elisa检测操作说明书 Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,casp4 ELISA KIT
磷脂酰丝*酸 α-Ketoglutaric acid
BTN131053 蛋白级DTT DTT,Protein Grade
ARB11182 人空泡毒素相关蛋白A(VAcA)Elisa分析 Human vacuolating cytotoxin a,vaca ELISA KIT
J0208 兔抗乙肝表面抗原抗血清 1ml/10ml
F030212 HRP标记山羊抗兔IgG抗体 Goat Anti-Rabbit IgG*HRP
亚精胺 Acyl coenzyme A Synthetase 124-20-9
1320-06-5 Oil Red O 油红O
TMB显色液(ELISA HRP显色用)品牌关键词:YT076,TMB显色液(ELISA HRP显色用),TMB Horseradish Peroxidase Color Development Solut
·His-tag蛋白纯化树脂(镍柱)
编号:YT616
英文名称:His-tag Purification Resin
规格:10ml|100ml
本品是一种新型的可以兼容还原剂和螯合剂,并能简单、快速、高效并且高特异性地纯化His标签蛋白的纯化介质。
通常带有6个组*酸标签的重组蛋白(6xHis-tagged recombinant protein)或带有6个以上连续组*酸标签的重组蛋白,被称为His标签蛋白。蛋白样品溶液通过本品时,重组蛋白His标签上的组*酸残基能特异性地结合到本品中的镍离子上,其它蛋白则不能被结合。洗涤后,His标签重组蛋白可在非变性条件下被洗脱,从而被分离纯化。
本产品对His标签重组蛋白的亲和力强、选择性高、结合容量大,使用本产品可以获得高纯度的His标签重组蛋白,可用于简单、快速、高效地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。纯化的蛋白可以用于结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。
本产品采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Sepharose CL-6B)为基质,并使用了进一步优化的接臂和镍离子螯合技术,和目前市售的大多数Ni-NTA agarose或类似产品相比,非特异性蛋白结合显著降低,耐受压力强,镍离子螯合非常稳定。和同类产品相比,本产品由于镍离子基本不会流失,重复使用本纯化介质时不需要重新装载镍离子。
Ni-NTA agarose以及绝大多数类似的镍柱产品不能耐受蛋白样品中常见浓度的还原剂如二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等以及常见浓度的螯合剂如EDTA等,但本产品可以很好地耐受DTT等还原剂以及EDTA等螯合剂。本产品可耐受20mM DTT等还原剂,以及20mM EDTA等螯合剂。这为需要添加还原剂或螯合剂的蛋白样品的纯化提供了可能性。本产品不兼容8M尿素和6M盐*(代"酸")胍。对于包涵体蛋白的纯化,在采用8M尿素或6M盐*(代"酸")胍溶解蛋白的情况下,需要通过透析去除尿素和盐*(代"酸")胍后才能使用本产品进行His标签蛋白的纯化。
本产品已经螯合了镍离子,呈蓝色,凝胶的颗粒直径为45-165μm。可耐受的最大压力为0.025MPa,约合5.8psi。采用固定流速进行蛋白纯化时的推荐流速为0.5ml/min。
本产品可以高容量、高特异性地结合His标签蛋白。最大蛋白结合量为20-30mg蛋白/毫升凝胶。实际使用时的最大结合量取决于待纯化的His标签重组蛋白的分子量大小,分子量越大则最大结合容量越大,分子量越小则最大结合容量越小。对于分子量为50kD的蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为6-10mg,对于分子量为100kD的蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为12-20mg。但对于分子量相同的蛋白,也会因为蛋白本身特性的不同,结合的最大容量也会有所不同。
本产品储存在30%乙醇中,10ml总体积中5ml为凝胶,5ml为液体。使用时宜把凝胶充分重悬后再吸取。
本产品最多可纯化100-150mg带有His标签重组蛋白。对于分子量为50kD的带有His标签重组蛋白,一个包装的本产品实际最多可纯化约30-50mg蛋白。
注意事项:
1. 本产品使用过程中,缓冲试剂如Tris、HEPES、MOPS等的浓度不宜超过100mM,EDTA浓度不宜超过20mM,SDS和sarkosyl的浓度不宜超过0.3%,Triton、Tween、NP-40的浓度不宜超过2%,脱氧胆酸*、CHAPS的浓度不宜超过1%,组*酸浓度不宜超过20mM,*离子浓度不宜超过5mM,*离子和*离子浓度可以高达2M,甘油浓度可以高达50%。其它未提及试剂的兼容性可以参考上述试剂,但还有待实验验证。
2. 保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。
3. 若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物,可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
4. 蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作,并应始终放置在4℃或冰浴,以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解,可以在裂解液中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物。
5. 若使用本说明书提供的条件无法达到理想的纯化效果,可尝试改变洗涤液和洗脱液中咪唑的浓度和(或)pH,以达到最优效果。
储存条件:4℃,有效期一年。
我公司正在优惠促销免疫检测等系列产品,期待您的咨询选购TMB显色液(ELISA HRP显色用)品牌。
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文献和实验气泡。加样时间宜控制在10分钟内。 洗涤:甩尽孔内液体,每孔加洗涤液350 μL,浸泡1-2分钟,吸去或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。重复此洗板步骤3次。提示:此处与其他洗板步骤都可用洗板机。每一步洗涤充分是实验的根本。 HRP酶结合物:每孔加酶结合物工作液100 μL,混匀,加上覆膜,37℃孵育30分钟。 洗涤:弃去孔内液体,洗板5次,方法同步骤2。 底物:每孔加底物溶液(TMB)90 μL,混匀,加上覆膜,37℃避光孵育15分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30min。从理论上说,37℃30min才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10min内,绝大部分催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30min后,终止反应比色测定。此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效
室所用洗板机3次洗板即可达到要求。 六、显色 在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或 粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37 ℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37 ℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37 ℃下反应25~30分钟后,终止反应比色
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