北京现货Klenow片段(无外切酶活性)哪里卖

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名称：北京现货Klenow片段(无外切酶活性)哪里卖
规格：100U
英文名：Klenow Fragment，Exo-
产地：国产|进口
编号：YT510
本酶是没有外切酶活性的Klenow片段，是大肠杆菌聚合酶I(E.coli.DNA polymerase I)的大片段(Large Fragment)缺失了外切酶活性的突变体。Klenow Fragment，Exo-保留了DNA聚合酶I的5"→3"聚合酶活性，但缺少完整的Klenow酶的5"→3"和3"→5"外切酶活性。

特点：由于Klenow Fragment，Exo-没有外切酶活性，其在末端补平时经常会在3"末端额外加上1个或多个核苷酸，因此不能用于产生平末端而用于后续的连接。
用途：5"突出末端的标记；随机引物法进行DNA标记；Sanger双脱氧法进行DNA测序等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为突变的 polA 基因片段。
分子量：约68kDa(单体)。
活性定义：37℃30分钟内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：67mM potassiu*(代"m") phosphate(pH7.4)，6.7mM MgCl2，1mM 2-mercaptoethanol，0.033mM dATP，0.033mM dTTP，0.4MBq/ml[3H]-dTTP，62.5μg/ml poly(dA-dT)·poly(dA-dT)。
纯度：不含DNA内切酶，不含RNase。
酶储存溶液：25mM Tris-HCl(pH7.5)，0.1mM EDTA，1mM DTT，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：500mM Tris-HCl(pH8.0 at 25℃)，50mM MgCl2， 10mM DTT。
失活或抑制：75℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Klenow Fragment，Exo-失活。金属离子螯合剂，无机焦磷酸盐(PPi)，大剂量的无机磷酸盐(Pi)均对Klenow Fragment，Exo-有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1. 随机引物法进行DNA标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
DNA———————————————————————————————10µl(100ng)
Reaction Buffer (10X)——————————————————————5µl
125µM random decamer or hexamer primer——————————————10µl
补充无核酸酶的去离子水——————————————————————至40μl
混匀后沸水浴孵育5-10分钟，立即置于冰浴冷却。进行后续步骤前离心沉淀液
3 dNTP Mixture (0.25mM each , without the labeled—————————4μl
[α-32P]-dNTP, ~110 TBq/mmol (3000Ci/mmol)————————————1.85MBq (50μCi)
Klenow Fragment，Exo-———————————————————————1µl (5U)
补充无核酸酶的去离子水———————————————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 对于random decamer primer，37℃孵育5分钟；对于random hexamer primer，37℃孵育10分钟。
d. 加入4μl 0.25mM dNTP，混匀后37℃孵育5分钟。
e. 加入1μl 0.5M EDTA，pH8.0终止反应。
f. 取1μl上述液体用于检测标记的效率。
g. 用Sephadex G-50或Bio-Gel P-60或其它适当试剂盒纯化标记好的探针。

2. 双链DNA 5’突出(5’ overhang)末端的标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
Digested DNA ——————————————————————————10~15µl(0.1~4μg)
Reaction Buffer (10X)——————————————————————2µl
[α-32P]-dNTP, ~15-30 TBq/mmol(400-800Ci/mmol) —————————0.74 MBq(20μCi)
或 [α-32P]-dNTP, ~110 TBq/mmol(3000Ci/mmol)———————————2.96 MBq(80μCi)
3 dNTP Mixture (2.5mM each , without the labeled）————————2μl
Klenow Fragment，Exo-———————————————————————0.2μl (1U)
补充无核酸酶的去离子水———————————————————————至20µl
b. 按上述体系配好之后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 30℃孵育15分钟。
d. 75℃孵育10分钟终止反应。

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。

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·兔抗CDK6抗体
编号：YT702
英文名称：CDK6 Rabbit Polyclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于兔的抗CDK6的多克隆抗体。
宿主：兔
克隆性：多克隆抗体
用途：WB,IHC,ICC, IF
交叉反应性：人，小鼠，大鼠
分子量：37KDa
推荐稀释比例：WB(1:1000),IF(1:100),IHC(1:100),ICC(1:100)

About this Antibody
Name	CDK6 Rabbit Polyclonal Antibody
Category	Polyclonal antibody(pAb); Primary antibody
Isotype	IgG
Purification	Peptide affinity purified
About the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing rabbits with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to CDK6.
Gene ID	1021
SwissProt	Q00534
Synonyms	PLSTIRE
Category	Cell Cycle / Checkpoint Control
Background	CDK6 protein contains a catalytic core composed of a serine/threonine domain.This protein also contains an ATP-binding pocket, inhibitory and activating phosphorylation sites, a PSTAIRE-like cyclin-binding domain and an activating T-loop motif. CDK6 is involved in a positive feedback loop that activates transcription factors through a reaction cascade. CDK6 is important for the control of G1 to S phase transition. However, in recent years, new evidence proved that the presence of CDK6 is not essential for proliferation in every cell type, the cell cycle has a complex circuitry of regulation and the role of CDK6 might be more important in certain cell types than in others, where CDK4 or CDK2 can act as protein kinases compensating its role.

注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·总谷胱甘肽检测试剂盒
编号：YT293
英文名称：Total Glutathione Assay Kit
规格：100次
本试剂盒是一种简单易行的检测总谷胱甘肽(GSSG+GSH)的试剂盒。通过谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH)，而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系，前后两个反应合并起来后，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素，总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定A412就可以计算出总谷胱甘肽的量。

本试剂盒的具体反应原理如下：

两个反应相合并：


还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源，对于维护蛋白巯基适当的氧化还原状态有重要作用，并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常90-95%为还原型谷胱甘肽。

本试剂盒可以检测动物组织、血浆、红细胞、和培养细胞或其它适当样品中总谷胱甘肽的含量。本试剂盒提供了蛋白去除试剂S，可以更加准确地测定出含有蛋白的样品中的总谷胱甘肽的量。本试剂盒的检测下限为1μM。一个试剂盒共可以进行100次检测。

试剂盒组分：
总谷胱甘肽检测缓冲液————60ml
谷胱甘肽还原酶———————150μl
还原型谷胱甘肽(GSH)—————4.5mg
DTNB————————————4.5mg
蛋白去除试剂S————————0.4g
NADPH————————————4mg
DMSO————————————1.5ml

注意事项：
1. 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。特别是DTT、巯基乙醇等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定，请尽量避免。
2. 一定要严格控制反应时的温度和反应时间，否则需每次都做标准曲线。
3. NADPH等试剂不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
4. DMSO在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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ARB11883 人激素敏感性脂肪酶(HSL)定量分析 Human hormone sensitive lipase,hsl ELISA KIT
BL1336 通用引物 ITS5
BL1344 PH值标准液(PH7.01)
BTN101123 PVDF膜 PVDF Membrane(Millipore)
ARB13851 猪气喘病病毒抗体含量分析 
BFD071 H7亚型禽流感抗原快速检测卡
次甲基绿 CNP-Afu 224967-52-6
DN2001 酵母基因组DNA快速提取试剂盒(离心柱型)
ARB13673 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)代做ELISA实验 Rabbit peroxisome prolifeRator-activated receptor γ,ppar-γ ELISA KIT
BL1249 MarkerIDNA Ladder
磷酸**铵 PK 7783-13-3
对*基*甲*(代"酸") Bismuth subsalicylate 150-13-0

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