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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
PCR 专用 LIC 克隆套装1μg价格
- 库存:
39
- 供应商:
上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
PCR 专用 LIC 克隆套装1μg价格特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
详细介绍:
PCR 专用 LIC 克隆套装1μg价格客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
PCR 专用 LIC 克隆套装1μg价格注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
PCR 专用 LIC 克隆套装1μg价格实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Propidium Iodide (50 mg) 3,8-diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenyl-phenanthridinium, diiodide; PI; Propidium Iodide
JWH 398 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5 (1 mg) (4-chloronaphthalen-1-yl)(1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5)methanone; JWH 398 N-(5-hydroxypentyl) metabolite-d5
1,5-Isoquinolinediol (5 mg) 5-hydroxy-1(2H)-isoquinolinone; 1,5-Dihydroxyisoquinoline|NSC 65585; 1,5-Isoquinolinediol
5-fluoro PB-22 6-hydroxyquinoline isomer (1 mg) quinolin-6-yl 1-(5-fluoropentyl)-1H-indole-3-carboxylate; 5-fluoro PB-22 6-hydroxyquinoline isomer
4-DAMP (25 mg) 4-[(2,2-diphenylacetyl)oxy]-1,1-dimethyl-peridinium, monoiodide; 4-Diphenylacetoxy-N-methyl-peridine methiodide; 4-DAMP
Myoseverin (5 mg) N2,N6-bis[(4-methoxyphenyl)methyl]-9-(1-methylethyl)-9H-purine-2,6-diamine; Myoseverin
NNEI 2’-naphthyl isomer (5 mg) N-2-naphthalenyl-1-pentyl-1H-indole-3-carboxamide; MN-24 2’-naphthyl isomer; NNEI 2’-naphthyl isomer
AG-1024 (1 mg) 2-[[3-bromo-5-(1,1-dimethylethyl)-4-hydroxyphenyl]methylene]-propanedinitrile; Tyrphostin AG-1024|AGS 20AG-1024
Luffariellolide (1 mg) 4-[(3E,7E)-4,8-dimethyl-10-(2,6,6-trimethyl-1-cyclohexen-1-yl)-3,7-decadien-1-yl]-5-hydroxy-2(5H)-furanone; Luffariellolide
Phenformin (hydrochloride) (10 g) N-(2-phenylethyl)-imidodicarbonimidic diamide, monohydrochloride; Phenformin (hydrochloride)
AB-PINACA N-(5-hydroxypentyl) metabolite (1 mg) N-(1-amino-3-methyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(5-hydroxypentyl)-1H-indazole-3-carboxamide; AB-PINACA N-(5-hydroxypentyl) metabolite
Cholesterol Sulfate (sodium salt) (250 mg) (3β)-3-(hydrogen sulfate)-cholest-5-en-3-ol, monosodium salt; SCS|Sodium Cholesteyl Sulfate; Cholesterol Sulfate (sodium salt)
VU590 (hydrochloride) (5 mg) 7,13-bis(4-nitrobenzyl)-1,4,10-trioxa-7,13-diazacyclopentadecane, dihydrochloride; CID-4536383|ML-111; VU590 (hydrochloride)
P005091 (50 mg) 1-[5-[(2,3-dichlorophenyl)thio]-4-nitro-2-thienyl]-ethanone; P005091
Farnesyl Pyrophosphate (ammonium salt) (1 mg) P-[(2E,6E)-3,7,11-trimethyl-2,6,10-dodecatrien-1-yl] ester-diphosphoric acid, triammonium salt; FPP; Farnesyl Pyrophosphate (ammonium salt)
Prostaglandin E1 ethyl ester (10 mg) 11α,15S-dihydroxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid, ethyl ester; Alprostadil ethyl ester|PGE1 ethyl ester; Prostaglandin E1 ethyl ester
BRD4770 (1 mg) HMTase Inhibitor VI; 2-(benzoylamino)-1-(3-phenylpropyl)-1H-benzimidazole-5-carboxylic acid, methyl ester
Sulindac sulfide (5 mg) 5-fluoro-2-methyl-1Z-[[4-(methylthio)phenyl]methylene]-1H-indene-3-acetic acid
9-Nitrooleate-d17 (1 mg) 9-Nitrooleic Acid-d17|9-nitro-9-trans-Octadecenoic Acid-d17; 9-nitro-9E-octadecenoic-11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,18-d17 acid
(±)8-HDoHE (50 ug) (±)8-hydroxy-4Z,6E,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; 8-hydroxy Docosahexaenoic Acid; (±)8-HDoHE球孢白僵菌 Beauveria bassiana尖孢镰刀菌棉花专化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
FO(小鼠骨髓瘤细胞)俄勒冈地鼠
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae热带假丝酵母 Candida tropicalis
东北拟青霉蛹虫草 Cordyceps millitaris
人腺上皮细胞完全培养基小鼠小肠平滑肌细胞完全培养基
HuH-7人肝细胞人心室肌细胞完全培养基
PCR 专用 LIC 克隆套装1μg价格酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
香菇 Lentinula edodes肺炎克雷伯氏菌 Klebsiella pneumoniae
A2780(人卵巢细胞)A3(人T淋巴细胞白血病细胞)
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus串珠菌 Leuconostoc lactis
苜蓿中华根瘤菌豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞)MDA-MB-436(人腺细胞)
深红正青霉 Eupenicillium rubidurum莫格球拟酵母 Torulopsis mogii
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti宛氏拟青霉 Paecilomyces variotii
人绒毛膜间充质基质细胞牛肾细胞
大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePC-3M(人前列腺细胞)
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文献和实验The protocol for LIC by Exonuclease III
of the vector through running DNA gel and the vector is prepared for LIC; 5. Amplify the insert by PCR with the overlap primers, gel-purified, and quantitation; the insert is also prepared for LIC;(You can also treat the templates with DpnI
PCR基础 聚合酶链式反应(PCR)过程利用模板变性,引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列。这是一个指数增长的过程,因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板,使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术。一般,经过20-30个循环得到的扩增产物就足够在溴化乙锭染色的凝胶上观察到。反应包括几个成分(表1)。模板可以为纯化的基因组或质粒DNA;由RNA转化得到的cDNA;或未经纯化的粗制生物样品,如细菌克隆或噬菌斑。引物确定了扩增产物的序列和长度。最常用的热稳定聚合酶是Taq DNA
写得真不错)引物设计方面还有很多话题可说,比如如何利用引物搭桥将两个片段通过PCR 而不是酶连接起来、如果要设计引物表达蛋白时注意“N 端规则”??这些有趣的话题可以见论坛内相关讨论,这将是我们推出“原核表达”专辑时的内容。PCR 成分 引用《分子克隆3》提供的PCR 标准反应条件: 模板 1pg-1μg 引物 1μmol/L DNA 聚合酶 1-5 单位 Mg2+ 1.5mmol/L dNTPs 200μmol/L KCl 50 mmol/L 一、模板 模板可是PCR 的关键,模板
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