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- 2025年07月14日
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转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销
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上海一研
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销注意事项：
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如： 真细菌孢子（eubacterial spores）、内芽孢（endospores）、格兰仕阳性菌（gram positive bacteria）、酵母（yeast）、线虫（nematodes）、海藻（algea）、真菌（fungi）等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸，并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法，可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品，附加额外的处理方法。
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
硫链霉素（25GM） Streptomycin Sulfate， ≥650 units/mg
活细胞荧光示踪探针VFSE 500 VFSE 500
DEAC，SE [7-二胺基-2-氧代-2-苯并吡喃-3-羧，琥珀酰亚胺] DEAC，SE [7-Diethylaminocoumarin-3-carboxylic acid， succinimidyl ester]
6-氨基己醇 6-Aminohexanol
试卤灵 β-D-吡喃半乳糖苷 Resorufin beta-D-galactopyranoside
新型钙离子荧光探针Rhod-4， 钠盐 Quest Rhod-4， sodium salt
iFluor 750马来酰亚胺 iFluor 750 maleimide
Rhod-FF， AM Rhod-FF， AM
Cyanine 5。5马来酰亚胺 [相当于Cy5。5马来酰亚胺] Cyanine 5。5 maleimide [equivalent to Cy5。5 maleimide]
SEM-BSA偶联物[用于ELISA] Semicarbazide （SEM）-BSA Conjugate
Benzedrone （hydrochloride） （10 mg） 2-（benzylamino）-1-（p-tolyl）propan-1-one， monohydrochloride； 4-MBC； Benzedrone （hydrochloride）
BW A868C （5 mg） 3-[（2-cyclohexyl-2-hydroxyethyl）amino]-2，5-dioxo-1-（phenylmethyl）-4-imidazolidineheptanoic acid； BW A868C
Disuccinimidyl Suberate （100 mg） 1，8-bis（2，5-dioxo-1-pyrrolidinyl）ester octanedioic acid； DSS|NSC 340008； Disuccinimidyl Suberate
ThioFluor 623 （5 mg） N-[4-[（1E）-2-[4-cyano-5-（dicyanomethylene）-2，5-dihydro-2，2-dimethyl-3-furanyl]ethenyl]phenyl]-N-[2-[2-（2-methoxyethoxy）ethoxy]ethyl]2，4-dinitro-benzenesulfonamide； Fluorescent Thiol Probe； ThioFluor 623
CAY10589 （10 mg） 2-[[4-[（[1，1’-biphenyl]-4-ylmethyl）amino]-6-chloro-2-pyrimidinyl]thio]-octanoic acid； CAY10589
trans-Zeatin （50 mg） 2E-methyl-4-（9H-purin-6-ylamino）-2-buten-1-ol； trans-Zeatin
HNHA （5 mg） N-hydroxy-7-（2-naphthalenylthio）-heptanamide； Histone Deacetylase Inhibitor VI； HNHA
Myristic Acid （10 g） tetradecanoic acid； NSC 5028； Myristic Acid 褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum 植物杆菌 Lactobacillus plantarum
BGC823(人胃细胞) 杀结核链霉菌 Streptomyces tubercidicus
薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri 大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti 鞘氨醇杆菌属 Sphingobacterium sp.
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销Protein G-Sepharose/Protein G琼脂糖凝胶 黑曲霉 Aspergillus niger 国产 gersion
暂无 Leuconostoc garlicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
黑木耳 Auricularia auricula RD(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞)
中性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 杆菌属 Lactobacillus sp.
小鼠卵巢上皮细胞完全培养基 根瘤菌 Rhizobium sp.
皮状丝孢酵母 Trichosporon cutaneum Tris-Glycine
费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii 酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞) 栎迷孔菌 gersion
宇佐美曲霉变种 Aspergillus usamii var. 枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis
白假丝酵母 Candida albicans HBZY-1(大鼠肾小球系膜细胞)
小鼠皮下脂肪细胞完全培养基 酸球菌霍氏亚种 Lactococcus lactis subsp. hordniae
大鼠血管外膜成纤维细胞完全培养基 苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
1.从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
2．匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3．分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如： 真细菌孢子（eubacterial spores）、内芽孢（endospores）、格兰仕阳性菌（gram positive bacteria）、酵母（yeast）、线虫（nematodes）、海藻（algea）、真菌（fungi）等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸，并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法，可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品，附加额外的处理方法。
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟，弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥，过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解，-70℃保存。
硫链霉素（25GM） Streptomycin Sulfate， ≥650 units/mg
活细胞荧光示踪探针VFSE 500 VFSE 500
DEAC，SE [7-二胺基-2-氧代-2-苯并吡喃-3-羧，琥珀酰亚胺] DEAC，SE [7-Diethylaminocoumarin-3-carboxylic acid， succinimidyl ester]
6-氨基己醇 6-Aminohexanol
试卤灵 β-D-吡喃半乳糖苷 Resorufin beta-D-galactopyranoside
新型钙离子荧光探针Rhod-4， 钠盐 Quest Rhod-4， sodium salt
iFluor 750马来酰亚胺 iFluor 750 maleimide
Rhod-FF， AM Rhod-FF， AM
Cyanine 5。5马来酰亚胺 [相当于Cy5。5马来酰亚胺] Cyanine 5。5 maleimide [equivalent to Cy5。5 maleimide]
SEM-BSA偶联物[用于ELISA] Semicarbazide （SEM）-BSA Conjugate
Benzedrone （hydrochloride） （10 mg） 2-（benzylamino）-1-（p-tolyl）propan-1-one， monohydrochloride； 4-MBC； Benzedrone （hydrochloride）
BW A868C （5 mg） 3-[（2-cyclohexyl-2-hydroxyethyl）amino]-2，5-dioxo-1-（phenylmethyl）-4-imidazolidineheptanoic acid； BW A868C
Disuccinimidyl Suberate （100 mg） 1，8-bis（2，5-dioxo-1-pyrrolidinyl）ester octanedioic acid； DSS|NSC 340008； Disuccinimidyl Suberate
ThioFluor 623 （5 mg） N-[4-[（1E）-2-[4-cyano-5-（dicyanomethylene）-2，5-dihydro-2，2-dimethyl-3-furanyl]ethenyl]phenyl]-N-[2-[2-（2-methoxyethoxy）ethoxy]ethyl]2，4-dinitro-benzenesulfonamide； Fluorescent Thiol Probe； ThioFluor 623
CAY10589 （10 mg） 2-[[4-[（[1，1’-biphenyl]-4-ylmethyl）amino]-6-chloro-2-pyrimidinyl]thio]-octanoic acid； CAY10589
trans-Zeatin （50 mg） 2E-methyl-4-（9H-purin-6-ylamino）-2-buten-1-ol； trans-Zeatin
HNHA （5 mg） N-hydroxy-7-（2-naphthalenylthio）-heptanamide； Histone Deacetylase Inhibitor VI； HNHA
Myristic Acid （10 g） tetradecanoic acid； NSC 5028； Myristic Acid 褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum 植物杆菌 Lactobacillus plantarum
BGC823(人胃细胞) 杀结核链霉菌 Streptomyces tubercidicus
薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri 大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti 鞘氨醇杆菌属 Sphingobacterium sp.
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销Protein G-Sepharose/Protein G琼脂糖凝胶 黑曲霉 Aspergillus niger 国产 gersion
暂无 Leuconostoc garlicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
黑木耳 Auricularia auricula RD(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞)
中性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 杆菌属 Lactobacillus sp.
小鼠卵巢上皮细胞完全培养基 根瘤菌 Rhizobium sp.
皮状丝孢酵母 Trichosporon cutaneum Tris-Glycine
费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii 酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
NCI-H205(人肾上腺腺瘤细胞) 栎迷孔菌 gersion
宇佐美曲霉变种 Aspergillus usamii var. 枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis
白假丝酵母 Candida albicans HBZY-1(大鼠肾小球系膜细胞)
小鼠皮下脂肪细胞完全培养基 酸球菌霍氏亚种 Lactococcus lactis subsp. hordniae
大鼠血管外膜成纤维细胞完全培养基 苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次直销公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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文献和实验相关实验
浓度不同，两种引物浓度相差 100 倍。在最初 20 各循环中，主要产物是双链 DNA。当低浓度引物被耗尽后，高浓度引物引导的 PCR 就会产生大量单链 DNA，单链 DNA 可用于序列测定。 三、主要试剂 1. DNA 模板（1ng/μL）（质粒 R-pGEX-4T-1，R 指代外源基因） 2. 2.5mmol/LdNTP (TaKaRa) 3. 10×PCR 缓冲液(TaKaRa) 4. 25mmol/L MgCl 2 (TaKaRa) 5. 引物 1、引物 2（5pmol/μL） 引物
随着分子生物学技术的发展，检测基因结构和突变的方法不断涌现。尤其是 PCR 技术问世以后，各种与 PCR 相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展。如不对称 PCR 产物的直接测序 、核糖核酸酶酶切法 (Ribonuclease cleavage，RNAase)、限制性片段长度多态性分析 (Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP) 等等已成为基因分析的有力工具。但这些方法操作比较繁琐，局限性较大，或要求实验条件高，不适合一般临床
用ReadyMixTM PCR Reaction Mix进行拟南芥SSLP
用ReadyMix TM PCR Reaction Mix 进行拟南芥SSLP （32 个样品+3 个对照） 一、PCR 采用SIGMA REDTaq® ReadyMixTM PCR Reaction Mix提供的 试剂 （包括20 mM Tris-HCl, pH 8.3, 100 mM KCl, 3 mM MgCl2, 0.002% gelatin, 0.4 M dNTP
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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