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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
ATP 溶液,2.5mM2mL说明书
- 库存:
47
- 供应商:
上海一研
ATP 溶液,2.5mM2mL说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
ATP 溶液,2.5mM2mL说明书实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
ATP 溶液,2.5mM2mL说明书实验步骤:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
ATP 溶液,2.5mM2mL说明书特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
ATP 溶液,2.5mM2mL说明书客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
9(S)-HODE cholesteryl ester (100 ug) 9S-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 9(S)-HODE cholesteryl ester
Half Volume 96-Well Solid Plate (black) (5 ea) Half Volume 96-Well Solid Plate (black)
8-Isoprostane EIA Antiserum (100 dtn) 8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane EIA Antiserum
Cyclic GMP AChE Tracer (100 dtn) cGMP AChE Tracer; Cyclic GMP AChE Tracer
DyLightTM 549-Conjugated Goat Anti-Mouse IgG Secondary Antibody (1 ea) DyLightTM 549-Conjugated Goat Anti-Mouse IgG Secondary Antibody
EP2 Receptor (rat) STEP Strip Plate (1 ea) EP2 Receptor (rat) STEP Strip Plate
Butenoyl PAF (50 mg) 1-O-hexadecyl-2-O-(2E-butenoyl)-sn-glyceryl-3-phosphocholine; Butenoyl PAF
Thioetheramide-PC (25 mg) 1,2-dideoxy-1-(S-hexadecyl)thio-2-(N-hexadecanoyl)amino-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 1-Palmitylthio-2-palmitoylamido-1,2-dideoxy-sn-glycero-3-phosphorylcholine; Thioetheramide-PC
SMase Alkaline Phosphatase (1 ea) SMase Alkaline Phosphatase
Pyruvate Assay Standard (1 ea) Pyruvate Assay Standard
Indomethacin N-octyl amide (5 mg) N-octyl-1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-1H-indole-3-acetamide; Indomethacin N-octyl amide嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
拟囊体侧耳 Pleurotus cystidiosus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠成年表皮角质形成层细胞完全培养基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
人表皮角质形成细胞完全培养基M14(人黑色素瘤细胞)
荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens植物杆菌 Lactobacillus Plantarum
枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis沼泽红假单胞菌 Rhodopseudomonas palustris
HFT-8810(人胎儿胸腺细胞株)大鼠肝窦内皮细胞完全培养基
台湾根霉 Rhizopus formosensis青春双歧杆菌 Bifidobacterium adolescentis
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti黑曲霉 Aspergillus niger
人羊膜间充质基质细胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
人淋巴成纤维细胞完全培养基P815(小鼠肥大细胞瘤细胞)
ATP 溶液,2.5mM2mL说明书酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae杆菌属 Lactobacillus sp.
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
ZR-75-30(人腺细胞)TG-905(人脑胶质母细胞瘤细胞)
炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii猴菌
K562全细胞裂解液球形芽胞杆菌 Bacillus sphaericus100μg
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeF81(猫肾细胞)
小单孢菌 Micromonospora sp.酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
非洲绿猴SV40转化的肾细胞苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium melilotiCOS-1
热带假丝酵母 Candida tropicalisRS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)
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文献和实验一、ATP的生成方式 体内ATP生成有两种方式 (一)底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation) 底物分子中的能量直接以高能键形式转移给ADP生成ATP,这个过程称为底物水平磷酸化,这一磷酸化过程在胞浆和线粒体中进行,包括有: (二)氧化磷酸化(oxidative phosphorylation) 氧化和磷酸化是两个不同的概念。氧化是底物脱氢或失电子的过程,而磷酸
ATP或称F0F1 复合物(F0F1 complexes), 该酶在分离状态下具有ATP水解酶的活性,在结合状态下具有ATP合酶的活性, 属F型ATPase。除了线粒体中有ATP合酶外,植物叶绿体的类囊体和好氧细菌都有ATP合酶的同源物,ATP合酶的分子组成和主要特点是: 头部:头部即F1, 细菌和线粒体ATP合酶的F1都是水溶性的蛋白,结构相似,由5种多肽(α、β、γ、δ和ε)组成的九聚体(α3β3γδε),α亚基和β亚基构成一种球形的排列,头部含有三个催化ATP
1ml蒸馏水,倾入上述磷酸钾溶液内,加热至37℃。酵母液5ml,再加4ml蒸馏水稀释,加热至37℃,倒入上述溶液中,再加MgCl2 0.016g及葡萄糖0.5g,再加蒸馏水3ml,混匀,立即取样0.2ml,检测AMP及无机磷的含量。此时测得的磷称为初磷。薄板层析图谱上只有AMP斑点,无ATP斑点。以后每隔30min取样测定,至明显看出无机磷及AMP含量下降、ATP含量上升即可(约2h~3h)。 2发酵液样品处理 将所取之0.2ml样液置离心管中,立即加入2%三氯醋酸溶液1ml,摇匀,离心(3000
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