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- HZ-0097
- 2025年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温或干冰运输
- 保质期：
无限
- 英文名：
HCT-15（人结直肠腺癌细胞）
- 库存：
1×10⁶cells/T25培养瓶
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
50-100万个细胞数
HCT-15细胞产品概述：
| HCT-15 人结直肠腺癌细胞
|
|
| 细胞名称 |
HCT-15（人结直肠腺癌细胞） |
| 种属 |
人 |
| 年龄（性别） |
男 |
| 组织来源 |
结直肠腺癌 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
| 背景描述 |
DNA指纹鉴定证据表明，HCT-15细胞和DLD-1细胞来源于同一个人；但同工酶及细胞染色体组型分析仍存疑问。HCT-15细胞呈CSAp阴性(CSAp-)；HCT-15角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 |
| 生长培养基 |
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
| 培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
收到常温HCT-15细胞后如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
HCT-15细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。
2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
温馨提醒：
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。
订购HCT-15细胞事先需要准备什么？
客户应具有一定细胞培养知识与经验，并具备基本实验设备，如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱，倒置显微镜等；还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么？规格、数量是多少：
细胞发货时，保证细胞处于生长对数期；贴壁细胞达到75%以上汇合度，约5×10^5cells/T25细胞培养瓶；传代次数5代以内；冻存细胞发2个冻存管；无微生物污染。
HCT-15细胞发货形式：
细胞通常用T25细胞培养瓶培养，发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶，密封瓶口后放在包装盒内，以快递的方式发送给客户。天气变冷，最低温低于4℃时，以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
「外泌体 + 环状 RNA」国自然双热点助力肿瘤研究发表高分文章
的外泌体能促进 CRC 的增殖、迁移和侵袭 作者从两种 CRC 细胞系（HCT116和SW480）上清中分别分离获得外泌体，经过透射电镜、NTA 和 WB 鉴定后，确认已分离出外泌体。随后，作者用外泌体处理对应的 CRC 细胞，发现外泌体能显著促进 CRC 细胞增殖、迁移和侵袭，并减少凋亡。 WB 结果也显示，外泌体能提升 CRC 细胞中 BCL-2、 N-cadherin、Vimentin、MMP9 蛋白水平，和降低 E-cadherin、Cleaved-caspase3、Cleaved
短串联重复序列（short tandem repeat，STR），又称为微卫星DNA ，重复单位为2-6bp，重复次数10~60多次，在DNA复制过程中的滑动、复制、修复过程中滑动链与互补链的碱基错配，从而导致一个或几个重复单位的缺失或插入，形成STR的多态性，主要应用于遗传连锁图谱分析、家系鉴定、身份认证等领域，同时也是鉴定细胞株被错误识别和交叉污染的主要工具。细胞株被错误识别及交叉污染的现象还是比较普遍的，虽然科研工作者使用各种各样的传统方法来鉴定细胞，但细胞交叉污染的问题却有增无减
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