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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温或干冰运输
- 保质期:
无限
- 英文名:
DU 145(人前列腺癌细胞)
- 库存:
1×10⁶cells/T25培养瓶
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
50-100万个细胞数
DU 145细胞产品概述:
| DU 145 人前列腺癌细胞
|
|
| 细胞名称 |
DU 145(人前列腺癌细胞) |
| 种属 |
人 |
| 年龄(性别) |
男;69岁 |
| 组织来源 |
前列腺;转移灶;脑癌 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
| 背景描述 |
DU 145细胞是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移病灶损害中建株的。DU 145细胞和从软琼脂中分离到的细胞不具有可检测的激素敏感性,酸性磷酸酶呈弱阳性。对DU 145细胞及原始肿瘤细胞的亚显微结构分析可见微绒毛,微丝及细胞桥粒,有许多线粒体,发育良好高尔基体和异质溶酶体。DU 145细胞不表达前列腺抗体。 |
| 生长培养基 |
MEM+10% FBS+1% P/S |
| 培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
收到常温DU 145细胞后如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
DU 145细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
温馨提醒:
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。
订购DU 145细胞事先需要准备什么?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么?规格、数量是多少:
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
DU 145细胞发货形式:
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
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HZ-0298 NCI-H1975(人肺腺癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0069 COS-7(非洲绿猴SV40转化的肾细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0068 COS-1(非洲绿猴SV40转化的肾细胞) 5×10cells/T25培养瓶
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HZ-0066 COLO 205(人结肠癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
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HZ-0064 CoC1(人卵巢癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
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HZ-0063 CNE(人鼻咽癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0062 CHO-K1(仓鼠卵巢细胞亚株) 5×10cells/T25培养瓶
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HZ-0294 MuM-2C(人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0293 MuM-2B(人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0292 MKN-45(人胃癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0291 MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0290 MDA-MB-468(人乳腺癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0289 MDA-MB-435(人乳腺癌高转移细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0288 MA-891(小鼠乳腺癌高转移细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0287 M14(人黑色素瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
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HZ-0285 3T6-Swiss albino(小鼠胚胎成纤维细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0284 CTLA4 Ig-24(中国仓鼠卵巢细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0283 Ishikawa(人子宫内膜癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0282 HO-8910PM(人高转移卵巢癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0281 HELF(人胚肺成纤维细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0280 HEL(人红白细胞白血病细胞) 5×10cells/T25培养瓶
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HZ-0275 NCI-H1395(人肺腺癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染,很多站友,特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验,在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项:1. 细胞瓶身:如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,则污染几率非常大。2. 培养基颜色:如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常大。3. 培养基澄清度:如果培养基澄清,正常;如果有少许漂浮物,则可能是污染或者有细胞凋亡;如果培养基很浑浊,甚至出现絮状物,则污染
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