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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温或干冰运输
- 保质期:
无限
- 英文名:
COS-7(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)
- 库存:
1×10⁶cells/T25培养瓶
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
50-100万个细胞数
COS-7细胞产品概述:
| COS-7 非洲绿猴SV40转化的肾细胞
|
|
| 细胞名称 |
COS-7(非洲绿猴SV40转化的肾细胞) |
| 种属 |
非洲绿猴 |
| 年龄(性别) |
|
| 组织来源 |
肾;SV40转染 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
成纤维细胞样 |
| 背景描述 |
COS-7细胞源自CV-1细胞,经带有编码野生型T抗原的起始失活突变的SV40转染得到。COS-7细胞含有一个来自SV40基因组全部早期区域的组成型拷贝。 |
| 生长培养基 |
DMEM高糖+10% FBS+1% P/S |
| 培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
收到常温COS-7细胞后如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
COS-7细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
温馨提醒:
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。
订购COS-7细胞事先需要准备什么?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么?规格、数量是多少:
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
COS-7细胞发货形式:
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
HZ-0447 SW 1353(人软骨肉瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0446 SUP-B15(人Ph+急淋白血病细胞系) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0445 Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0444 SNU-5(人胃癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0443 SK-N-MC(人神经上皮瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0442 SK-NEP-1(人肾母细胞瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0441 SK-N-BE(2)(人神经母细胞瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0440 SK-MEL-1(人皮肤黑色素瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0439 SK-CO-1(人结直肠腺癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0438 SF767(人脑瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0437 SF763(人脑瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0436 SF17(人脑瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0435 SF126(人脑瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0434 SC-1(小鼠胚胎细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0433 RWPE-2(人前列腺正常细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0432 RTE(大鼠气管上皮细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0431 RT4(人膀胱移行细胞乳头瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0161 MRC-5(人胚肺细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0160 MOLT-4(人急性淋巴母细胞白血病细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0159 MLTC-1(小鼠睾丸间质细胞瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0158 MGC80-3(人胃癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0430 RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0157 MG-63(人骨肉瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0156 MFC(小鼠胃癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0155 ME-180(人子宫颈表皮癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0427 RL1(大鼠肺成纤维样细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0154 MDCK (NBL-2)(犬肾细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0426 RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0153 MDBK (NBL-1)(牛肾细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0425 RKO-AS45-1(人结肠癌转基因细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0424 RK1(大鼠肾细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0152 MDA-MB-453(人乳腺癌细胞) 5×10cells/T25培养瓶
HZ-0423 RIN-m5F(大鼠胰岛β细胞瘤细胞) 5×10cells/T25培养瓶
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文献和实验Note: This protocol has been optimized for Cos-1 cells. Successful transfection of each cell type requires optimization of the basic protocol. Variables to consider for optimization include, but are not limited to, cell density, transfection
相关专题 总有一种转染方法适合你 Note: This protocol has been optimized for Cos-1 Cell s. Successful transfection of each cell type requires optimization of the basic protocol. Variables to consider for optimization include
问:cos-7的转染1、细胞的培养:我们在培养细胞时发现该细胞长的很快,不到2天的时间就长满了;消化的时候老是成块的掉,如果消化时间加长,细胞也能成单个的,但是细胞的生长力又减弱了,请问要怎样来克服这一问题呢?2、转染前:转染前16-24h我们用含血清不含抗生素的MEM传进6孔盘,16h左右就发现细胞贴壁了,但是形态没有以前好,并且漂死细胞相当多。最初我们都以为是细胞没有贴壁,又把细胞放进培养箱,结果死细胞越来也多,请问是不是因为没有抗生素所以细胞才很容易死,并且形态不好的呢?3、转染:在6孔
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