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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温或干冰运输
- 保质期:
无限
- 英文名:
Caco-2(人结直肠腺癌细胞)
- 库存:
1×10⁶cells/T25培养瓶
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
50-100万个细胞数
Caco-2细胞产品概述:
| Caco-2 人结直肠腺癌细胞
|
|
| 细胞名称 |
Caco-2(人结直肠腺癌细胞) |
| 种属 |
人 |
| 年龄(性别) |
男;72岁 |
| 组织来源 |
结肠,结直肠腺癌 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
| 背景描述 |
Caco-2细胞分离自直肠原位癌;当长到满时,Caco-2细胞表现出特征性的肠上皮细胞分化。Caco-2细胞表达维甲酸结合蛋白I和维甲酸结合蛋白Ⅱ,并呈角质蛋白阳性。 |
| 生长培养基 |
MEM+20% FBS+1% P/S |
| 培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
收到常温Caco-2细胞后如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
Caco-2细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
温馨提醒:
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。
订购Caco-2细胞事先需要准备什么?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么?规格、数量是多少:
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
Caco-2细胞发货形式:
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
SW1990细胞 人胰腺癌细胞 L15+10%FBS + 1%P/S 贴壁
SW480细胞 已做STR鉴定 有突变位点
SW480细胞 人结肠腺癌细胞 L15+10%FBS + 1%P/S 贴壁
SW579细胞 人甲状腺癌细胞 L15+10%FBS + 1%P/S 贴壁
SW620细胞 人结直肠腺癌细胞 L15+10%FBS + 1%P/S 贴壁
T2 (174xcem.T2 )细胞 人淋巴母细胞 IMDM+20%FBS + 1%P/S 悬浮
T24细胞 人膀胱癌细胞 MACOY'S 5A+10%FBS + 1%P/S 贴壁
T47D细胞 人乳腺导管癌细胞 1640+0.2U/ml胰岛素+10%FBS+ 1%P/S
TC-1细胞 小鼠肺上皮细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
TPC-1细胞 人乳头瘤状甲状腺癌细胞 DMEM+10%FBS + 1%P/S 贴壁
TC-71细胞 神经外胚层肿瘤细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
TC-32细胞 人尤文氏肉瘤细胞 DMEM +10%FBS+ 1%P/S
T98G 细胞 人胶质母细胞瘤 MEM+10%FBS + 1%P/S 贴壁
Tca-8113细胞 人舌鳞癌细胞 1640+20%FBS+1%P/S 贴壁
TE-1细胞 人食管癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
TE-5细胞 人食管癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
TF-1细胞 人红白血病细胞 1640 + 10%FBS+2 ng/ml GM-CSF + 1%P/S 悬浮
THP-1细胞 人单核白血病细胞 1640+10%FBS+1%P/S+0.05 mMβ-巯基乙醇 悬浮
TU212细胞 人喉癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
TU686细胞 人喉癌细胞 1640+10%小牛血清+1%P/S 贴壁
TM3细胞 小鼠睾丸间质细胞 DMEM/F12+2.5%FBS+5%马血清 + 1%P/S 贴壁
TM4细胞 正常小鼠睾丸Sertoli细胞 DMEM/F12+2.5%FBS+5%马血清 + 1%P/S 贴壁
TT细胞 人甲状腺癌细胞 F-12K+10%FBS+1%P/S 贴壁
U14细胞 小鼠子宫颈癌细胞 DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁
U20S细胞 人成骨肉瘤细胞 MACOY'S 5A+10%FBS+1%P/S 贴壁
U251细胞 人类星形胶质细胞瘤细胞 DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁
U-118MG细胞 人脑星形胶质母细胞瘤 DMEM +10%FBS+1%P/S 贴壁
U-87 MG细胞 人脑星形胶质母细胞瘤 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
U-937 细胞 人淋巴瘤细胞 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
U-937细胞 人白血病细胞 1640+10%FBS+1%P/S 悬浮
UM-UC-3细胞 人膀胱移行细胞癌 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
UMNSAH/DF-1细胞 鸡胚胎成纤维细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁 39℃培养
VCaP细胞 人前列腺癌细胞 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
VERO 细胞 非洲绿猴肾细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
VERO E6细胞 非洲绿猴肾细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
WI-38细胞 人胚肺成纤维细胞 (有限细胞系)MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
WI-38VA13细胞 人SV-40转化肺成纤维细胞 MEM+10%FBS+ 1%P/S 贴壁
WRL68细胞 人正常肝细胞 MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
短串联重复序列(short tandem repeat,STR),又称为微卫星DNA ,重复单位为2-6bp,重复次数10~60多次,在DNA复制过程中的滑动、复制、修复过程中滑动链与互补链的碱基错配,从而导致一个或几个重复单位的缺失或插入,形成STR的多态性,主要应用于遗传连锁图谱分析、家系鉴定、身份认证等领域,同时也是鉴定细胞株被错误识别和交叉污染的主要工具。细胞株被错误识别及交叉污染的现象还是比较普遍的,虽然科研工作者使用各种各样的传统方法来鉴定细胞,但细胞交叉污染的问题却有增无减
刚刚在中国科学院昆明细胞库看到他们今年最新公布的错误鉴定和交叉污染的细胞,共 60 个细胞系,STR 检测结果和备检细胞系的名称相差甚远,大家赶紧去看看自己的细胞是否在列吧。 很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行, 这些细胞可能是从细胞库 (如美国 ATCC,American Type Culture Collection) 得来,也可能是受赠于其它研究人员,尤其在中国,目前细胞的传播太复杂,无序,很多都不是通过正规途径获得,如友情赠送等。 据统计,约有 30% 细胞系被交叉
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