A-549细胞【通过STR鉴定】

A-549细胞产品概述：

A549 人非小细胞肺癌细胞
细胞名称	A549（人非小细胞肺癌细胞）
种属	人
年龄（性别）	男；58岁
组织来源	肺癌
生长特性	贴壁
细胞形态	上皮细胞样
背景描述	A549细胞是由D·J·Griad通过肺癌组织移植培养建系，源自于一位58岁白人男性；A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
生长培养基	Ham's F-12K＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

收到常温A-549细胞后如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
A-549细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。
2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
温馨提醒：
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。
订购A-549细胞事先需要准备什么？
客户应具有一定细胞培养知识与经验，并具备基本实验设备，如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱，倒置显微镜等；还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么？规格、数量是多少：
细胞发货时，保证细胞处于生长对数期；贴壁细胞达到75%以上汇合度，约5×10^5cells/T25细胞培养瓶；传代次数5代以内；冻存细胞发2个冻存管；无微生物污染。
A-549细胞发货形式：
细胞通常用T25细胞培养瓶培养，发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶，密封瓶口后放在包装盒内，以快递的方式发送给客户。天气变冷，最低温低于4℃时，以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
RCHACV细胞    RCHACV            无        
BJAB【人B细胞淋巴瘤细胞】     BJAB     人B细胞淋巴瘤细胞    人    1640    悬浮    
GES-1【人胃粘膜细胞】    GES-1    人胃粘膜细胞    人    1640    贴壁    
Toledo【人B淋巴细胞株瘤细胞】     Toledo     人B淋巴细胞株瘤细胞    人    IMDM    悬浮    
9L【小鼠胶质瘤】     9L     小鼠胶质瘤    小鼠    DMEM    贴壁    
MLE-12【小鼠肺上皮细胞】     MLE-12     小鼠肺上皮细胞    小鼠    DMEM    贴壁    
KBM5【人慢性髓白血病细胞细胞】     KBM5     人慢性髓白血病细胞细胞    人    IMDM    悬浮    
VSC4.1【脊髓前角运动神经元瘤细胞系】     VSC4.1     脊髓前角运动神经元瘤细胞系    人    EMEM    贴壁    
HIC【人小肠癌细胞系】     HIC     人小肠癌细胞系    人    1640    贴壁    
LN-18【人神经胶质瘤细胞】     LN-18     人神经胶质瘤细胞    人    DMEM    贴壁    
Kupffer【肝枯否细胞】     Kupffer     肝枯否细胞        1640或DMDM    贴壁    
SNU475【人肝癌细胞】     SNU475     人肝癌细胞    人    1640    贴壁    
T98G【人脑胶质细胞瘤细胞】     T98G     人脑胶质细胞瘤细胞    人    DMEM    贴壁    
HMEC-1【人微血管内皮细胞株】     HMEC-1     人微血管内皮细胞株    人    1640    贴壁    
NCTC1469【小鼠正常肝细胞】     NCTC1469     小鼠正常肝细胞    小鼠    DMEM    贴壁    
HIEC【正常人肠上皮细胞】     HIEC     正常人肠上皮细胞    人    1640    贴壁    
HPDE6-C7【人正常胰腺导管上皮细胞】     HPDE6-C7     人正常胰腺导管上皮细胞    人    DMEM    贴壁    
RGC-5【小鼠视网膜神经节细胞】     RGC-5     小鼠视网膜神经节细胞    小鼠    DMEM    贴壁    
hRMECs【人视网膜微血管内皮细胞】     hRMECs     人视网膜微血管内皮细胞    人    DMEM    贴壁    
MN9D【小鼠中脑多巴胺能神经元细胞】     MN9D     小鼠中脑多巴胺能神经元细胞    小鼠    EMEM    贴壁    
HCS-2/8【人软骨肉瘤细胞】     HCS-2/8     人软骨肉瘤细胞    人    McCoy’s 5a    贴壁    
RTE【大鼠气管上皮细胞】     RTE     大鼠气管上皮细胞    大鼠    DMEM    贴壁    
NCI-H1993【人肺腺癌细胞】     NCI-H1993     人肺腺癌细胞    人    1640    贴壁    
MONOMAC6【急性单核细胞白血病细胞】     MONOMAC6     急性单核细胞白血病细胞    人    1640    悬浮    
SU-DHL-10【人类B细胞淋巴瘤细胞】     SU-DHL-10     人类B细胞淋巴瘤细胞    人    1640    悬浮    
184A1【人乳腺上皮细胞】     184A1     人乳腺上皮细胞    人    1640    贴壁    
CCD 841 CoN【人正常结肠上皮细胞】    CCD 841 CoN    人正常结肠上皮细胞    人    DMEM    贴壁    
HGMC【人肾小球系膜细胞】     HGMC     人肾小球系膜细胞    人    DMEM    贴壁