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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温或干冰运输
- 保质期:
无限
- 英文名:
A-431(人表皮癌细胞)
- 库存:
1×10⁶cells/T25培养瓶
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
50-100万个细胞数
A-431细胞产品概述:
| A-431 人表皮癌细胞
|
|
| 细胞名称 |
A-431(人表皮癌细胞) |
| 种属 |
人 |
| 年龄(性别) |
女;85岁 |
| 组织来源 |
皮肤;上皮;皮肤癌 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
| 背景描述 |
皮肤癌细胞株A-431源自一位85岁女性,是由D·J·Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A-431细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤快速增长的皮下肿瘤,在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。A-431细胞是一个超三倍体人细胞株。 |
| 生长培养基 |
DMEM高糖+10% FBS+1% P/S |
| 培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
收到常温A-431细胞后如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
A-431细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。
2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
温馨提醒:
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。
订购A-431细胞事先需要准备什么?
客户应具有一定细胞培养知识与经验,并具备基本实验设备,如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱,倒置显微镜等;还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么?规格、数量是多少:
细胞发货时,保证细胞处于生长对数期;贴壁细胞达到75%以上汇合度,约5×10^5cells/T25细胞培养瓶;传代次数5代以内;冻存细胞发2个冻存管;无微生物污染。
A-431细胞发货形式:
细胞通常用T25细胞培养瓶培养,发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶,密封瓶口后放在包装盒内,以快递的方式发送给客户。天气变冷,最低温低于4℃时,以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
DT40【鸡淋巴瘤细胞】 DT40 鸡淋巴瘤细胞 鸡 1640 悬浮
LMH/2A细胞 LMH/2A 无
SL-29细胞 SL-29 无
RBE4【大鼠脑血管内皮细胞 】 RBE4 大鼠脑血管内皮细胞 大鼠 1640 贴壁
SCC-090【人口腔鳞癌细胞】 SCC-090 人口腔鳞癌细胞 人 McCoy’s 5a 贴壁
SCC-9【人舌鳞癌细胞】 SCC-9 人舌鳞癌细胞 人 EMEM 贴壁
SCC-4【人舌鳞癌细胞】 SCC-4 人舌鳞癌细胞 人 EMEM 贴壁
SCC-25【人舌鳞癌细胞】 SCC-25 人舌鳞癌细胞 人 EMEM 贴壁
THLE-2【SV40转化人肝上皮细胞】 THLE-2 SV40转化人肝上皮细胞 人 1640 贴壁
THLE-3【SV40转化人肝上皮细胞】 THLE-3 SV40转化人肝上皮细胞 人 1640 贴壁
CAL-51【人乳腺癌细胞】 CAL-51 人乳腺癌细胞 人 DMEM 贴壁
CAL-148【人乳腺癌细胞】 CAL-148 人乳腺癌细胞 人 EMEM 贴壁
KOB细胞 KOB 无
ZYM-DIEC02【猪小肠上皮细胞】 ZYM-DIEC02 猪小肠上皮细胞 猪 1640 贴壁
G422【小鼠脑神经胶质母细胞】 G422 小鼠脑神经胶质母细胞 小鼠 DMEM 贴壁
BMSC【人骨髓间充质干细胞】 BMSC 人骨髓间充质干细胞 人 DMEM 贴壁
VCaP【人前列腺癌细胞】 VCaP 人前列腺癌细胞 人 1640 贴壁
VX2【兔间变表皮鳞癌瘤株】 VX2 兔间变表皮鳞癌瘤株 兔 EMEM 贴壁
CF-1【小鼠胚胎成纤维细胞】 CF-1 小鼠胚胎成纤维细胞 小鼠 DMEM 贴壁
AR42J【大鼠胰腺外分泌细胞】 AR42J 大鼠胰腺外分泌细胞 大鼠 DMEM 贴壁
LNCaP clone FGC【人前列腺细胞】 LNCaP clone FGC 人前列腺细胞 人 IMDM 贴壁
RGM-1【正常胃粘膜上皮细胞】 RGM-1 正常胃粘膜上皮细胞 人 F12 贴壁
KMS11【人多发性骨髓瘤细胞】 KMS11 人多发性骨髓瘤细胞 人 IMDM 悬浮
KMS26【人多发性骨髓瘤细胞】 KMS26 人多发性骨髓瘤细胞 人 IMDM 悬浮
KMS34细胞 KMS34 无
KMS28BM细胞 KMS28BM 无
SKM-1【人骨髓增生异常综合征细胞】 SKM-1 人骨髓增生异常综合征细胞 人 IMDM 悬浮
TALL-1细胞 TALL-1 无
JMSU1细胞 JMSU1 无
HPBALL【T细胞白血病细胞】 HPBALL T细胞白血病细胞 人 1640 悬浮
MUTZ-1细胞 MUTZ-1 无
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染,很多站友,特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验,在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项:1. 细胞瓶身:如果瓶身上没有裂缝,正常;如果瓶身上有裂缝,则污染几率非常大。2. 培养基颜色:如果培养基颜色是红色或者粉色,正常;如果是橙色,则可能是污染或者细胞过密;如果是黄色,则污染几率非常大。3. 培养基澄清度:如果培养基澄清,正常;如果有少许漂浮物,则可能是污染或者有细胞凋亡;如果培养基很浑浊,甚至出现絮状物,则污染
手把手教你单细胞测序分析时如何运用多种数据库和参考文献定义每种类型的细胞群。
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