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上海一基
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文献和实验3,3, ―二氨基联苯胺-4-盐酸盐 5mg 0.2mol/L磷酸缓冲液(pH 7.4) 5ml 过氧化氢酶C―100 lmg 细胞色素CⅢ型 10mg (2)操作程序 ①新鲜或固定组织冰冻切片,厚5~10um; ②孵育液中37℃孵育40~60分钟,充分洗涤; ③复染:亚甲蓝染核; ④甘油明胶封片。 (3)结果 酶活性部位呈棕褐色沉淀,细胞内线粒体数目多者酶活性强
测定。总之,测定酶活性的方法很多,应根据具体情况选择合适的方法。 三、材料、仪器与试剂 要求用硫酸铵分级沉淀部分纯化过氧化物酶。 (一)、材料:花椰菜根 (二)、仪器(仪器的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定) 冰冻离心机;751型分光光度计;电磁搅拌器;组织捣碎机;天平;量筒;移液管;烧杯;透析袋。 (三)、试剂(试剂的选择在实验开始前由学生在预习报告中提出方案后教师审定后并配制) PVPP;硫酸铵;0.02mol/L KH2PO4溶液;0.lmol/L 磷酸钾缓冲液,PH
线粒体和凋亡 Mitchell于1967年提出了线粒体在氧化磷酸化过程中的作用,据此在1978年获得诺贝尔化学奖。此后线粒体的功能被定性为细胞的“动力工厂”,通过氧化磷酸化为细胞提供能量,因此不再受到重视。直到后来发现凋亡相关基因Bcl-2家族位于线粒体表面后,线粒体在凋亡中的作用又引起了广泛的关注,并且很快发现线粒体与凋亡的关系极其密切。凋亡诱导基因Bcl―2家族的不同家族成员与线粒体表面膜通道蛋白VDAC相结合而调控通道的开放和关闭,对线粒体通透
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