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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冰袋运输。-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
Luciferase Reporter Gene Assay Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
μg/盒
萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒产品特点
1) 简便,快捷。
2) 灵敏度高,可检测10-20 mol的荧光素酶。
3) 安全,非放射性。
4) 酶的浓度线性范围可达8个数量级。
萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒运输与保存方法
冰袋运输。
未拆封试剂盒-20℃避光保存,有效期为 6 个月。-70℃避光保存,有效期为一年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)避光保存,不能反复冻融。
实验步骤
1. 细胞裂解:
1) 将转入报告基因的细胞中的培养基移除,加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液(Cell lysis buffer),然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min,充分裂解细胞。
【注】:裂解产物可室温保存6h,4℃保存16h,-70℃可长期存放。(裂解产物不能多次反复冻融)。
2. 荧光素酶检测:
1) 按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开,设定参数,测定时间为10s,测定间隔为2s。
2) 将样品按照20~100µl的体积(如果样品量足够,请加入100µl)加入测量管中(保持每次样品的加样量一致),另外加入萤火虫荧光素酶检测试剂(Firefly luciferase assay reagent)混匀 2-3 次(不能漩涡混匀),充分混匀后测定RLU(Relative light unit),同时设置细胞裂解液(Cell lysis buffer)为对照孔。
萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒注意事项
1) 温度会对酶的活性会产生影响,因此所有试剂应放置室温后再使用。
2) 如用单管荧光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
3) 萤火虫荧光素酶催化的生物发光的最强发光波长为 560nm。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验好像现在比较常用的是双报告基因检测吧,可以解决你说的问题 huxueliang 利用双荧光素酶报告基因系统 同时转入内参质粒 天飒 huxueliang 麻烦你讲讲利用双荧光素酶报告基因系统 ,同时转入内参质粒吧,我是一名新手这方面知道的少,谢谢啦! 叮当儿 promega公司的双荧光素酶标记系统,好多人都在用,同时转入要检测的报道基因及Renillia,操作的话说明
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞? 若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢 longgyin8341
【求助】关于构建目的基因启动子序列的虫荧光素酶报告基因重组质粒的问题请教
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