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文献和实验形DNA结构、Holliday结构等,故易出现假阳性;测序耗时长(1-3天),常常出现测序无信号等问题。 今年年初,Genloci通过植物基因工程表达产生高纯度的Cruiser™酶,它是一种具天然强活性的核酸内切酶,与CelⅠ同源。该酶能够高效特异地识别异源双链DNA的突变位点,并从突变位点的3’-端高效地切割异源双链DNA,不会出现假阳性。 今年6月,Genloci推出Cruiser™基因敲除检测试剂盒,该试剂盒可广泛应用于精确检测人、哺乳动物、细菌、真菌、病毒以及植物基因的敲除,尤其适用于ZFN
.但他们能以RNA为模板,合成DNA. 如Tth DNA Polymerase c. 有DNA聚合活性,没有逆转录活性,但有3-5方向的外切酶活性.如pfu DNA Polymerase.可以提高忠实性。但是这些聚合酶的产量比Taq DNA聚合酶低。 酶的混合物 将Taq DNA聚合酶同带有3'到5'外切 核酸酶 活性第二种 聚合酶 混合在一起可以获得比单独Taq DNA 聚合酶 高的忠实性,并可以得到高
(RNA interference ,RNA i) 通路中,长片断的双链RNA 进入细胞后会被一个类似RNase III 的内切核糖核酸酶(Dicer) 降解为一系列的21―23bp 长度,3’端有两个碱基突出(带羟基)5’磷酸化的siRNA s 。这些siRNA s 介导同源转录本的降解,从而导致基因表达沉默。( 1-5)大肠杆菌Escherichia coli RNase III 参与多种细菌RNA s,噬菌体甚至是质粒来源的RNA s 降解(6-9) ,能够将长片断的双链RNA s降解为一系
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