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Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg直销

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  • 2025年07月08日
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      Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg直销

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      上海一研

    Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg直销注意事项:
    1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
    2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
    3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
    Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg直销详细介绍:
    产品细节图片1
    Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg直销技术优势
    1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
    2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
    3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
    4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
    5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
    Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg直销操作步骤:
    1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
    b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
    c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
    2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
    3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
    5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
    6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
    7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
    8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
    9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
    10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
    Cyclosporin D (5 mg)    7-L-valine-cyclosporin A
    Mdivi 1 (5 mg)    Mitochondrial Division Inhibitor 1; 3-(2,4-dichloro-5-methoxyphenyl)-2,3-dihydro-2-thioxo-4(1H)-quinazolinone
    PS-48 (10 mg)    5-(4-chlorophenyl)-3-phenyl-2Z-pentenoic acid
    Dehydroepiandrostero    DHA-S|DHEAS|NSC 72822; 3β-(sulfooxy)-androst-5-en-17-one, monosodium salt
    (R)-Prunasin (1 mg)    (αR)-
    Enalapril (10 g)    N-[(1S)-1-(ethoxycarbonyl)-3-phenylpropyl]-L-alanyl-L-proline
    DL-Sulforaphane N-acetyl-L-cysteine (1 mg)    SFN-NAC; N-acetyl-S-[[[4-(methylsulfinyl)butyl]amino]thioxomethyl]-L-cysteine
    O-Phospho-L-Serine (5 g)    Dexfosfoserine|L-SOP|L-Serine-O-Phosphate; O-
    Calcein (5 g)    Fluorescein Complexone|NSC 298193; N,N’-[(3’,6’-dihydroxy-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9’-[9H]xanthene]-2’,7’-diyl)bis(methylene)]bis[N-(carboxymethyl)-glycine
    RKI-7 (10 mg)    N-[(3-hydroxyphenyl)methyl]-N’-[4-(4-pyridinyl)-2-thiazolyl]-urea
    4-Thiouridine (250 mg)    4-SU|NSC 518132; 4-
    AB-CHMINACA metabolite M6 (500 ug)    4-amino-3-(1-(cyclohexylmethyl)-1H-indazole-3-carboxamido)-2-methyl-4-oxobutanoic acid
    Dilaurin    Didodecanoic acid|Glyceryl Dilaurate; diester with 1,2,3-propanetriol dodecanoic acid
    Celiprolol (hydrochloride    Corliprol|NSC 324509; N’-
    Guanylyl Imidodiphosphate (5 mg)    monoanhydride with imidodiphosphoric acid, 5’-guanylic acid, trisodium salt
    U-74389G (250 mg)    Methylated Tirilazad; 21-[4-(2,6-di-1-pyrrolidinyl-4-pyrimidinyl)-1-perazinyl]-pregna-1,4,9(11)-triene-3,20-dione maleate salt
    3-Chloroamphetamine (hydrochloride) (5 mg)    3-CA|m-CA; 3-chloro-α-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride人垂体腺苷环化酶激活肽(PACAP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
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    Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg直销公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
    1、RNA纯化系列产品
    2、DNA纯化系列产品
    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等

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    相关实验
    • Synthesis of Radiolabeled, Subtracted cDNA Probes Using Oligo(dT) as a Primer

      2. To the chilled microfuge tube, add: 0.1 M dithiothreitol 2.5 μl placental RNase inhibitor 200 units oligo(dT)12-18 10 μl 10x reverse transcriptase buffer 25 μl 20 mM solution of dGTP, dATP, and dTTP 10 μl 125 μM dCTP 10 μl 10 mCi/ml

    • 四 逆转录PCR (RT-PCR)

      ,cDNA的数量和复杂度要少得多。因为其较高的特异性,oligo(dT)一般不需要对RNA和引物的比例及poly(A)+选择进行优化。建议每20μl反应体系使用0.5μg oligo(dT)。oligo(dT)12-18适用于多数RT-PCR。 基因特异性引物(GSP)对于逆转录步骤是特异性最好的引物。GSP是反义寡聚核苷,可以特异性地同RNA目的序列杂交,而不象随机引物oligo(dT)那样同所有RNA退火。用于设计PCR引物的规则同样适用于逆转录反应GSP的设计。GSP

    • MACS(磁珠分选)技术相关产品 (dynal公司)

      体系,可直接应用于所有的分子生物学下游研究,包括酶学研究、cDNA文库的构建、RT-PCR、S1核酸酶分析、核糖核酸酶保护、引物扩增、点杂交和斑点杂交、体外转录实验、差异显示和Northern杂交,亦可用于基因克隆及基因表达分析。 本试剂盒的Dynabeads Oligo(dT)25悬浮在pH7.4含有0.02%的叠氮钠作为保护剂的磷酸缓冲液中,浓度为3.3×108个磁珠 (约5mg/ml)。根据组织或细胞类型和mRNA表达水平情况,每200μl(约1mg)的Dynabeads Oligo(dT)25

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