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- 详细信息
- 文献和实验
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- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL说明书
- 库存:
24
- 供应商:
上海一研
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL说明书详细介绍:
即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
-荧光素钾盐 超级纯 D-Luciferin, potassium salt UltraPure Grade
钙离子荧光探针Fluo-3, AM 超级纯 Fluo-3, AM UltraPure grade
TMRE[四基罗丹明乙酯] TMRM [Tetramethylrhodamine methyl ester]
RPE-标记链霉亲和素偶联物 1 mg/ml RPE-streptavidin conjugate 1 mg/ml
最佳钙离子指示探针Cal-520FF, AM Cal-520FF, AM
Tide Quencher 2WS 马来酰亚胺 [TQ2WS 马来酰亚胺] Tide Quencher 2WS maleimide [TQ2WS maleimide]
15-hydroxy Prostaglandin Dehydrogenase Blocking Peptide (200 ug) 15-hydroxy PGDH; 15-hydroxy Prostaglandin Dehydrogenase Blocking Peptide
Prostaglandin D2 (10 mg) 9α,15S-dihydroxy-11-oxo-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; PGD2; Prostaglandin D2
13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin D2 (50 mg) 9。alpha。-hydroxy-11,15-dioxo-prost-5Z-en-1-oic acid; 13,14-dihydro-15-keto PGD2; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin D2
Naphthofluorescein (5 mg) 3,11-dihydroxy-spiro[7H-dibenzo[c,h]xanthene-7,1’(3’H)-isobenzofuran]-3’-one; CCG 8295; Naphthofluorescein
trans-Resveratrol-d4 (500 ug) 5-[(1E)-2-(4-hydroxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol-2,3,5,6-d4; (E)-Resveratrol-d4; trans-Resveratrol-d4
Daidzin (10 mg) 7-(β-D-glucopyranosyloxy)-3-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; Daidzoside| NPI 031D; Daidzin
Farnesyl Alcohol Azide (500 ug) 12-azido-3,7,11-trimethyldodeca-2E,6E,10E,-trien-1-ol; Click Tag
PPM-18 (1 mg) N-(1,4-dihydro-1,4-dioxo-2-naphthalenyl)-benzamide; NSC 73233; PPM-18
N-methyl Leukotriene C4 (50 ug) N-methyl-5S-hydroxy-6R-(S-glutathionyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; N-methyl LTC4; N-methyl Leukotriene C4
AL 6598 (1 mg) 2-[[(2Z)-4-[(1R,2R,3R,5R)-5-chloro-2-[(3R)-3-cyclohexyl-3-hydroxypropyl]-3-hydroxycyclopentyl]-2-buten-1-yl]oxy]-1-methylethyl ester, acetic acid; AL 6598
Nitazoxanide (250 mg) 2-(acetyloxy)-N-(5-nitro-2-thiazolyl)-benzamide; NSC 697855|NTZ; Nitazoxanide
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E1 (500 ug) 9-oxo-11。alpha。,15R,19R-trihydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGE1; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E1
11β-Prostaglandin E2 (5 mg) 9-oxo-11。beta。,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 11β-PGE2|11-epi PGE2; 11β-Prostaglandin E2
15-keto Prostaglandin F1α (1 mg) 9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-13E-en-1-oic acid; 15-keto PGF1α; 15-keto Prostaglandin F1α人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装人肺癌细胞;A-427 [A427]
人抗脑组织抗体(ABAb)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装CD7 Others Mouse 小鼠 CD7 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人抗内抗体(IFA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装SV40T转化的人胚肾细胞;293T
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人抗麦胶/麦醇溶抗体(AGA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装HAL-01 人急性混合型白血病细胞
人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装HCT-8 [HRT-18]人回盲肠癌细胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
人抗流行性出血热病毒抗体IgM (EHF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装TNFSF11 Protein Mouse 重组小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签)
人抗流行性出血热病毒抗体IgG (EHF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装人肺间充质干细胞(肺)(HPMSC)(5×105) U251人胶质瘤细胞 Human
人抗流行性出血热(EHFAb)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装TNFRSF8 Others Human 人 CD30 / TNFRSF8 人细胞裂解液 (阳性即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL说明书对照) (变性)
人抗磷脂酰丝氨抗体(APSA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装肺大动脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
人抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装CDC37 Others Human 人 CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人抗磷壁抗体(TA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装HEC-1-B细胞,子宫内膜腺癌细胞 人鼻咽癌细胞(高分化),CNE1细胞 CL-0257BC-009(人乳腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
人抗淋巴细胞球(ALG)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS3
人抗淋巴细胞毒抗体(ALA/LCA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17
人抗链球溶血素O/抗O(ASO)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装神经小胶质细胞 1×106 5×106
人抗利尿/血管加压素/精氨加压素(ADH/VP/AVP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装雪旺氏细胞 1×106 5×106
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文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增(左图)与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增(右图)。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液,您只需添加模板和引物,然后,开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤,使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样(注意:确保染料与下游应用兼容)。直接
buffer,摸索镁离子浓度或适当加入 DMSO(小于 0.3%) · 提高退火温度,增加延伸时间(反应条件参照试剂盒说明书) 问题 2:假阳性 现象:空白对照出现条带 可能原因: · 引物设计不适,与目的序列具有同源性 · 试剂污染:水、移液枪等被核酸污染 · 样品间出现交叉污染 解决方法: · 实验仪器高压灭菌 · 实验试剂(酶除外)高压灭菌,离心管枪头一次性使用 · 规范实验操作 · 假阳性可通过巢式 PCR 解决,或者使用特异性较高的试剂盒扩增 问题 3:拖尾、弥散 现象:电泳出现拖尾、涂抹
要乙醇沉淀等步骤。3. 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。4. 独有的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。5. 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。♦ 注意事项1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。2. 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器(可选),研钵
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