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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次说明书
- 库存:
33
- 供应商:
上海一研
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次说明书实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次说明书实验步骤:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次说明书特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次说明书客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
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基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
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杨酸甲酯 含量测定 进口/国产 常温,避光 规格: 1ml
桂皮醛 含量测定 进口/国产 -20℃,避光 规格: 0.5ml IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干扰素α11抗体 0.2ml Nesfatin-1/Nucb2 新的饱食分子蛋白抗体 0.2ml
Laminin Beta 2/Laminin S 层粘连蛋白β2抗体 0.2ml NOXA2/p67phox NADPH氧化酶活化蛋白1抗体 0.1ml
TIAF1 TGFB1诱导抗凋亡因子1抗体 0.2ml RBBP5 视网膜母细胞瘤结合蛋白5抗体 0.2ml
PRKAA2/AMPK alpha 2 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 0.1ml PAK4 小鼠抗p21激活激酶4抗体 0.2ml
KLHDC5 kelch样蛋白5抗体 0.2ml VP2 重组猪细小病毒VP2蛋白抗体 0.2ml
DUSP26/MKP8 双特异性蛋白磷酸酶26抗体(丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶8) 0.2ml PLK1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Plk1抗体 0.1ml
COMMD1/MURR1 铜代谢结构域蛋白1抗体 0.2ml PSMD9 蛋白酶调解因子9抗体 0.2ml
CCDC54/NYD-SP17 卷曲螺旋结构域蛋白54抗体 0.2ml RIP2 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2抗体 0.2ml
FRMD4A FRMD4A蛋白抗体 0.2ml Shh Shh信号转导通路膜蛋白受体抗体 0.1ml
96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1次说明书CPXM2 羧肽酶X(M14家族2)抗体 0.2ml SPAG5/MAP126/Astrin 相关抗原5抗体 0.1ml
phospho-ATF2 (Thr53) 磷酸化活化复制因子2抗体 0.1ml Phospho-TAK1(Ser192) 磷酸化转化生长因子β活化激酶1 0.1ml
TFE3 转录因子E3 0.1ml Thrombomodulin/CD141 血栓调节蛋白抗体 0.1ml
PAS1C1 核纤层蛋白A相关结构蛋白1抗体 0.2ml Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) 磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 0.1ml
TTC33 TTC33蛋白抗体 0.2ml Wnt3a 信号通路Wnt3a抗体 0.1ml
RNF150 环指蛋白150抗体 0.2ml Donkey anti-Goat IgG whole serum 驴抗羊IgG抗血清 1ml
CNOT4 细胞表面趋化因子受体4相关蛋白4抗体 0.2ml Goat Anti-Bovine IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗牛IgG 0.1ml
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文献和实验采用Ostro 96孔样品制备板轻松提高DBS萃取物的洁净程度
%以上的PLs残留。Ostro 96孔板可通过使用96孔制备板的形式进一步简化DBS萃取流程,同时提取分析物、去除磷脂、过滤干血斑纸片。DBS样品可在孔内萃取并稀释直接进样到LC/MS/MS系统中。该创新方法能够显著降低样品制备时间,并在萃取转化、干燥、复溶过程中避免潜在的分析物流失。在本应用纪要中,我们同时应用了传统方法和Ostro 96孔样品制备板方法,对含有利培酮、利培酮羟基化代谢物、9-OH利培酮及其内标氯氮平(图1)的全血样品进行了萃取。 实验部分
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