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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
RNase-free乙酸钠,3M,pH5.2100mL售后服务
- 库存:
50
- 供应商:
上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
RNase-free乙酸钠,3M,pH5.2100mL售后服务详细介绍:
RNase-free乙酸钠,3M,pH5.2100mL售后服务技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
RNase-free乙酸钠,3M,pH5.2100mL售后服务操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
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标准品 英文名称 Prazepam CIV 规格: 500mg CAS: 2955-38-6 进口、国产EGF 表皮生长因子抗体 0.1ml GOT2 谷草转氨酶2抗体 0.1ml
nonstructural protein 1/NS1 A型流感病毒-NS1抗体(神经氨酸酶1) 0.2ml HA tag(12CA5) HA tag标签单克隆抗体 0.1ml
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RASGEF1A 鸟嘌呤核苷酸交换因子rasgef1a抗体 0.2ml HSP90 β 热休克蛋白90β 抗体 0.2ml
ENO1+ENO2+ENO3 神经元,肌肉特异性烯醇化酶抗体 0.2ml IL-17B 白介素-17B抗体 0.1ml
Ferritin Light Chain 铁蛋白轻链抗体 0.1ml IRF4 干扰素调节因子4抗体 0.2ml
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AXL/UFO 粘附相关激酶抗体 0.1ml GH/Growth Hormone 生长激素抗体 0.1ml
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ZFAND5 AN1型锌指蛋白5抗体 0.2ml Oct-4B(OCT4B-190)NT 胚胎干细胞关键蛋白190抗体(N端) 0.2ml
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RNase-free乙酸钠,3M,pH5.2100mL售后服务公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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文献和实验Materials2 ml size Sarstedt screw cap tubesBIO-RAD Disposable Chromatography Column (BIO-RAD cat. #732-6008)Oligo dT celluloseRNase-free water5.0 M NaCl0.5 M EDTA1.0 M Tris, pH 7.410% SDS70% EtOHBefore starting protocol1. Measure out 75 mg of oligo
A quick RNA mini-prep for Neurospora mycelial cultures
with phenol/chloroform/isoamyl alcohol (25:24:1), spinning 12000g 10 min at 4°C in a fixed angle rotor. Save aqueous (upper) phase; add gd H2 O if volume is less than 2 ml. 12. Add 0.1 vol 3M NaOAc pH 6.0, mix and add 2.5 vol EtOH, mix. Place at -20°C
:1 of phenol:chloroform:isoamyl alcohol SEVAG 24:1 chloroform:isoamyl alcohol 3M NaOAc pH 5.2 (DEPC treat) RNase-free 95% EtOH (-20 deg C) RNase-free 70% EtOH 1. Grow cells to no later than late log phase (1E7 cells) in 20 ml of media (protocol
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









