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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50-100万个细胞
- 供应商:
KALANG
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
人
- 物种来源:
人
- 细胞形态:
上皮细胞样,贴壁生长
- 器官来源:
人皮肤
- 运输方式:
常温或干冰运输
- 年限:
无限
- 生长状态:
上皮细胞样,贴壁生长
- 规格:
50-100万个细胞
1) 来源:人皮肤
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
| 中文名称 | 人皮肤成纤维细胞 |
| 英文名称 | Human Skin Fibroblasts |
| 规格 | 1*10 6/ T25瓶 |
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
细胞用途:仅供科研使用。
BJ Cells接受后的处理
1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的完全培养基。
4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
BJ Cells培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备MCCOY'S 5A培养基;北美胎牛血清,10%;双抗1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验Generation of Recombinant Adenovirus Using the Escherichia coli BJ5183 Recombination System
, and the desired changes are introduced by molecular biology techniques. The modified viral DNA fragment is gel-purified and cotransformed with the full-length plasmid, linearized in the targeted region, into BJ5183 cells. Homologous recombination in E. coli
1、准备工作1.1 将水浴箱内部清洁干净后放入无盐水至标示刻度。1.2 将盛有所需溶液的1000ml烧杯放入水浴箱中。1.3 将吊篮悬挂于金属支架上,调节水位高度,使吊篮上升时筛网在水面下25mm处,下降时距底25mm,然后取下吊篮备用。2、正常工作2.1 插上电源,然后按电源开关接通电源,电源指示灯亮,仪器启动。2.2 时间预置仪器开机后,系统处于初始状态,自动定时系统自动预置为15秒,时间数码管显示窗显示时间数值为015。如果需要改变预置时间数值,则可以按一下时间键,预置时间数值变为20
of neurological diseases. Neuronal replacement and partial reconstruction of dysfunctional circuitry have been demonstrated via transplantation of fetal tissue into the CNS of developing and adult animals (Dunnett and Bj�rklund, 1994 ). However, the discovery
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