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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 供应商:
上海谷研
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- ATCC Number:
详见说明书
- 品系:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
株
细胞名称 小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂霉素C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时,MEF不要超过6代。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%CS
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 P1
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
使用方法
售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法分裂图展示图:
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2 培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中
静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下
观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全
培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
NutrientBroth
改良月桂基盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm) Modified lauryl sulfate tryptose vancomycin medium 用于阪崎杆菌选择性增菌培养(GB2008标准)
抗生素2号培养基(PH7.8-8.0) Antibiotic Agar NO.2 250克 克林霉素、林可霉素等的效价测定
噻孢霉素Ag/支*5添加于HB0incubationmedia噻孢霉素Ag/支*5添加于HB0121中
Baird-Parker琼脂基础 250g 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养(GB、SN标准)
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Lysine iron agar赖氨酸铁琼脂 1.11640.0500 MERCK默克 incubation media Lysine iron agar赖氨酸铁琼脂 1.11640.0500 MERCK默克
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改良Letheen肉汤 化妆品微生物评价时使防腐剂失活 500g incubation media 改良Letheen肉汤 化妆品微生物评价时使防腐剂失活 500g
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FBitive(A、B)
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CNTNAP2 Others Mouse 小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 人细胞裂解液 (阳性对照)
SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人细胞裂解液 (阳性对照)
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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM0501
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HRCEpC-c 人肾皮质上皮细胞(HRCEpC) 500,000cells 人星形胶质细胞HA
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文献和实验基成分:89% DMEM (Gibco # 12100-046)10% FBS (Gibco # 16000-044)1% NEAA (Gibco # 11140-050)MEF每传一代就会生长得更慢些。你第一次传代的比例可以是1:5,但是最后一次的传代(第4代或第5代)比例应该是1:2。小鼠胚胎成纤维细胞的冻存 重悬培养基: 80% DMEM 20% FBS 1% NEAA 冻存培养基: 60% DMEM 30% FBS 20% DMSO 1、用不含钙镁离子的PBS洗一次细胞
注意观察你的培养瓶。 注释: 我们已用CF-1品系的鼠制备了成纤维细胞。 培养基成分: 88% DMEM 10% FBS 1% NEAA 1% 双抗 对于新建立的细胞系,要对样本进行支原体检测。 小鼠胚胎成纤维细胞的消化/传代 1、移去MEF培养基 2、用5ml不含钙镁离子的PBS洗涤细胞(以去除胰蛋白酶的抑制物)。 3、每个培养瓶里加入1.5ml
,这发生在准备胚胎的第二天。这可能或早或晚发生,所以请注意观察你的培养瓶。 注释: 我们已用CF-1品系的鼠制备了成纤维细胞。 培养基成分: 88% DMEM 10% FBS 1% NEAA 1% 双抗 对于新建立的细胞系,要对样本进行支原体检测。 小鼠胚胎成纤维细胞的消化/传代 1、移去MEF培养基 2、用5ml不含钙镁离子的PBS洗涤细胞(以去除胰蛋白酶的抑制
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