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小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法

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  • 上海谷研
  • GOY-ATCC-0619
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  • 2025年10月30日
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    • 供应商

      上海谷研

    • 肿瘤类型

      详见说明书

    • 细胞类型

      A类

    • ATCC Number

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    • 细胞形态

      成纤维细胞样

    • 是否是肿瘤细胞

    • 器官来源

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    • 运输方式

      电询

    • 年限

      详见说明书

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 规格

    公司是最专业的ATCC细胞供应商,提供小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法的报价,咨询,称技术服务,欢迎来电咨询选购。
    细胞名称     小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法
    形态特性    成纤维细胞样
    生长特性   贴壁生长
    特征特性    取孕9天的615小鼠胚胎,去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞,支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时,MEF需经丝裂霉素C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时,MEF不要超过6代。 
    培养条件     DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%CS
    传代方法    1:3传代;3~4天1次。 
    传代情况    P1
    冻存条件     基础培养基+5%DMSO+20%FBS
    支原体检测   培养法(-)
    STR     -
    同工酶
    染色体
    使用权限 A类
    使用方法
    售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。
    小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法分裂图展示图:​
    产品细节图片1
    小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出25cm2 培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中
    静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
    2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
    3. 细胞传代
    1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下
    观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
    3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全
    培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
    4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
    小鼠胚胎成纤维细胞;MEF实验方法操作步骤:
    1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
    2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
    NutrientBroth
    改良月桂基盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm) Modified lauryl sulfate tryptose vancomycin medium 用于阪崎杆菌选择性增菌培养(GB2008标准)
    抗生素2号培养基(PH7.8-8.0) Antibiotic Agar NO.2 250克 克林霉素、林可霉素等的效价测定
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    改良Letheen肉汤 化妆品微生物评价时使防腐剂失活 500g incubation media 改良Letheen肉汤 化妆品微生物评价时使防腐剂失活 500g
    苍白芽孢杆菌 支/瓶
    FBitive(A、B)
    PeptonefromCaseinAgar
    人前列腺成纤维细胞裂解物HPrFL
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    SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人细胞裂解液 (阳性对照)
    人角膜上皮细胞HCEpiC
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    原代单核细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml
    HRCEpC-c 人肾皮质上皮细胞(HRCEpC) 500,000cells 人星形胶质细胞HA

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    相关实验
    • MEF小鼠胚胎成纤维细胞知识总结

      基成分:89% DMEM (Gibco # 12100-046)10% FBS (Gibco # 16000-044)1% NEAA (Gibco # 11140-050)MEF每传一代就会生长得更慢些。你第一次传代的比例可以是1:5,但是最后一次的传代(第4代或第5代)比例应该是1:2。小鼠胚胎成纤维细胞的冻存 重悬培养基: 80% DMEM 20% FBS 1%  NEAA 冻存培养基: 60% DMEM 30% FBS 20% DMSO 1、用不含钙镁离子的PBS洗一次细胞

    • 小鼠胚胎成纤维细胞MEF培养相关知识总结

      注意观察你的培养瓶。 注释: 我们已用CF-1品系的鼠制备了成纤维细胞。 培养基成分: 88% DMEM 10% FBS 1%  NEAA 1%   双抗 对于新建立的细胞系,要对样本进行支原体检测。 小鼠胚胎成纤维细胞的消化/传代 1、移去MEF培养基 2、用5ml不含钙镁离子的PBS洗涤细胞(以去除胰蛋白酶的抑制物)。 3、每个培养瓶里加入1.5ml

    • MEF小鼠胚胎成纤维细胞富集/消化/传代知识总结

      ,这发生在准备胚胎的第二天。这可能或早或晚发生,所以请注意观察你的培养瓶。 注释: 我们已用CF-1品系的鼠制备了成纤维细胞。 培养基成分: 88% DMEM 10% FBS 1% NEAA 1% 双抗 对于新建立的细胞系,要对样本进行支原体检测。 小鼠胚胎成纤维细胞的消化/传代 1、移去MEF培养基 2、用5ml不含钙镁离子的PBS洗涤细胞(以去除胰蛋白酶的抑制

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