封闭用鸡血清(原液) 蛋白质研究

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名称：封闭用鸡血清(原液) 蛋白质研究
编号：QN1242
规格：10ml
英文名：Normal Chicken Serum
封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点，另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点，阻断抗体与样品中的Fc受体结合，从而降低背景，减少假阳性。在选择封闭血清时，要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白，且封闭血清来源不能与一抗来源相同，可用与二抗相同来源的封闭血清。

使用方法：
使用时，用PBS(0.01mol/L pH7.2-7.4)将封闭血清原液稀释10或20倍，配成10%或者5%的工作液，直接滴加在组织切片或者细胞涂片上，37℃度孵育10-30分钟，清除血清，勿洗，滴加适当比例稀释的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃过夜。

储存条件：-20℃，有效期5年

封闭用鸡血清(原液) 蛋白质研究极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
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PY02-298  MMO-MUG  1L  
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BTN131020 Sephacryl S-400基质 Sephacryl S-400
封闭用鸡血清(原液) 蛋白质研究关键词：Normal Chicken Serum,原液,封闭用鸡血清(原液),QN1242


·DAB法显色试剂盒(山羊IgG)
编号：QN1160
英文名称：Western Blotting Goat IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗山羊IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。


封闭用鸡血清(原液) 蛋白质研究关键词：Normal Chicken Serum,原液,封闭用鸡血清(原液),QN1242


·异烟肼
编号：QN0771
英文名称：Isoniazid
规格：100g
别名：4-吡*(代"啶")甲酰肼;γ-吡*(代"啶")甲酰肼
CAS号：54-85-3
分子式：C6H7N3O
分子量：137.14
性状：白色或类白色结晶性粉末、无臭，味微甜后苦，遇光渐变质。

·棉子糖
编号：QN0191
英文名称：D-Raffinose
规格：10g
本品常用于细菌学用作肠道菌鉴别。

别名：五水棉子糖;蜜三糖;甜菜糖
CAS号：17629-30-0
分子式：C18H32O16 ·5H2O
分子量：594.52
储存条件：室温
纯度：98.0 (HPLC)
性状：白色结晶性粉末

·胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚红)
编号：QN0476
英文名称：Trypsin-EDTA solution,0.25% (with phenol red)
规格：100ml|100ml*20
本品由2.5g猪胰蛋白酶和0.2g的EDTA溶于1L的PBS制成。含酚红,不含*和*，过滤除菌。

别名：胰酶
储存条件：-20℃，有效期12个月。

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解，使组织或贴壁细胞分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。

本消化液含0.25%胰酶，溶于无**平衡盐溶液中，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。通常室温消化2分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

使用方法：
1. 贴壁细胞的消化：
a) 吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液，盖过细胞即可，室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足，可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2. 组织的消化：
不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项：
1．由于组织或细胞性质不同，实验人员应依据具体情况，确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况;
2．本产品不含抑菌剂，在使用过程中要特别注意无菌操作，避免消化液被微生物污染;
3．不宜4℃长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存;
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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