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上海恪敏生物科技有限公司
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文献和实验Ficoll:一种已灭菌的,特定密度的密度梯度离心介质。被广泛用作从外周血、骨髓及脐带血中分离高活性的单个核细胞。 Ficoll-Paque溶液包含: Ficoll PM400:由高分子量蔗糖(Mr 400K)聚合物与表氯醇聚合合成(凝集红细胞) 泛影酸钠:使溶液在低粘度下具有高密度 EDTA二钠钙 Ficoll的保存:开盖前保存在4℃~30℃(避光),开盖后保存在 4℃~8℃(避光) Ficoll 产品细分如下: 使用Ficoll (1.077g/ml) 分离
细胞分离液 Ficoll (2)取抗凝外周血(全血)与无菌 PBS 按照 1:1 充分混匀,用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上,动作一定要轻,注意保持清楚的界面。外周血,PBS,淋巴细胞分离液最终体积比为 1:1:1。 (3)水平离心 400 g 成×30 分钟(可根据淋巴细胞分离液 Ficoll 或离心机转子要求调整) (4)离心后可看见管内分为三层,上层为血浆和 PBS,下层主要为红细胞和粒细胞,中层为淋巴细胞分离液。在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带,主要就是单个核细胞,包括淋巴细胞与单核
相关专题 配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基 离子水中加入: 胰化蛋白胨10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。 1、LB固体培养基 1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素,并且倒好板。 LB固体培养基倒板 1。配制:100mlLB培养
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