Ni Sepharose excel 25 ml

Sepharose CL

相关专题   (一)　原理 　　葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与多种哺乳动物 IgG分子Fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。利用改变PH及离子强度可洗脱结合于SPA-Sepharose CL-4B柱上的IgG或不同的IgG亚类，可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。 　　(二)　操作步骤 　　用0.1M PH8.0 磷酸缓冲液 浸泡SPA-Sepharose CL-4B凝胶，15min。按1g干胶200ml

样品体积增加后，对蛋白质的纯化效率有怎样的影响？

Expi Supernatant 进行培养。 纯化过程中，选择柱体积为 0.2 ml 的三种纯化柱：Ni Sepharose 6 FastFlow, Ni Sepharose Excel, 和 Strep-Tactin®XT 4Flow®。 分别用其纯化 60CV (column volume, 柱体积) 和 120CV 的样品，并保持上样样品中的蛋白质含量在纯化柱最大结合载量 80%-95 %。 二、实验结果 01 对比蛋白质回收效率 对于不同的填料，可以从洗脱组分中回

PREPARATION OF PROTEIN A SEPHAROSE CL 4B BEADS

so that the total volume of beads plus buffer is 2 ml).Blocking and Use1.Remove desired volume of 50% slurry (30 µl of slurry per I.P.or Chip).Put in 15 ml conical tube.2.Spin in table top3.Resuspend beads in cold blocking buffer:T. E.25 ml of T.E0.1% Azide25 µl