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- 2025年07月10日
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文献和实验yzzaici888 大家好，本人最近一直在做p-p38的磷酸化，但是一直都做不好。希望各位大侠帮助解决： 蛋白上样量80-100ug，半干转膜70min，5%BSA封闭70min，一抗CST（#9211） 1：500加，4℃孵育过夜，二抗1:8000加室温70min。曝光出的结果很不好，杂带很多，也分析不出那条是目的条带，且没有趋势，见下图 15001046419
10X TBE BUFFER 3 Liters 324 g Tris base 165g Boric acid 120mls 0.5M EDTA (pH 8.0) autoclave for 20 min 2 Liters 216g Tris base 110g Boric acid 80mls 0.5M EDTA (pH 8.0) autoclave
PBS的配制：在800ml蒸馏水中溶解8g NaCL，0.2g KCL，1.44g 磷酸氢二钠和0.24克磷酸二氢钾，用HCL调节溶液的pH值至7.4，加水定容至1升，在1.034x10（5），高压蒸汽灭菌20分钟。室温保存。一般用于实验室中的PBS缓冲液都是这样配制，而不用摩尔分数表示。PBS(Phosphate-buffered Saline) 分子克隆上的配方NaCl: 8gKCl: 0.2gNa2HPO4: 1.44gKH2PO4: 0.24g溶到800ml蒸馏水中 盐酸调pH
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