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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京现货SYBR Green II(10000×)特价优惠在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:SYBR Green II(10000×)
品牌:百奥莱博
编号:XH026
规格:100ul
产地:国产|进口
SYBR Green II RNA染料是一种高敏感的核酸染色试剂,可以对RNA或者是单链的DNA进行染色。使用300nm透射光显影的情况下,非变性凝胶中检测核酸的灵敏度可以达到5×10-7克。与传统的EB染料相比SYBR Green II RNA染料的灵敏度更高,可以应用于杂交前RNA质量的检测,同时不会影响后续的转膜,还可应用于变形梯度凝胶电泳(DGGE)和单链构象多态性分析(SSCP)等实验。SYBR Green II RNA染料可以代替银染和EB染色,消除了银染复杂、费时的缺点;与EB染色相比,形成的SRBR Green II -RNA复合物所激发的荧光是EB-RNA复合物激发荧光的7倍。SYBR Green II RNA染料并不是特异性的结合RNA或者DNA单链,但是其对单链的结合效率是双链的约2倍,广泛的应用于RNA的质量分析中。
染色方法:
SYBR Green II RNA 染料检测核酸时即可预染也可以电泳后再进行染色。做预染使用时,取1ul贮存液加入1ml TE缓冲液或者灭菌双蒸水中混匀,再加入1ml 的6-loading buffer上样缓冲液混匀(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后直接上样。注意:须将商品化的核酸MARKER作一定倍数的稀释(1/5-1/10),这样才能得到比较理想的结果。
电泳后染色。电泳后,在室温、避光的情况之下准备染色液。染色液要在塑料器皿中制备而不要在玻璃器皿中,因为玻璃表层对该试剂有吸附作用。
染料取出后室温放置,恢复室温后简单离心混匀。
染色液使用1×TBE缓冲液进行1:10,000稀释。如果是琼脂糖甲醛变性胶,用1×TBE做1:5,000的稀释。由于SYBR Green II RNA染色液灵敏度高,所以要选用新鲜的1×TBE缓冲液进行稀释,以免缓冲液中残存的杂质产生背景,影响实验结果。注意:为了提高染色的灵敏度,要确定缓冲液的PH值在7.5和8之间,因为SYBR Green II RNA染色液对PH敏感。
把胶放在塑料的染色容器中,加入足够染色液使之覆盖整块胶。用铝箔遮盖或者是放在暗处避光。在染色之前没有必要先将胶中的变性剂如尿素和甲醛洗出来,因为SYBR Green II RNA染色液复合物发出的荧光在甲醛或者尿素存在时不会猝灭。
在室温下轻轻摇晃凝胶。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的最佳染色时间是10-40分钟,琼脂糖凝胶的最佳染色时间是20-40分钟。染色时间也可能随着凝胶的厚度和浓度变化。由于其荧光本底很低,凝胶染色后无需脱色。染色工作放在2-8°C避光保存,可以重复使用3-4次。注意:SYBR Green II RNA染色液不影响RNA向膜上的转移和northern中的后续实验。
染色胶显色和成像:SYBR Green II RNA染色液复合物所激发的荧光可以使用300nm和254nm光波照射,通过Wratten 15 滤光片检测。注意:由于荧光本底较低,所以可以通过适当延长曝光时间的方法检测痕量的核酸。
请带手套操作。
贮存
SYBR Green II RNA染色液保存于DMSO溶液中,此贮存液于保存温度为-20°C,放置于避光干燥器中,在以上条件下,可在保存一年。稀释工作液在2-8°C可以放置一周,在室温放置3-4天。
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| 编号 | 名称 |
| XH022 | Pfu DNA Polymerase |
| XH001 | 动物线粒体DNA提取试剂盒 |
| XH060 | 酵母蛋白小量提取试剂盒 |
| XH098 | HRP-羊抗人IgG |
| XH020 | 非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait) |
| XH013 | 质粒DAN提取试剂盒 |
| XH028 | PBR322 |
| XH046 | JM109受体菌 |
| XH055 | 精简型细胞裂解液 |
| XH076 | 膜再生液 |
| XH017 | 鲑鱼精DNA(10mg/ml) |
| XH096 | FITC-羊抗人IgG |
| XH025 | TE缓冲液(PH=8.0) |
| XH085 | DAB显色试剂盒(20×) |
| XH108 | BCIP/NBT显色试剂盒 |
| XH106 | SABC(山羊IgG)-FITC免疫组化试剂盒 |
| XH034 | 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) |
| XH094 | 羊抗兔IgG(纯化抗体) |
| XH109 | SABC(小鼠IgG)-FITC免疫组化试剂盒 |
| XH007 | 真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式) |
| XH010 | 动物基因组DNA提取试剂盒 |
| XH023 | Taq Plus DNA Polymerase |
| XH079 | Western blotting检测试剂盒(DAB) |
| XH029 | pUC18 |
| XH066 | 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) |
| XH100 | HRP-羊抗猪IgG |
| XH103 | 抗荧光衰减封片剂 |
| XH070 | 载体两性电解质PH5-8 |
| XH052 | 聚丙*(代"烯")酰胺凝胶DNA回收试剂盒 |
| XH047 | HB101受体菌 |
| XH057 | ECL超敏发光液 |
| XH044 | pET-32a(+) |
| XH099 | FITC-羊抗猪IgG |
| XH084 | 抗原修复液(EDTA型)(50X) |
| XH043 | BL21(DE3)受体菌 |
| XH087 | 辣根过氧化物酶(HRP)标记套装 |
| XH048 | BL21(DE3)pLysS受体菌 |
| XH038 | 快速电泳缓冲液(20×) |
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文献和实验V294.PART II,Chapter 3 划痕实验(Wound-Healing Assay)
PART II:BASIC CELL MIGRATION AND RELATED ASSAYS vol.294 Guan J.-L. (ed.) Cell Migration-Developmental Methods and Protocols Chapter 3 Wound-Healing Assay Luis G. Rodriguez, Xiaoyang Wu, and Jun-Lin GuanSummary The wound
)上检测荧光。将芯片置于显微镜的载物台上,在普通光源照明下,调节载物台的垂直位置,使待探测的芯片上表面位于20X物镜的焦平面上。再调节载物台的水平位置,使反应池位于目镜视野的中心。激发光源为氩离子激光器的488nm线,检测方式是背反式。 1.4 PCR基因芯片上应用SYBR Green荧光染料 1.4.1 普通PCR反应检测20例正常人HLA-A2与非A2,应用4步位点特异性PCR反应初筛正常人HLAA2与非A2,4步反应引物如下(表1);PCR反应条件按照本室常规。 1.4.2 用SYBR
【分享】TIANGEN 2009全国巡回荧光定量培训班-厦门大学专场
内容: 理论讲解 n RNA提取、RT以及荧光定量PCR原理与常见问题分析 n RNA提取、RT以及荧光定量PCR试剂选择指南 实验培训 n 动/植物RNA提取实验 n RNA质量鉴定和评价 n RT实验与结果验证 n SYBR Green法绝对/相对定量实验与数据分析 n 实验结果讨论与相关问题答疑 培训班厦门大学专场: 合 作 方:厦门大学分子诊断实验室 地 点:厦门大学 时 间:2009年7月4日——2009年7月5日
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










