相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
844
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖pET-32a(+)库存在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:pET-32a(+)库存
编号:XH044
品牌:百奥莱博
规格:25ug(0.5OD)
产地:国产|进口
载体类型:大肠杆菌表达载体
载体大小: 5900 bp
载体宿主:大肠杆菌(E.coli)
细菌抗性:*苄青霉素(Amp)
5" 测序引物:S Tag primer
3" 测序引物:T7 terminator primer
载体简介:
The pET-32 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fusedwith the 109aa Trx Tag thioredoxin protein . Cloning sites are available for producing fusionproteins also containing cleavable His Tag and S Tag sequences for detection and puri cation.Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/expression regionof the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented
so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corre-sponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using theT7 terminator primer.
我公司的pET-32a(+)库存,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·载体两性电解质ph3-9.5
编号:XH073
规格:12ml
别名:两性电解质两性电解质载体(ph3-9.5):Ampholyte solution、Ampholine。
性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多*基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度:为40%的溶液
用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存:充氮密封4℃保存。保持期,两年。开启后请尽快用完。
·5×蛋白上样缓冲液(含DTT)
编号:XH066
规格:1ml/10ml
产品简介:
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,*酚蓝,缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的*键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱*酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
储存条件:-20℃,有效期一年。
使用说明:
1.请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。
2.混匀后,100℃水浴加热3-5分钟,使蛋白变性。
3.冷却到室温后,离心数秒后,混均再离心30秒取上清直接上样即可。
注意事项:
8%胶时*酚蓝大概在30kd左右, 12%胶时,约在20kd左右,15%胶时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
pET-32a(+)库存关键词:pET-32a,+,pET-32a(+),百奥莱博,XH044
·非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)
编号:XH020
规格:10ml/100ml
非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。
此产品有些公司又叫组织RNA保存液,或者RNAlocker。实际功能是相同的。
储存条件:15~25℃,有效期2年。。低温条件下有结晶析出时加热至37℃溶解后使用。
产品特点
1.操作简单,将组织剪薄浸没在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。
2.替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.RNA完整,因RNAwait能迅速抑制组织中RNA酶的活性,故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4.方便运输,处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。
5.反复冻融,经RNAwait处理的样品可反复冻融20次,其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA的质量。
6.结果准确,RNAwait进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就得以锁定,故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7.可比性强,RNAwait能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8.兼容性广,处理过的样品可以使用TRIzol 等试剂提取其RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA的质量。
技术指标
37℃ 一天(保存三天的样品RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存两周的样品RNA有轻微降解)
2-8℃ 一个月
-20℃和-80℃ 长期
操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×107细胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原则是:量宁多勿少。建议在实际操作中不要称量组织,而直接根据目测结果加入RNAwait量,以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块,体积为125mm3=125µl,故应当加入1.25ml的RNAwait液。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中。
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,较小的组织直接取下,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0.5 cm的任意片状后保存,较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)则可以直接浸入RNAwait。
4. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的最长存放时间(请看技术指标),如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在4℃放置过夜后再转移到最后的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要弃掉保护液。
注意事项:
1.组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2.冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3.保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复温到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
pET-32a(+)库存关键词:pET-32a,+,pET-32a(+),百奥莱博,XH044
·载体两性电解质PH3.5-10
编号:XH069
规格:12ml
别名:两性电解质两性电解质载体(ph3.5-10):Ampholyte solution、Ampholine。
性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多*基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度:为40%的溶液
用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存:充氮密封4℃保存。保持期,两年。开启后请尽快用完。
·SABC(兔IgG)-FITC免疫组化试剂盒
编号:XH113
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, 生物素化羊抗兔:浓缩液100ul。
3, SABC-FITC:浓缩液100ul。
4, 稀释液:30ml。
5, 抗荧光衰减封片剂
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖*酸。
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2.热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
5.根据使用量,用稀释液将生物素化羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
我公司强烈推荐分子生物学试剂系列产品,热情期待您的咨询选购pET-32a(+)库存。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验表达载体的构建是生物技术和所需蛋白质产生的基本工具,本文总结了pET-32α(+)载体技术的构建,该技术通常用于研究实验室。该方法包括获得用于构建载体的外源DNA片段,将DNA片段亚克隆到pET-32α(+)表达载体中,在大肠杆菌 BL21(DE3)中进行蛋白质表达以及在大肠杆菌中在天然条件下进行蛋白质纯化。裂解液。介绍作为分子生物学实验室中非常有用的实践,重组DNA技术(或基因克隆)是指将DNA片段从一种生物体转移到自我复制的遗传元件如表达载体。然后插入的DNA可以在外源宿主细胞中繁殖
walterxp 各位前辈,我想请问一下pet32a用什么受体菌做表达比较好,我只有DH5α。谢谢 花生剥了壳 可以用Rosetta或者BL21,表达的都挺好。 walterxp 好的谢谢 我用BL21了 guoda11 BL21,我看行!用pET32a作为表达载体,我们实验室很多真核蛋白都实现了可溶性表达! 本文由丁香园论坛提供,想了解
素的抗性基因,不特指多位Ampr(试一试)。 无论选用哪种载体,首先都要获得载体分子,然后采用适当的限制酶将载体DNA进行切割,获得分子,以便于与目的基因片段进行连接。pET32a(+)自身载体表达的片段大小 The expected fusion protein expressed encoded by just the pET-32a(+) vector alone would be around 20.4 kDa. The Trx-tag
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









