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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 检测范围:
0.312-20ng/mL
- 检测方法:
用于科研实验检测,定量定性检测
- 应用:
科研使用
- 适应物种:
Sus scrofa; Porcine Pig
- 标记物:
血清,血浆,尿液及相关液体等
- 样本:
人,大鼠,小鼠,兔,猪,植物等
- 规格:
48T/96T
NGF试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中NGF含量。
检测范围:0.312-20ng/mL
灵敏度:0.117ng/mL
规格:96T或48T/盒
NGF试剂盒基本原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗NGF抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的NGF与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗NGF抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗NGF抗体与结合在包被抗体上的NGF结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,NGF浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中NGF的浓度。
NGF试剂盒特异性:
本试剂盒用于检测NGF,经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
回收率:
分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的NGF(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率
| 样本 | 回收率范围(%) | 平均回收率(%) |
| 血清(n=5) | 86-98 | 93 |
| EDTA 血浆(n=5) | 91-103 | 96 |
| 肝素血浆(n=5) | 84-96 | 90 |
在定值血清及血浆样本内加入适量的NGF,并倍比稀释成 1:2,1:4,1:8,1:16 的待测样本,线性范围即为稀释后样本中NGF含量的测定值与理论值的比率。
| 样本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| 血清(n=5) | 83-95% | 85-97% | 93-107% | 85-99% |
| EDTA 血浆(n=5) | 95-105% | 91-102% | 89-99% | 93-104% |
| 肝素血浆(n=5) | 87-101% | 84-98% | 91-103% | 88-96% |
1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3. 若样品OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
NGF试剂盒结果判断和报告常用下列几种方法表示结果:
1.定性测定
2.半定量测定 结果一般以滴度表示。
3.定量测定 即用已知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定,绘制标准曲线,结果以绝对量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘制相应的标准曲线。
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