高效cDNA第一链合成试剂盒(微量样本)(国产,进口)

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")高效cDNA第一链合成试剂盒(微量样本)(国产,进口)，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：高效cDNA第一链合成试剂盒(微量样本)(国产,进口)
规格：25次|100次
英文名：UltraRT cDNA Synthesis Kit
产地：国产|进口
  本试剂盒是专为两步法RT-PCR第一步实验配制的cDNA第一链合成试剂盒。该试剂盒使用的逆转录酶是一种利用大肠杆菌工程菌进行重组与表达的全新高效逆转录酶，去除了RNase H活性并增强了其热稳定性，可利用极低量的总RNA或mRNA合成cDNA第一链，起始样本量可低至pg级。UltraRT逆转录酶与RNA亲合能力强，能通读GC含量高，二级结构复杂的RNA模板，获得高产量的cDNA。
  本试剂盒包含从RNA模板逆转录成cDNA第一链所需的所有试剂，含有Super RT高效逆转录酶、反应缓冲液、引物、dNTP等，使用简单方便。本系统对后续的PCR以及定量PCR试验兼容性高，适用各种PCR反应的DNA聚合酶。

试剂盒组成：

 

组份	25次	100次
UltraRT，200 U/μl	25μl	100μl
5×UltraRT Buffer	120μl	500μl
Primer Mix	60μl	240μl
dNTP Mix，2.5 mM Each	120μl	500μl
RNase-Free Water	1ml	1ml

产品特点：
1、高效逆转录：与RNA模板亲和力高，逆转录效率高达90%，可识别pg级别的模板。
2、自由应对复杂模板：即使GC含量高，二级结构复杂的模板，无需高温变性，也可得到良好结果。
3、使用方便：试剂盒包含除RNA模板外的逆转录所需全部试剂。

注意事项：
1、在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套。
2、实验尽量使用一次性塑料器皿，若使用玻璃器皿，应使用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时，并在120℃下高压灭菌30分钟后使用，或者将玻璃器皿在180℃下干热灭菌60分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用0.1%的DEPC处理后进行高压灭菌。
3、本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃，避免反复冻融。
4、若起始RNA的量小于50ng，建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。

使用方法：
注意：1ng-5μg总RNA可建立20μl反应体系，如果总RNA量大于5μg，请按比例扩大反应体系。

I逆转录操作步骤：

1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、UltraRT Buffer、UltraRT和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、根据以下表格配制反应体系，总体积为20μl。
 

试剂	20μl反应体系	终浓度
dNTP Mix，2.5 mM Each	4μl	500μM Each
Primer Mix	2μl
RNA Template	Xμl	50 pg-5μg
5×UltraRT Buffer	4μl	1×
UltraRT，200 U/μl	1μl
RNase-Free Water	up to 20μl

注意：
a.若起始RNA的量小于50ng，则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。
b.Primer Mix由Oligo(dT)和Random Primer配制而成。可根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer，建议 20μl 反应体系Oligo-dT Primer 50 pmol，或Gene Specific Primer 2pmol。

3、涡旋震荡混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
4、42℃孵育30-50分钟，85℃孵育5分钟。反应结束后，短暂离心，置于冰上冷却。
5、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应，或置于-20℃长期保存。

II若逆转录效率低，或RNA模板二级结构复杂、GC含量高时，建议采用以下步骤：

1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、UltraRT Buffer、UltraRT和RNase-FreeWater溶解并置于冰上备用。
2、根据以下表格配置反应体系，总体积为15μl 。
 

试剂	20μl反应体系	终浓度
dNTP Mix，2.5 mM Each	4μl	500μM Each
Primer Mix	2μl
RNA Template	Xμl	50 pg-5μg
RNase-Free Water	up to 15μl

注意： Primer Mix由Oligo(dT)和Random Primer配制而成。可根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer。

3、70℃孵育10分钟，迅速冰浴2分钟。
4、短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
5、继续向以上反应液中加入以下试剂：

试剂	20μl反应体系	终浓度
5×UltraRT Buffer	4μl	1×
UltraRT，200 U/μl	1μl

注意：若起始RNA的量小于50ng，则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。
6、42℃孵育30-50分钟，85℃孵育5分钟。
7、反应结束后，短暂离心，置于冰上冷却。
8、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应，或置于-20℃长期保存。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

高效cDNA第一链合成试剂盒(微量样本)(国产,进口)正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·IHC复染试剂(改良型苏木素)
编号：WE0322
英文名称：Improved-Hematoxylin
规格：10ml
  苏木精是一种碱性染料，它被氧化后生成氧化苏木精即苏木素后，可将细胞核和细胞内核糖体等嗜碱性结构染成蓝紫色，是常用的细胞核复染试剂。本产品是经改良的Mayer’s苏木素，不含酒精，可用于免疫组化DAB或AEC显色后的细胞核复染。其染色强度适中，一般不需要进行分化处理。复染后核着色鲜亮，背景清晰。

注意事项：
1、操作时应佩戴手套。
2、如核染色过深，可用1%盐*(代"酸")酒精分化适当液分化后，再用PBS或去离子水浸泡切 片3-5分钟，使胞核返蓝。
3、为得到最佳实验结果，请根据实验具体需求，调整试剂用量。

操作步骤：
1、免疫组化常规操作完成后，DAB或AEC显色(HRP系统)。
2、显色强度合适时，用自来水冲洗终止显色。
3、甩去样品上的自来水，滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织，复染30秒至3分钟。
4、用自来水完全冲洗掉复染液，PBS或去离子水浸泡切片3-5分钟，使胞核返蓝。
5、脱水、透明、封片。

实验图例：

乳腺癌 CK19 胞浆阳性使用DAB显示试剂盒(WE0323)显色，改良型苏木素(WE0322)复染，结果图

储存条件：室温

·Rosetta(DE3)感受态细胞
编号：WE0250
英文名称：Rosetta(DE3)Competent Cell
规格：100μl×10支
  本产品是采用进口Rosetta菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。Rosetta菌株是携带*霉素抗性质粒BL21的衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。

产品组成：

组份	0.1ml×10支
Rosetta(DE3)Competent Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。


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ARB11998 大鼠P物质受体(SP-R)代做ELISA实验 Rat substance p receptor,sp-r ELISA KIT
PY02-318  3%*化*赖*酸脱羧酶试验培养基  5克  
ARB12776 小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)Elisa方法检测 Mouse toll-like receptor 9,tlr-9 ELISA KIT
SJ0821 蛋黄粉
SJ0822 特美汀
PY01-188  玉米浸粉  100克  
REE12 羊血清白蛋白
ARB11332 human胎儿血红蛋白(HBF)含量测试 Human anti-cytomegalovirus igM antibody,anti-cmv igM ELISA KIT
10030-85-0 L(+)鼠李糖 L-Rhamnose
ARB12852 小鼠水通道蛋白2(AQP-2)含量检测 Mouse aquaporin 2,aqp-2 ELISA KIT
ARB11408 人神经激肽B(NKB)Elisa定量检测 Human neurokinins b,nkb ELISA KIT
DL-亮*酸 D-Lysine HCL 328-39-2
BTN120511 CpG 甲基转移酶(M.SssI) CpG Methyltransferase(M.SssI)
ARB10883 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa检测 Human tartRate-resistant acid phosphatase 5b,tracp-5b ELISA KIT
PY02-071  西蒙氏枸橼酸盐琼脂  250克  
ARB12653 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白(EotAxIn 1/CCL11)检测服务 Rat eotaxin 1 ELISA KIT
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F040317 狗IgG抗原 Dog IgG
DL-异柠檬酸三*盐 Bromophenol blue 1637-73-6
BTN131190 分子生物学级糖原溶液 Glycogen Solution
1-(3-二甲基胺丙基)-3-乙基碳二亚胺 CDI 1892-57-5
维生素K3 K-Lyte 58-27-5
ARB13835 猪α干扰素(IFN-α)代做ELISA实验 Porcine interferon α,ifn-α ELISA KIT
PY02-212  亚硫*(代"酸")盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础  250克  
ARB13632 兔子胰岛素(INS)Elisa方法检测 Rabbit insulin,ins ELISA KIT
BTN81207 半干法电转液(干粉) Half-Wet Transfer Buffer Powder
ARB13436 鸡戊型肝炎(HEV)ELISA代测服务 
F020114 兔抗人丙型肝炎病毒抗体 Polyclonal Rabbit Anti-HCV
硫*(代"酸")葡聚糖 Sodium iodide 9011-18-1
BL0811 HRP标记羊抗人C3抗体

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