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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
NuPure DNA/RNA Extraction Kit
- 库存:
440
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
DNA/RNA提取试剂盒优惠的品牌:百奥莱博,是优质的RNA纯化产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多DNA/RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:DNA/RNA提取试剂盒优惠
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0203
英文名:NuPure DNA/RNA Extraction Kit
本试剂盒可用于从同一细胞或组织样本中同时纯化基因组DNA和总RNA。由于不需要将样本分成两份用于不同的纯化步骤,该试剂盒可最大限度的回收DNA和RNA。纯化的DNA和RNA被单独洗脱并可直接用于各种下游实验。本试剂盒中不包含*酚和*仿等有毒物质,无需乙醇沉淀,操作简单、快捷。基因组DNA可用于PCR、Real-time PCR、Southern Blot、 Dot Blot、 比较基因组杂交(CGH)、 基因分析和SNP分析; 总RNA可用于RT-PCR、 Real-time RT-PCR、cDNA的合成、Northern Blot、Dot Blot等分析。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer RL | 35ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 100个 |
自备试剂:β-巯基乙醇(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(用无RNase的水配制)、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
③ 配制溶液应使用RNase-Free Water。
④ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响提取DNA和RNA的质量。样品在Buffer RL中,可于-70℃保存一个月。
3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer RW2、Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer RL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请于56℃水浴重新溶解。
6、所有离心步骤均使用台式离心机,室温下进行。
操作步骤:
1、材料处理
① 贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(最大提取量为107个细胞), 收集细胞,弃尽培养液,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),反复吹打使其充分裂解。
注意:一定要弃尽培养液,否则影响裂解和后续的核酸纯化步骤。
② 取不大于30 mg的动物组织,液氮研磨成细粉末,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),或直接加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),匀浆处理。
注意:匀浆要充分,否则影响RNA产量。
2、将上步所得溶液12000rpm(~~13400×g)离心3-5分钟,小心的将上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心30-60 秒,收集滤液。将吸附柱DM放在一个新的收集管中,室温或4℃放置,待提DNA。
注意:确保吸附柱DM上没有液体残留,如果有必要可以重复离心,直至所有的液体通过吸附柱DM的膜。
总RNA提取
3、向步骤2所得滤液中加入1倍体积的70%乙醇(无RNase的水配制),混匀。
4、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱RM中,若一次不能全部加完溶液,可分次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
5、向吸附柱RM中加入700μl Buffer RW1, 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
6、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒, 倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
7、重复步骤6。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱RM置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:此步骤目的是去除吸附柱RM中残余的乙醇,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱RM置于一个新的无RNase1.5ml离心管中,向吸附柱RM的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
① RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤9。
③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤9。
基因组DNA提取
10、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放收集管中。
11、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇), 12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放回收集管中。
12、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱DM置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱DM中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
13、将吸附柱DM置于一个新的无RNase 1.5ml离心管中,向吸附柱DM的中间部位加入100μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心2分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
① Buffer GE的体积不应小于100μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高DNA的产量,将100μl新的Buffer GE加至吸附柱上,重复步骤13。
③ 如果要提高DNA浓度,可以将步骤15所得的DNA洗脱液重新加至吸附柱上,重复步骤13。
储存条件:室温(15~30℃)
我公司的DNA/RNA提取试剂盒优惠,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0383
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, Cy3 Conjugated
规格:100μl
本产品为Cy3标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,可以与TRITC使用相同的滤光片。使用本产品检测灵敏度高,本底低。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Cy3 bis-NHS ester,Amax=550; Emax=570
应用范围:对于大多数实验(1:50-400)
·SDS-PAGE快速电泳液
编号:WE0277
英文名称:Fast SDS-PAGE Running Buffer(10×)
规格:500ml
SDS-PAGE是蛋白质科学研究中最为常用的技术之一,使用常规SDS-PAGE电泳缓冲液(TG,Tris-Glycin系统)进行电泳时,电泳所需的时间一般为90分钟左右(mini胶),应用本产品可使同样的mini胶的SDS-PAGE所需的电泳时间缩短至20-30min,同时电泳后的条带较使用常规的TG电泳缓冲液所跑出的条带分辨率提高且更加清晰。本产品的使用非常简单,只需将您使用的常规TG电泳缓冲液系统更换为本产品的稀释液,调整电压后进行电泳即可,无需添加任何实验步骤。同时稀释为工作液的本产品可重复使用4-5次。本产品既可节省您宝贵的时间也可降低您的实验成本。
注意事项:
1、操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
2、本产品中含有SDS,适合变性凝胶电泳,不适合非变性凝胶电泳。
3、应用本产品所进行的SDS-PAGE的结果显示,本产品的应用会使蛋白的分辨范围发生变化,同等浓度的凝胶,其分辨的最低分子量要小于使用TG电泳缓冲液(见下表)。
操作步骤:(以Bio-Rad mini胶及相关配套设备为例)
1、本产品为10倍浓缩液,使用时用纯水10倍稀释后配制成工作液(例如:取100ml本产品后用纯水定容至1 L)。
2、将适量的本产品加入到电泳槽的内、外槽中,调整电源为恒压200-250 V进行电泳。电泳指示剂*酚蓝至凝胶底部,所需时间约20-30 min。
3、电泳完成后收集电泳槽内、外槽电泳液,4℃保存,可重复使用4-5次,但如发生浑浊请勿使用。
表1 速泳电泳液与常规TG电泳液的最佳分辨率的比较
| 凝胶浓度 | 速泳电泳液 | 常规TG电泳液 |
| 8% | 20-250 kDa | 50-325 kDa |
| 10% | 15-140 kDa | 30-180 kDa |
| 12% | 10-80 kDa | 20-140 kDa |
| 15% | 5-70 kDa | 12-100 kDa |
储存条件:室温
DNA/RNA提取试剂盒优惠关键词:WE0203,NuPure DNA/RNA Extraction Kit,DNA/RNA提取试剂盒
·PCR Mix(含染料)(滴瓶装)
编号:WE0100
英文名称:PCR Mix(With Dye)
规格:5ml
本产品以滴瓶包装,集成了PCR反应所需各要素及稳定剂、增强剂,对PCR反应中各成份的浓度有较高的宽容度,无需加样工具,将本产品直接滴入加有模板、引物的PCR管即可完成反应准备。本产品热稳定性高,启封后置2~8℃保存,六个月内可随时取用。本产品使用高度封闭的热启动DNA聚合酶,可有效减少非特异PCR产物扩增,配制PCR反应体系可在室温进行,但须注意热循环程序的第一步必须包括至少10分钟的95℃热启动。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测。扩增得到的大部分PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因;2~8℃存放六个月,活性无明显改变。
使用方法:
本产品以滴瓶包装,使用时,取掉旋盖后将滴瓶倒置,滴塞口对准已加入适量模板和引物的PCR管口上方,以食指和拇指轻轻挤压滴瓶,滴入一滴反应液,即可完成PCR反应准备。正常挤压时,液滴平均体积约为25μl,可能会因挤压滴瓶用力不一,造成挤出液滴体积存在差异,但对多数PCR反应,均可获得良好扩增。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 反应体积 |
| PCR Mix | 1 滴 |
| Forward Primer,10μM | 1μl |
| Reverse Primer,10μM | 1μl |
| Template DNA | ≤4μl |
注意:
1)引物浓度以10μM作为参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)PCR模板的使用量应视DNA性质加以调整。一般而言,在每滴PCR反应中,当模板为质粒DNA时,以1 pg至10ng为宜;当模板为细菌基因组DNA时,以1ng至100ng为宜;当模板为真核生物基因组DNA时,以10ng至300ng为宜。需注意,PCR模板绝非越多越好。过多的模板会对PCR反应产生抑制作用,且容易增高其它抑制物水平,影响扩增效果。
2、PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30-40个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 60 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)产品含有高度封闭热启动DNA聚合酶,须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
3)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品的扩增效率为1 kb/min。
4)可根据扩增产物下游应用设定循环数。如循环次数太少,扩增量不足;如循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,有效期2年
DNA/RNA提取试剂盒优惠关键词:WE0203,NuPure DNA/RNA Extraction Kit,DNA/RNA提取试剂盒
·人基因组DNA定量试剂盒
编号:WE0230
英文名称:Human Genomic DNA Quantification Kit
规格:1ml|5ml
本产品是采用探针法进行实时荧光定量PCR(qPCR),实现对从各种样品(石蜡样本、流式分选的细胞、血清或血浆样本及少量临床样本等)中抽提的DNA进行浓度和质量的准确检测。产品提供了qPCR过程中所需的全*(代"套")试剂,包括反应混合液,引物混合物,标准品,只需添加提取好的DNA即可开始实验,操作简单方便、省时省力。反应混合物使用了高效、快速的热启动BaldStar Taq DNA Polymerase,扩增灵敏度高,特异性好,缩短了程序反应的时间。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
我公司生产供应销*(代"售")的RNA纯化产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购DNA/RNA提取试剂盒优惠。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
2013年诺贝尔生理或医学奖落花落“基础研究”,无疑给了大家一剂兴奋:在最基础的研究上,坚持下去;在小实验室里,自由探索。丁香通试用中心为助力科研,特推出申请试用装,送丁当的活动。 活动时间:2013.10.9-10.30 活动形式:跟帖附上申请的试用装,每申请一件,送2个丁当。 格式:我申请:动物组织总RNA提取试剂盒 重点推荐:5款PCR、RNA提取试剂盒 产品特点简介: 1. 动物组织总RNA提取试剂盒:去除DNA污染;无需担心RNA降解;高纯度;高得率
提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂Sample Protector for RNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便。同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差。其次,选择合适的提取试剂是最重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时,操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的total RNA提取,Takara公司的RNAiso
的结果)。 以下为各公司血液RNA抽提试剂盒的对比表 百泰克公司核酸提取相关优势产品 简便、高效的血液总RNA提取试剂盒 血液总RNA提取是一个比较难的问题,因为血液本身90%多都是水,RNA含量少,所以提取RNA相对困难,现有市场上的大部分血液总RNA提取试剂盒都需要裂解红细胞,倒掉上清,然后再从白细胞中提取总RNA,最后还要用DNase酶进行基因组DNA
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









