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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Magbead Swab DNA Extraction Kit
- 库存:
451
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货WE0209型磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货WE0209型磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒折扣价
英文名:Magbead Swab DNA Extraction Kit
编号:WE0209
品牌:百奥莱博
规格:96次
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的口腔拭子DNA提取方法,适用于从干燥保存或在保护液中保存的口腔拭子中提取基因组DNA。在高盐存在时,DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后,高纯度的DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。纯化得到的DNA纯度好(A260/280的比值在1.7-1.9之间),完整度高(>15 kb),可用于二代测序、定量PCR、芯片检测等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 96次 |
| Buffer WL | 36ml |
| Buffer ML | 36ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 80ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 50ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 1ml |
自备仪器及试剂:
1、手动单管操提取:
1)恒温混匀仪
2)2/15ml磁力架
3)异丙醇、无水乙醇
2、手动96孔深孔板提取:
1)恒温混匀仪
2)废液抽吸系统
3)手动连续分液器
4)电动连续分液器
5)手动连续分液器分液管
6)96孔深孔板磁力架
7)异丙醇、无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配置好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
3、Magbeads使用前需涡旋震荡20秒使其充分混匀。
4、首次使用前应按试剂瓶标签在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇并做好标记。
5、实验过程中,磁珠在溶液中的充分混匀对于提取的得率与纯度都有很大的影响。实验过程中务必使磁珠与溶液充分混匀。不同厂家生产的恒温混匀仪震荡混匀效果有一定差异,实验过程中请注意观察磁珠状态。如出现磁珠贴壁等未充分混匀的现象,请用移液器吹吸混匀或调整震荡频率
操作步骤:
I、手动单管操作:
方案一(用于从干燥保存的口腔拭子中提取基因组DNA):
1、将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下,置于2.0ml的离心管中。
2、向离心管中加入20μl 蛋白酶K 和300μl Buffer WL,之后将离心管放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡裂解30分钟。
注意:如无恒温混匀仪,将离心管我选振荡10秒后放于56℃水浴锅中孵育30分钟,期间每隔5分钟涡旋振荡10秒钟。
3、将离心管从恒温混合仪上取下,短暂离心后加入300μl Buffer ML。之后将离心管放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡裂解10分钟。
注意:如无恒温混匀仪,将离心管我选振荡10秒后放于56℃水浴锅中孵育30分钟,期间每隔5分钟涡旋振荡10秒钟。
4、将步骤3中的离心管短暂离心后室温放置5分钟,之后将裂解产物转移至1.5ml的离心管中。向离心管中加入200μl异丙醇和10μl充分混匀的Magbeads,涡旋震荡5秒钟后将离心管放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀5分钟或将离心管连续颠倒混匀10分钟。
5、将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、将离心管从磁力架上取下,加入750μl Buffer GW1(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
7、重复步骤6。
8、将离心管从磁力架上取下,加入750μl Buffer GW2(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
9、重复步骤8。
10、保持离心管固定于磁力架上,用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置5-10分钟,使乙醇挥发干净。
注意:如果离心管侧壁上有液珠,可向离心管中加入750μl无水乙醇,盖盖后颠倒离心管(保持离心管固定于磁力架上),之后彻底弃去无水乙醇。
11、将离心管从磁力架上取下,加入30-100μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟,或将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
12、将离心管放于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
方案二(用于从在保护液中保存的口腔拭子中提取基因组DNA):
1、将口腔拭子的棉签从杆上剪下,置于2.0ml的离心管中。
2、向离心管中加入20μl 蛋白酶K 、300μl保存该拭子的保护液和200μl Buffer ML,之后将离心管放于56℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡裂解30分钟。
注意:如无恒温混匀仪,将离心管我选振荡10秒后放于56℃水浴锅中孵育30分钟,期间每隔5分钟涡旋振荡10秒钟。
3、将离心管从从恒温混合仪上取下,室温放置5分钟。短暂离心后,将裂解产物转移至1.5ml的离心管中。
4、向离心管中加入300μl异丙醇和10μl充分混匀的Magbeads,涡旋震荡5秒钟后将离心管放于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟或将离心管连续颠倒混匀10分钟。
5、将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后充分弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
6、将离心管从磁力架上取下,加入750μl Buffer GW1(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
7、重复步骤6。
8、将离心管从磁力架上取下,加入750μl Buffer GW2(使用前请检查是否已加入无水乙醇)后涡旋点震1分钟或涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于混匀状态)。之后将离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)。
9、重复步骤8。
10、保持离心管固定于磁力架上,用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置5-10分钟,使乙醇挥发干净。
注意:如果离心管侧壁上有液珠,可向离心管中加入750μl无水乙醇,盖盖后颠倒离心管(保持离心管固定于磁力架上),之后彻底弃去无水乙醇。
11、将离心管从磁力架上取下,加入30-100μl Buffer EB。涡旋震荡使磁珠完全悬浮于洗脱液中后将其放于56℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟,或将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
12、将离心管放于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
II、手动96孔板操作:
方案三(用于在96孔深孔板中从干燥保存的口腔拭子中提取基因组DNA):
1、将口腔拭子棉签剪下放入96孔深孔板(简称“深孔板”)中并记录每个孔中样品名称。
2、向加入口腔拭子的深孔板中用电动连续分液器或8通道移液器加入20μl 蛋白酶K 和 300μl Buffer WL,之后将深孔板放于100℃(该恒温混匀仪为悬空加热,裂解液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡孵育30分钟。
3、将深孔板从恒温混匀仪上取下,加入300μl Buffer ML。之后,将深孔板放于100℃(该恒温混匀仪为悬空加热,裂解液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡孵育10分钟。
4、将深孔板从恒温混合仪上取下,把裂解产物按照顺序转移至新的深孔板中。
5、向新的深孔板中加入210μl充分混匀的异丙醇(200μl)与Magbeads(10μl)混合物。之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟。
6、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
注意:用废液抽吸系统去除溶液时,需将真空泵调节至较小的负压值,使溶液以一个合适的速度被吸走,速度过快容易造成磁珠的流失。
7、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟。
8、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
9、重复步骤7-8。
10、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
11、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
12、重复步骤10-11。
13、用手动连续分液器向96孔深孔板中加入500μl无水乙醇,之后将深孔板固定于25℃、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀1分钟。
14、将板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
15、保持深孔板固定于96孔板磁力架上,将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板从96孔板磁力架上取下放于100℃、1600 rpm的恒温混匀仪上静置5分钟。
16、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板加入50-100μl Buffer EB,之后将深孔板放于100℃(因该恒温混匀仪为悬空加热,洗脱液实际温度在50-60℃之间)、 1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀10分钟。
17、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟,用8通道移液器溶液转移至96孔PCR板中盖盖后-20℃保存备用。
方案四(用于在96孔深孔板中从在保护液中保存的口腔拭子中提取基因组DNA)
1、将口腔拭子棉签剪下放入96孔深孔板(简称“深孔板”)中并记录每个孔中样品名称。
2、向加入口腔拭子的深孔板中用电动连续分液器或8通道移液器加入20μl 蛋白酶K 、300μl保护该拭子的保护液和200μl Buffer ML,之后将深孔板放于100℃(该恒温混匀仪为悬空加热,裂解液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡孵育30分钟
3、将深孔板从恒温混匀仪上取下,把裂解产物按照顺序转移至新的深孔板中。
4、向新的深孔板中加入310μl充分混匀的异丙醇(300μl)与Magbeads(10μl)混合物。之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混合仪上震荡混匀5分钟。
5、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
注意:用废液抽吸系统去除溶液时,需将真空泵调节至较小的负压值,使溶液以一个合适的速度被吸走,速度过快容易造成磁珠的流失。
6、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW1(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀2分钟。
7、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
8、重复步骤6-7。
9、用手动连续分液器向深孔板中加入500μl Buffer GW2(加入前检查是否已加入无水乙醇),之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀3分钟。
10、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
12、用手动连续分液器向96孔深孔板中加入500μl无水乙醇,之后将深孔板固定于25℃、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀1分钟。
13、将板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。
14、保持深孔板固定于96孔板磁力架上,将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置2分钟。之后将深孔板从96孔板磁力架上取下放于100℃、1600 rpm的恒温混匀仪上静置5分钟。
15、用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板加入50-100μl Buffer EB,之后将深孔板放于100℃(因该恒温混匀仪为悬空加热,洗脱液实际温度在50-60℃之间)、1600 rpm的恒温混匀仪上震荡混匀10分钟。
16、将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置2分钟,用8通道移液器溶液转移至96孔PCR板中盖盖后-20℃保存备用。
储存条件:室温(15~30℃)
欲咨询购买北京现货WE0209型磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒折扣价,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·HRP标记链霉亲和素
编号:WE0386
英文名称:Peroxidase-Streptavidin
规格:100μl
HRP标记链霉亲和素可用于微量抗原、抗体及核酸等大分子的定量、定性检测及定位观察研究,与生物化的抗体联合使用,可检测微量抗原的存在及分布。本产品可用于Immunohistochemistry(IHC)、Western Blot、ELISA等检测。
链霉亲和素与生物素具有极高的亲和力,反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点,因此,它可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物,通过标记的HRP催化底物显色,具有多级放大作用。与亲和素相比,链霉亲和素不带糖基、等电点低,在使用中表现出更低的背景和更高的检测灵敏性。
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:1000-5000)
ELISA(1:1000-5000)
Immunohistochemistry(1:100-400)
·2kb DNA Marker
编号:WE0246
英文名称:Peroxidase-Streptavidin
规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
2 kb DNA Marker由6条DNA片段组成,分别为2000bp、1000bp、750 bp、500 bp、250 bp和100 bp。本产品为已含有1×Loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用十分方便;电泳时750 bp的DNA片段量约为150ng,显示亮带,其他条带的DNA量约为50ng。
注意事项:
1、本产品可直接化冻混匀使用,无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶,以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时,凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大,因此尽量选用质量好的琼脂糖,推荐凝胶浓度为1%-2%,电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大,对短片段DNA分离性能越好;反之,凝胶浓度越小,越有利于长片段DNA的分离。
使用方法:
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽,大于6mm时,须适当增加上样量),进行电泳。
1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期24个月。
北京现货WE0209型磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒折扣价关键词:磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒,Magbead Swab DNA Extraction Kit,WE0209
BL1282 酚:*仿=25:24(PH<5.0)
二硫化钼 Amberlyst AB-8 1317-33-5
利巴韦林 D-Trytophan 36791-04-5
角鲨烷 4-Fluorobenzoic acid 111-01-3
ARB13185 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)代做ELISA实验 Mouse insulin-like growth factor 1,igf-1 ELISA KIT
BTN90407 Lambda DNA Lambda DNA(λ DNA)
ARB11133 人肽基脯*酰顺反异构酶(PPI)血清中含量检测 Human peptidyl prolyl cis/trans isomerase,ppi ELISA KIT
57-88-5 胆固醇 Cholesterol
ARB13021 小鼠谷*酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)elisa测定使用说明书 Mouse glutamic acid decarboxylase autoantibody,gad-ab ELISA KIT
H0901 鸡血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
CV0201 pSURE -T Simple 载体连接试剂盒
ARB10856 人抗类固醇生成细胞抗体(SCA)ELISA检测服务 Human steroid producing cell autoantibody,sca ELISA KIT
F030307 胶体金标记兔抗卵清蛋白抗体 Rabbit Anti-OVA*GOLD
BTN130640 核酸内切酶V Endonuclease V
F030438 胶体金标记山羊抗人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*GOLD
BL1224 GoldViewⅡ型核酸染色剂(5000×)
北京现货WE0209型磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒折扣价关键词:磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒,Magbead Swab DNA Extraction Kit,WE0209
ARB12943 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢA(GP-ⅡbⅢA/CD41+CD61)elisa检测说明书 Mouse platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,gp-ⅡbⅢa ELISA KIT
PY08-032 乳糖胆盐发酵管(单料带导管) 10ml 10支/盒,用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
ARB10567 人过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)酶联免疫定量检测 Human lipid peroxlde,lpo ELISA KIT
ARB12026 大鼠β内啡肽受体(β-EPR)定量分析 Rat beta-endorphin receptor,β-epr ELISA KIT
维生素K1 PVB 84-80-0
F020230 山羊抗猪IgG抗体 Goat Anti-Pig IgG
ARB10635 人血管内皮生长因子(VEGF)ELISA检测服务 Human vascular endothelial growth factor,vegf ELISA KIT
BTN120643 硫*(代"酸")葡聚糖 Dextran Sulfate
F020221 兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)
F030429 胶体金标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*GOLD
ARB11954 大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA代测服务 Rat collagen type Ⅱ,col Ⅱ ELISA KIT
BL1405 RNAsaver(RNA长效保存液)
F030229 HRP标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*HRP
ARB13895 猪伪狂犬病抗体血清中含量检测 Porcine anti-prv ELISA KIT
9,10-菲二酮 p-Toluenesulfonic acid sodiu*(代"m") 84-11-7
ARB11697 人硫*(代"酸")角质素(KS)elisa测定使用说明书 Human keRatan sulfate,ks ELISA KIT
亚精胺 Acyl coenzyme A Synthetase 124-20-9
ARB14055 猴载脂蛋白B100(Apo-B100)酶联免疫定量检测 Monkey apoprotein b100,apo-b100 ELISA KIT
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文献和实验上非常昂贵,有的更要求昂贵的工作站成本。一般的科研单位院所也无法承受。 溶液型解决方案: 另外一种商品化解决方案是北京艾德莱生物的改良的Puregene纯化DNA,无需蛋白酶K消化,并且确保手工操作时间最小化。流程提供方便的实验 终止点,可暂时保存部分纯化的样品,安全可靠。该方法几个显著优点: 1. 首先该方法采取和世界著名品牌Qiagen、Promega、Roche相同的原理和配方研制而成,不需要复杂的实验设备,也不用有毒的苯酚,氯仿,和昂贵的蛋白酶K消化,操作也非常快捷
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