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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
重组GAPDH
- 亚型:
和纯化兔IgG
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
AP
- 保质期:
二年
- 目录编号:
WE0357
- 级别:
多克隆
- 库存:
769
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
兔
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
GAPDH
- 抗体英文名:
Anti GAPDH Rabbit Polyclonal Antibody
- 抗体名:
抗GAPDH多克隆多克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京抗GAPDH多克隆抗体促销,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京抗GAPDH多克隆抗体促销
编号:WE0357
规格:100μl
英文名:Anti GAPDH Rabbit Polyclonal Antibody
产地:国产|进口
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱*酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个36kDa的亚基组成。除参与糖酵解外,有证据表明哺乳动物细胞中的GAPDH参与了多种胞内生化过程,包括膜融合(membrane fusion)、微管成束(microtubule bundling)、磷酸转移酶(phosphotransferase)激活、核内RNA出核、DNA复制与DNA修复等。GAPDH蛋白几乎在所有组织中都高水平表达,常用于Western Blot检测中校正系统的内参。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
应用种属:人、大鼠
关于北京抗GAPDH多克隆抗体促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒
编号:WE0327
英文名称:Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
规格:50次
本试剂盒是一种采用Annexin V-Alexa Fluor 488与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶不能通过完整的活细胞,但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色, 因此通常将Annexin V与PI配合染色, 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| 4×Binding Buffer | 10ml |
| Propidium Iodide,PI | 500μl |
| Annexin V-Alexa Fluor 488 | 250μl |
注意事项:
1、消化细胞时不能用含EDTA的胰酶。
2、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
3、需自备PBS和去离子水。
4、荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
5、PI对人体有刺激性,请注意适当防护。
6、请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤:
1、细胞样品的准备:
a.对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
b.对于悬浮细胞:1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞,调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl的细胞悬液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS,流式细胞仪(FACS)分析。
实验图例:
Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI双染流式分析图谱
储存条件:2~8℃,避光保存
北京抗GAPDH多克隆抗体促销关键词:兔抗重组GAPDH,重组GAPDH抗体,AP标记重组GAPDH抗体,抗GAPDH多克隆抗体,WE0357
·1kb DNA Ladder
编号:WE0245
规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
1 kb Ladder由8条DNA片段组成,分别为1 kb、2 kb、3 kb、4 kb、5 kb、6 kb、8 kb和10 kb。本产品为已含有1×Loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用十分方便
;电泳时5 kb的DNA片段量约为150ng,显示亮带,其他条带的DNA量约为50ng。
注意事项:
1、本产品可直接化冻混匀使用,无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶,以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时,凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大,因此尽量选用质量好的琼脂糖,推荐凝胶浓度为0.7%-1%,电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大,对短片段DNA分离性能越好;反之,凝胶浓度越小,越有利于长片段DNA的分离。
使用方法:
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽,大于6mm时,须适当增加上样量),进行电泳。
0.7%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期24个月。
·超纯RNA提取试剂盒(DNase I)
编号:WE0193
英文名称:SuperPure RNA Extraction Kit(DNase I)
规格:50次
本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒,本制品可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。首先裂解液充分裂解并匀质化样本,在特有的高盐状态下,RNA特异性地与硅基质结合,在极大程度减少了蛋白污染的同时有效去除了有机溶剂的污染,得到的RNA纯度更好,质量更高。本产品可从各细胞或组织中快速提取总RNA,每次可处理 30-50 mg组织或 5×106 细胞,可同时处理多个不同样品。如果是对微量DN非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除,提取后的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| DNase I | 1000 U |
| 10×Reaction Buffer | 1000μl |
| TRIzon Reagent | 60ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴几分钟,即可溶解。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
操作步骤:
1、样品处理
① 组织:30-50 mg组织在液氮中充分研磨后加入1ml TRIzon Reagent,或在组织样品中加入1ml TRIzon Reagent后匀浆处理。
注意:样品体积不超过TRIzon Reagent体积的10%。
② 单层培养细胞:吸去培养液,加入适量 ,每10cm2加入1ml TRIzon Reagent。
③ 细胞悬液:离心收集细胞。每5×106细胞加入1ml TRIzon Reagent。
2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2分钟。
4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心10分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制),颠倒混匀。
6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
9、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
10、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
12、重复步骤11。
13、12000rpm离心2 分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
14、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤14。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤14。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京抗GAPDH多克隆抗体促销关键词:兔抗重组GAPDH,重组GAPDH抗体,AP标记重组GAPDH抗体,抗GAPDH多克隆抗体,WE0357
ARB11716 人集聚蛋白(AgrIn)Elisa定量检测 Human agrin ELISA KIT
ARB13467 鸡免疫核糖核酸(IrnA)含量检测 Chicken immune rna,irna ELISA KIT
23491-52-3 Bis Benzlimide Hoechst NO33342 荧光染料
SJ0784 延胡索酸
ARB13823 豚鼠端粒酶(TE)检测服务 Guinea pig telomerase,te ELISA KIT
ARB10841 人抗肾小管基底膜抗体(TBM)ELISA检测服务 Human tubular basement membrane antibogy,tbm ELISA KIT
BL1172 DNA病毒基因组提取试剂盒
25322-68-3 PEG3350 聚乙二醇
对称二*基偶氮羰酰肼 HEEDTA 538-62-5
ARB13583 兔子皮质醇(CortIsol)Elisa定量检测 Rabbit cortisol ELISA KIT
ARB12411 大鼠组蛋白H2b(Histon-H2b)含量检测 Rat Histon-h2b ELISA KIT
ARB13443 鸡白介素18(IL-18)定量分析 Chicken interleukin 18,IL-18 ELISA KIT
ARB12246 大鼠血管生成素受体TIe1(ANG-R-TIe1)elisa检测操作说明书 Rat angiopoietin receptor tie1,ang-r-tie1 ELISA KIT
十二烷基三甲基*化铵 4-Nitrophenyl palmitate 1119-94-4
PY01-047 水合茚三酮 进分 10克
ARB12785 小鼠α干扰素(IFN-α)Elisa定量检测 Mouse interferon α,ifn-α ELISA KIT
核糖核酸酶抑制剂 Tropaeolin O sodiu*(代"m") salt
SJ0714 40%丙*(代"烯")酰胺
58-85-5 D-生物素/维生素B7 D-Biotin(Vitamin H)
丫啶橙 2′-O-Methyl-Uridine 10127-02-3
白藜芦醇 Fmoc-Leu-OH 501-36-0
9001-12-1 CollagenaseⅤ 胶原酶Ⅴ
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文献和实验【原创】穷人的劳斯莱斯-我的五年western blot体会
奶粉,不归,260元500克,也是从北京华美买的。 ECL我用pierce的,500毫升1650元,比国产的还便宜好用。 胶片是柯达的,以前用过乐凯的,不如柯达。 我很少用丽春红或考马斯染膜或染胶,总觉得是脱裤子***的事。 4. Western Blot实验关键 Western Blot操作步骤多,每一步的失误都会造成全盘失败,综合而言,抗体仍然是决定成败的关键,如果抗体很滥,就是神仙也没招。其中内参抗体很重要,因为内参抗体的选择关系到全盘实验的考评。Actin,Tubulin,GAPDH
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(3400 元/100 微升),而且说是 100 微升,但至多能吸出来 90 微升;Sigma 的价最贵;比较有性价比的是 CST 的抗体,现在好像是 2200 元/100 微升,我前后用过二十几种, 1:1000 的稀释比下,还没有失过手,100 微升通常能完成所有的免疫组化和 western blot 实验,还有一个优点是通常量比 100 微升多出来 10 微升,唯一的不足是 CST 的品种实在不多。Santa 的多克隆抗体质量可以,但是选用 Santa 的单抗还是有风险,估计这也是业界共识
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