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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit
- 库存:
262
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖磁珠法游离DNA提取试剂盒品牌在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:磁珠法游离DNA提取试剂盒品牌
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:96次
编号:WE0204
本试剂盒适用于从血浆、血清、羊水、淋巴液、尿液等无细胞体液中简单、高效的纯化回收游离DNA(Free circulating/Cell-free DNA)。在高盐存在时,游离DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后,高纯度的游离DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可用于定量PCR以及二代测序建库等下游实验。该试剂盒还可用于病毒DNA的提取。
试剂盒组成:
| 组份 | 96次 |
| Buffer KCL | 96ml |
| Buffer KCW1(浓缩液) | 72ml |
| Buffer KCW2(浓缩液) | 60ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 4ml |
自备试剂:异丙醇、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取率低。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer KCW1和Buffer KCW2中加入无水乙醇并做好标记。
4、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
5、Magbeads在使用前一定要涡旋震荡20秒使其充分混匀。
操作步骤:
第一次使用前请检查Buffer KCW1和Buffer KCW2中是否已加入无水乙醇。
1、向1.5ml的离心管中加入20 ul 蛋白酶K ,之后加入300 ul血浆。
2、向上一步的离心管中加入300 ul Buffer KCL,涡旋震荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟。
3、将上一步的离心管从水浴锅中取出,短暂离心后室温放置5分钟。
4、向上一步的离心管中加入150 ul异丙醇,涡旋震荡混匀后短暂离心。之后向离心管中加入40 ul彻底混匀的Magbeads,涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡10分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)或连续颠倒混匀10分钟。
注意:如果样品量较多,可将异丙醇与Magbeads提前按比例混匀,之后同时加入裂解产物中。
5、将上一步的离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上),期间避免接触Magbeads。
6、将离心管从磁力架上取下,加入500 ul Buffer KCL后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后弃去溶液。
注意:如果样品为血清、羊水、淋巴液或尿液,Buffer KCL漂洗步骤可去除。
7、将离心管从磁力架上取下,加入750 ul Buffer KCW1后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液,期间避免接触Magbeads。
8、将离心管从磁力架上取下,加入750 ul Buffer KCW2后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液,期间避免接触Magbeads。
9、重复步骤8。
10、保持离心管固定于磁力架上,用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置5-10分钟,使乙醇挥发干净。
注意:如果离心管壁上有液珠,可向离心管中加入800 ul无水乙醇。盖盖后颠倒离心管,之后彻底去除无水乙醇。
11、将离心管从磁力架上取下,加入30-100 ul Buffer EB或去离子水。涡旋震荡时Magbeads完全悬浮于洗脱液中后将其放入56℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟或放于56℃水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
12、将上一步的离心管放置于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
储存条件:室温(15~30℃)
我公司的磁珠法游离DNA提取试剂盒品牌,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·IPTG溶液(50mg/ml)
编号:WE0219
英文名称:IPTG Solution(50mg/ml)
规格:5ml
·蛋白酶抑制剂混合物
编号:WE0259
英文名称:Protease Inhibitor Cocktail(100×)
规格:1ml
本品为蛋白酶抑制剂的混合物,使用时取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷,按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail(例如990μl抽提试剂中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail),使其在抽提试剂中成1×工作液。
注意事项:
1.蛋白酶抑制剂严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
2.操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
储存条件:-20℃
·IHC复染试剂(改良型苏木素)
编号:WE0322
英文名称:Improved-Hematoxylin
规格:10ml
苏木精是一种碱性染料,它被氧化后生成氧化苏木精即苏木素后,可将细胞核和细胞内核糖体等嗜碱性结构染成蓝紫色,是常用的细胞核复染试剂。本产品是经改良的Mayer’s苏木素,不含酒精,可用于免疫组化DAB或AEC显色后的细胞核复染。其染色强度适中,一般不需要进行分化处理。复染后核着色鲜亮,背景清晰。
注意事项:
1、操作时应佩戴手套。
2、如核染色过深,可用1%盐*(代"酸")酒精分化适当液分化后,再用PBS或去离子水浸泡切 片3-5分钟,使胞核返蓝。
3、为得到最佳实验结果,请根据实验具体需求,调整试剂用量。
操作步骤:
1、免疫组化常规操作完成后,DAB或AEC显色(HRP系统)。
2、显色强度合适时,用自来水冲洗终止显色。
3、甩去样品上的自来水,滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织,复染30秒至3分钟。
4、用自来水完全冲洗掉复染液,PBS或去离子水浸泡切片3-5分钟,使胞核返蓝。
5、脱水、透明、封片。
实验图例:
乳腺癌 CK19 胞浆阳性使用DAB显示试剂盒(WE0323)显色,改良型苏木素(WE0322)复染,结果图
储存条件:室温
磁珠法游离DNA提取试剂盒品牌关键词:磁珠法游离DNA提取试剂盒,MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit,WE0204
·Western中分子量蛋白Marker
编号:WE0292
英文名称:Western MidiWT Protein Marker
规格:20次(100μl)
本品是专门为Western Blot实验设计的分子量标准。由4种不同分子量的蛋白组成(20 kD、35 kD、60 kD、110 kD),这四种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合,因此该Marker能与待检抗原在同一张胶片上曝光,阳性信号的分子量大小可以直接通过MidiWT的位置做出准确判断,无需后续图片拼接即可确定目的蛋白。另外该Marker还可以作为Western Blot实验的阳性对照。本产品不经过任何化学修饰,分子量精确,可以准确衡量目的蛋白的分子量大小,推荐上样量为5-10 µl。
注意事项:
1、本产品可直接使用,不需要加热。
2、将产品取出后于室温放置融化,务必使其完全融化,否则影响实验结果。
3、该产品与抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带,此时可降低该Western Blot Marker的上样量至2-5μl。
4、使用新配制的凝胶,及时更换电泳缓冲液和转膜液,以免影响实验结果。
操作步骤:
1、将产品取出后于室温放置融化。
2、温和地充分混匀,取5μl至上样孔中,进行SDS-PAGE电泳。
3、电泳完毕后将凝胶上蛋白转至NC或PVDF膜,依次孵育一抗、二抗。
4、孵育完毕并经充分洗涤后,将印迹膜与ECL工作液反应数分钟,使用X-光胶片曝光或化学发光成像。
实验图例
12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后转膜,化学发光法曝光结果。
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融
磁珠法游离DNA提取试剂盒品牌关键词:磁珠法游离DNA提取试剂盒,MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit,WE0204
F030828 BIOTIN标记兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG*BIOTIN
PY02-173 汉克氏液 100克
ARB10346 人反三碘甲状腺原*酸(rT3)Elisa定量检测 Human reversetri-iodothyronine,rt3 ELISA KIT
叶绿素A Flurprimidol 479-61-8
ARB13412 鸡17-酮类固醇(17-KS)检测服务 Chicken 17-ketosteroids,17-ks ELISA KIT
ARB13343 牛α-乳清蛋白(α-lActAlbumIn)ELISA代测服务
ARB10326 人内皮素1(ET-1)Elisa定量检测 Human endothelin 1,et-1 ELISA KIT
半胱*酰甘*酸 Celite 545 19246-18-5
ARB11401 人神经保护因子(CVNPF)酶标法分析 Human cobra venom neuronal protective factor,cvnpf ELISA KIT
胶原酶 Sephadex G-10 9001-12-1
BTN120699 多粘菌素B硫*(代"酸")盐 Polymyxin B Sulfate Solution
PY02-400 YSG培养基 250克
81-88-9 罗丹明B/玫瑰红B Rhodamine B
硅烷偶联剂KH560 D-(+)-Raffinose pentahydrate 2530-83-8
PY02-428 假单胞P琼脂 250克
BL1233 7.5% BSA溶液(细胞培养级)
BL0865 羊抗人白蛋白免疫血清
ARB11271 人骨保护素(OPG)血清中含量检测 Human osteoprotegerin,opg ELISA KIT
E0612 抗凝裂解马血(无菌) 100ml/500ml
PUC19质粒 Vanillin
北京百莱博科技有限公司是DNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购磁珠法游离DNA提取试剂盒品牌。
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文献和实验游离DNA可电泳观察,虽然我们做到了,这也是锦上添花的事,因为现有的检测方法完全可以实现更微量核酸的检测工作。血清/血浆游离DNA提取试剂盒 Cat#DK606游离DNA(或称循环DNA,以下简称cfDNA)是一种无细胞状态的、片段化的胞外DNA,存在于血液、滑膜液和脑脊液等体液中。cfDNA在正常人的血液中含量甚微,平均值为13 ng/ml[1],而当机体在一些特殊状态时(如患有肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病、中风、心肌梗死及妊娠等),其含量明显上升,比如恶性肿瘤患者平均值达到180ng/ml
背景: 全血中提取DNA是一项古老又基本的分子生物学的工作,根据不同的下游的实验和分析,历史上使用方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,硅胶模离心柱吸附法,磁珠法,等等。各种方法都有自己的优点和缺点。不同的方法适合不同的下游实验需求。一直以来血样,尤其是病例血样的采集是一个很繁琐和高成本的问题。随着时代的发展,各种成本更是急剧上升,准确、清晰的采集血样的成本急剧上升的后果是研究工作者非常迫切需要一种试剂盒,可以一次性的尽可能的将采集到的最大血样量(1-10ml)的DNA
基中的营养物质(包括外泌体)全部消耗掉的,这时的上清液中的外泌体含量大幅度下降。 接着,从细胞上清液的预处理下手。拿到细胞上清液收集后该如何处理呢?这是一个常见问题。我们先要弄清楚细胞上清液中会有什么物质?除了我们感兴趣的外泌体外,还有少量细胞、细胞碎片、游离蛋白、脂类等。我们首要做的就是通过差速离心尽可能的去除一些杂质物,先用 800 ~ 1000g 左右的离心力 10 分钟有效去除细胞残留,取上清后,再 8000 ~ 10000g 离心 10 分钟有效去除细胞
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