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- 详细信息
- 技术资料
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2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Citrate Buffer(100×)
- 库存:
583
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)优惠促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)优惠促销
产地:国产|进口
规格:100ml
英文名:Citrate Buffer(100×)
编号:WE0318
福尔马林固定时,组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此,对于石蜡切片,要求在进行IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。本抗原修复液适合于大多数的抗原,用该修复液修复后阳性染色明显增强,抗原定位理想。
注意事项:
1、请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时,操作请务必谨慎,尤其高压修复时,保证锅内有足量的修复液,以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。
操作步骤:
1、高压热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将稀释好的修复液加入高压锅内,将待修复切片浸于其中,保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内,再置于锅内修复液浴中),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2 分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大,是最常用的热修复法。
2、微波热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将切片放入盛有修复液的容器中,置微波炉内加热至沸腾,停止加热,使容器内液体温度下降保持在 95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意:请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴,但小于高压修复。
3、沸水浴热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中,并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中,电炉上加热煮沸,从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温,蒸馏水冲洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。
储存条件:2~8℃
北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)优惠促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·PVDF膜(0.22μM)
编号:WE0300
英文名称:PVDF Membrane(0.22μM)
规格:1 sheet
·蛋白酶K
编号:WE0212
英文名称:Proteinase K
规格:100mg
蛋白酶K是一种以丝*酸为活性中心的枯草类蛋白酶,具有广泛的底物特异性,特别优先分解与疏水性*基酸、含硫*基酸、芳香族*基酸C末端邻接的酯键和肽键。可在多种不同盐、变性剂、去污剂、pH值和温度条件下进行分解蛋白作用。在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性,主要用于DNA、RNA制备过程中蛋白的消化。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解,溶解后的蛋白酶K 浓度为20mg/ml。
2、孵育温度为25℃~65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
3、配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。-20℃长期保存。
储存条件:室温(15~30℃)
北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)优惠促销关键词:IHC抗原修复液,100×,柠檬酸缓冲液,柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×),WE0318,Citrate Buffer(100×)
·大片段Bst DNA聚合酶
编号:WE0236
英文名称:Bst DNA Polymerase, Large Fragment
规格:800U|4000U
本品是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶,其基因来源于Bacillus stearothermophilus,并在原始序列的基础上进行了部分点突变。该蛋白 具有5"→3" DNA聚合酶活性,无5"→3"和3"→5"核酸外切酶活性,具有强链置换活性。应 用于DNA等温扩增(LAMP)、多重置换扩增(MDA)、全基因组扩增(WGA)、建 库测序等。
·抗V5标签单克隆抗体
编号:WE0343
英文名称:Anti V5 Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
V5标签是从猿病毒5(SV5)副粘病毒P蛋白和V蛋白中分离得到的由14个*基酸残基组成的多肽(GKPIPNPLLGLDST)。该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的V5标签,不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的V5-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(1:1000-10000)
·1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)
编号:WE0284
英文名称:1.5 M Tris-HCl(pH8.8)
规格:500ml
V5标签是从猿病毒5(SV5)副粘病毒P蛋白和V蛋白中分离得到的由14个*基酸残基组成的多肽(GKPIPNPLLGLDST)。该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的V5标签,不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的V5-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(1:1000-10000)
·一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)
编号:WE0147
英文名称:Super TaqMan OneStep RT-qPCR Kit
规格:100次
本试剂盒是采用探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时,逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高,荧光信号强,信噪比高,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效,提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围,对目的基因定量更准确,重复性好,可信度高。
试剂盒组成:
| 组份 | 100次 |
| 2×Super TaqMan OneStep Buffer | 1.4ml |
| Super OneStep Enzyme | 100μl |
| RNase-Free Wat er | 1ml |
注意事项:
1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验,在操作过程中应避免RNase污染,建议在专门的区域进行RNA操作,使用专门的仪器和耗材,操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。
4、本试剂盒必须使用特异性引物,引物的选择可根据具体实验来选择,引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果,设计引物时需考虑GC含量,引物长度,引物位置,PCR产物的二级结构等因素,建议采用专业的引物设计软件进行设计。
5、本试剂盒推荐使用特异性探针,建议采用专业的设计软件进行设计。
使用方法:
以下举例为常规的反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)
1、将RNA模板、引物、2×Super TaqMan OneStep Buffer、Super OneStep Enzyme和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系:
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Super TaqMan OneStep Buffer | 12.5μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Super OneStep Enzyme | 1.0μl | |
| RNA Template | Xμl | 10 pg~100ng |
| RNase-Free Water | up to 25μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常RNA模板的量以10 pg-100ng为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
3、混匀,短暂离心,将溶液收集到管底。
4、RT-PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 45℃ | 20 min | |
| PCR预变性 | 95℃ | 2-5 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 30-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30-45 s |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、2-5 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)优惠促销关键词:IHC抗原修复液,100×,柠檬酸缓冲液,柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×),WE0318,Citrate Buffer(100×)
67-48-1 *化胆碱 Cholinechloride
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