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- 百奥莱博
- 北京
- WE0168-ADO
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
Gel DNA Extraction Kit
- 库存：
974
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京WE0168型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒报价在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称：北京WE0168型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒报价
产地：国产|进口
英文名：Gel DNA Extraction Kit
规格：50次|200次
品牌：百奥莱博
本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方，通过独特的离心吸附柱快速的结合DNA-洗涤-洗脱步骤即可从普通或低熔点琼脂糖凝胶中回收纯化100bp-10 kb的DNA片段，溶胶速度快，每个吸附柱最高可吸附10μg的DNA，同时有效去除引物、核苷酸、酶、矿物油、琼脂糖等杂质。纯化回收的DNA纯度及浓度高，完整性好，回收率高，可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer PG | 25ml | 100ml |
| Buffer PS | 15ml | 60ml |
| Buffer PW(浓缩) | 10ml | 50ml |
| Buffer EB | 10ml | 30ml |
| 离心吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点：
1、快速简单：操作步骤少，简单三步即可获得即用型DNA。
2、回收率高：新型硅基质膜技术和试剂配方保证每次最大量回收到纯度极高的目的DNA。
3、处理量大：每个离心吸附柱每次最多可吸附的DNA量为10μg。
自备试剂：无水乙醇，异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
2、使用前请检查Buffer PG，如果出现结晶或者沉淀，可在37℃水浴中放置3-5分钟，即可恢复澄清。
3、电泳时最好使用新的电泳缓冲液，避免影响电泳和回收效果；如下一步实验要求较高，请尽量使用TAE电泳缓冲液。
4、切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。
5、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少，洗脱体积越少，回收率越低。
6、将水浴锅预热至50℃。
7、Buffer PG中含有pH指示剂，当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色，此时DNA才能够有效的与膜结合，当pH值偏高时溶液的颜色变为桔红色和紫色，需要进行调整。
8、所有离心步骤均可室温下进行。
操作步骤：
1、将单一目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)，放入干净的离心管(自备)中，称量计算凝胶重量(提前记录离心管重量)。
注意：若胶块的体积过大，可将胶块切成碎块。
2、向胶块中加入1倍体积Buffer PG(如凝胶重为100 mg，其体积可视为100μl，依此类推)。
3、50℃水浴温育，其间每隔2-3分钟温和地上下颠倒离心管，待溶胶液为黄色，以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块，可再补加一些溶胶液或继续放置几分钟直至胶块完全溶解。
注意：
1)凝胶完全融解后胶溶液为黄色，可进行后续操作；若胶溶液为桔红色或紫色，可向胶溶液中加10-30μl 的3 M醋酸*(pH 5.0)，将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作。
2)胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱，吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。
4、(可选步骤)当回收片段<300 bp时，应加入1/2胶体积的异丙醇，上下颠倒 混匀(如凝胶重100 mg，则加入50μl的异丙醇)。
5、柱平衡：向已装入收集管中的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、将步骤3或4所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
注意：吸附柱容积为750μl，若样品体积大于750μl 可分批加入。
7、向吸附柱中加入450μl Buffer PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
注意：如果纯化的DNA用于盐敏感的实验(例如平末端连接或直接测序)，建议加入Buffer PW静置2-5分钟再离心。
8、重复步骤7。
9、13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附柱放到一个新的1.5ml离心管(自备)中，向吸附膜中间位置悬空滴加50μl Buffer EB，室温放置2分钟。13000rpm离心1分钟，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意：
1)为了提高DNA的回收量，可将离心得到的溶液重新滴加到吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟。
2)洗脱体积不应小于30μl，体积过少会影响回收效率。
3)回收大于10 kb的DNA片段时，Buffer EB应在50℃水浴中预热，可增加回收效率。
备注：本试剂盒也适用于PCR产物的纯化回收。在PCR反应液中加入等体积的BufferPG，充分混匀(对于回收小于150bp的小片段可将溶液的体积增加到3倍以提高回收率)接上述步骤5进行后续操作。
储存条件：室温(15～30℃)。
北京WE0168型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒报价极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
·RNase A溶液(100mg/ml)
编号：WE0225
英文名称：RNase A(100mg/ml)
规格：1ml
·游离DNA提取试剂盒
编号：WE0183
英文名称：CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，样品裂解后，游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本品可以处理0.1-1ml的液体样本，配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20μl。纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，游离DNA得率与样品的类型，储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer CL | 45ml |
| Buffer CB(浓缩液) | 60ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer EBL | 10ml |
| 蛋白酶K | 100mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml |
| 吸附柱DF及收集管 | 50套 |
| 离心管(L-1.5ml) | 50个 |
保存条件：吸附柱DF置于2～8℃保存1年，其他组分室温(15～30℃)。
自备试剂：无水乙醇、异丙醇。
产品特点：
1、适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。
2、可以处理0.1-1ml的液体样本，配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20μl。
3、纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取量下降。
3、本试剂盒可以提取0.1-1ml液体样品。
4、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解。
5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
6、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
7、实验开始前请将水浴锅预热至60℃。
8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用。
操作步骤：
1、向离心管(自备)中加入20μl 蛋白酶K 。
2、加入200μl血清/血浆样本。
注意：当样品量超过200μl时，请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量，具体试剂加入量可参考附表。
3、加入160μl Buffer CL，颠倒混匀，剧烈震荡至少30秒。
4、60℃孵育30分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：200μl 血清/血浆样本60℃孵育10-15分钟即可。
5、加入360μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇)，震荡至彻底混匀。
6、冰浴5分钟，短暂离心，使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
7、将步骤6所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入750μl 无水乙醇，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
12、将吸附柱置于新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl Buffer EBL或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用,且离心之前室温孵育5分钟，可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度，可以将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer EBL洗脱并于-20℃保存。
附表：不同样本量推荐试剂加入量：
| 加入物 | 加入量(μl) | ||||
| 样本 | 200 | 300 | 600 | 800 | 1000 |
| Buffer CL | 160 | 240 | 480 | 640 | 800 |
| Buffer CB | 360 | 540 | 1080 | 1440 | 1800 |
| 蛋白酶K | 20 | 30 | 60 | 80 | 10 |
储存条件：室温(15～30℃)。
北京WE0168型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒报价关键词：WE0168,琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,Gel DNA Extraction Kit
·miRNA荧光定量检测试剂盒
编号：WE0158
英文名称：miRNA qPCR Assay Kit
规格：125次
本试剂盒采用SYBR Green I嵌合荧光染料法的原理来进行miRNA荧光定量PCR检测。试剂盒包括检测所需的2×miRNA qPCR premix和Reverse primer。
2×miRNA qPCR premix是专门为miRNA定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR检测试剂，所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。其中的BaldStar Taq DNA polymerase是经化学修饰的高效热启动酶，配合独特的缓冲体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内对miRNA进行准确定量。
试剂盒组成：
| 组份 | 125次 |
| 2×miRNA qPCR Mixture(ROX) | 2×750μl |
| Reverse Primer，10μM | 60μl |
| ddH2O | 1.5ml |
备注：本试剂盒须与miRNA cDNA第一链合成试剂盒(WE0157)配套使用。
自备实验材料：qPCR上游引物(Forward primer)。
Forward Primer设计原则
1、遵循引物设计的最普遍原则。
2、以成熟的miRNA序列为基础，将U替换成T，这是最基础和最简单的设计方法。
3、试剂盒中提供的下游引物的Tm值为63.6℃，设计上游引物的Tm值要尽量保证在63.6℃左右。
4、若按照原则“2”的方式直接设计的引物其Tm值过低，可以在引物的5’端添加几个碱基(最好为G或C碱基)；也可以在3’端添加1个或几个A碱基；或者5’端和3’端同时修饰。
5、若按照原则“2”的方式直接设计的引物其Tm值过高，可以在引物的5’或3’端去掉几个碱基。
注意事项：
1、试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、miRNA 第一链cDNA 的加入量不要超过Real time PCR 体积10%。
3、对于特殊的检测体系，高含量的cDNA模板易导致非特异性扩增，根据所检测miRNA的丰度适当的稀释cDNA(稀释10倍或者100倍)。
4、本产品中的2×miRNA qPCR Mixture中含有SYBR Green I和ROX染料，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
5、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降，本产品长期保存可置于-20℃。如果在短期内需要频繁使用，2×miRNA qPCR Mixture可于2～8℃保存。而Reverse primer仍需置于-20℃保存。
使用方法：
1、室温融化2×miRNA qPCR Mixture和Reverse primer(10μM)。
2、使用时请将2×miRNA qPCR Mixture上下颠倒轻轻均匀混合，避免起泡，并经短暂离心后使用。如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降。
3、将试剂置于冰上，并按下表配制反应体系：
| 试剂 | 体积 | 终浓度 |
| 2×miRNA qPCR Mixture(ROX) | 10μl | 1× |
| Forward primer(10μM) | 0.4μl | 0.2μM |
| Reverse primer(10μM) | 0.4μl | 0.2μM |
| miRNA第一链cDNA | Xμl | — |
| ddH2O | up to 20μl | — |
4、反应程序设置如下：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 40-45个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | |
| 溶解曲线分析 | 根据PCR仪要求设定 | ||
注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。
储存条件：-20℃，避免反复冻融。
北京WE0168型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒报价关键词：WE0168,琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,Gel DNA Extraction Kit
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购北京WE0168型琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒报价。
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文献和实验相关实验
的产物吸附不了即被损失掉。以下是我总结的常见问题，希望对大家有所帮助。Q1：利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段？A1: 可能有以下几个原因：1. 胶块未完全溶解，溶解凝胶时应置于55℃水浴，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数,确定胶块完全溶解后再进行下一步骤;2. 胶块体积太大,应使用枪头捣碎，还不能充分溶解，则应先将其切为小块，分多次回收或选用大量型回收试剂盒；3.紫外灯下切胶时间过长，导致DNA部分降解，应尽量把切胶时间控制在30s以内；4. 电泳缓冲液pH太高，硅
和蛋白质片断的标准方法。生物通将在后面另文讨论聚丙烯酰胺 凝胶电泳片断 回收的方法，这里首先介绍的是琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法： 1.柱回收试剂盒：可谓目前最简单快速的回收方法，只需要将电泳凝胶中的产物条带切下，用溶解Buffer彻底溶解，上包埋有纯化填料的纯化柱，离心，再洗涤一次，离心后用洗脱缓冲液洗脱。全程不过10多分钟，得到的产物溶液可以直接用于后继实验。这个方法几乎不需要什么技巧 就能得到稳定的结果，也是目前最多商品化试剂盒选择的方法。但是这个方法不适
数量(过表达Overexpression或基因缺陷型Knockout), 以及蛋白功能(功能缺陷型蛋白Dominant-negative mutation)的控制，影响下游基因的表达，而下游基因的变化又可以通过基因芯片(cDNA Microarray)，抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization)，差异显示RT-PCR 等方法进行研究。然而这些方法都无法提供证据证明这些变化是受某个蛋白因子直接调节的，还是间接的其他变化导致的结果。所以，要想提供蛋白
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