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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
399
- 英文名:
5×SDS-PAGE loading buffer
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
2ml
特别提示:包括6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
英文名称:5×SDS-PAGE loading buffer
产品货号:KFS081
产品规格:2ml
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer,适用于变性聚bǐng烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液是一种以溴酚蓝为染料, 6×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液,用于常规的SDS-PAGE 蛋白电泳样品上样。
操作步骤
1. 按每5 微升蛋白样品加入1 微升6×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(6X)。
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟,以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟,10000rpm 离心1 分钟,取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
储存:4℃,有效期12个月。
我公司销售的6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液北京品牌,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
液0.1%TBST)(五)一、二抗孵育后TBST洗涤时间*一抗和二抗孵育后TBST洗涤时间和次数会影响背景深度。一张漂亮的 WB 结果受多个关键因素影响,以上对比实验给出显示最核心的影响因素是一抗选择和合适的转膜条件。对于一抗而言,选择具有一定文献引用数的品牌不仅更容易得到清晰可信的结果同时更能够得到同行认可。其二,针对特定分子量大小靶蛋白而选择适当转膜条件(转膜时间,转膜缓冲液和必要低温环境)能够将 SDS-PAGE 胶上蛋白样品尽可能完全转移到PVDF膜上,同时减少蛋白不必要降解,这对于最终
糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3~4 次;最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液,沸水煮 5 分钟。 6. SDS-PAGE,Western blotting 或质谱仪分析。 三、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 1. 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 2. 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 3. 收集上清(约 30 ml)并加入 30 μg 的适当
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