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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Precast Protein Gels, 10%, 12 wells
- 库存:
899
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京10%预制胶,12孔厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京10%预制胶,12孔厂家
品牌:百奥莱博
英文名:Precast Protein Gels, 10%, 12 wells
编号:SY0373
本品通过pH中性缓冲液制备,丙*(代"烯")酰胺与甲叉丙*(代"烯")酰胺配比是29:1,其规格为浓缩胶5%,分离胶10%,胶板尺寸10×8cm,凝胶厚度1 mm,12孔梳齿,单孔最大上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液,蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad,天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。
N,N-亚甲基双丙*(代"烯")酰胺(甲叉丙*(代"烯")酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比,使用预制胶具有以下优点:1)即开即用,不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固,节省了宝贵的时间和精力;2)不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂(丙*(代"烯")酰胺/甲叉丙*(代"烯")酰胺:神经毒性和遗传毒性;TEMED:强神经毒;过硫*(代"酸")铵:可严重损伤呼吸道,眼睛,皮肤);3)大规模生产,胶与胶之间重复性好,质量稳定,不像手工灌胶那样结果差异大。
使用方法
1)剪开包装取出胶,撕去胶板底端胶纸,将预制胶固定在电泳槽中,加入电泳缓冲液没过梳齿部位,双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢(一定要慢,否则会将胶齿拔断或拔歪)拔出,在前后板的上方中央卡上一个“V”型卡(通过加固前后板,不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙,还可稳定跑胶质量,电泳过程中“V”型卡不可取出),上样后进行电泳,电泳后取出胶板,用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开,将胶取出,弃去塑料板。
2)电泳:使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液(tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%)。推荐使用低压100V,15min换高压150V跑至电泳结束。
3)转膜:使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液(含 20%甲醇或乙醇),操作与实验室原有操作完全相同。
储存条件:4℃,有效期一年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本品含有的部分试剂如丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺有毒,对人体有害,请注意适当防护。
3)电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液,试剂纯度不够,反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ,因为引入的*离子和*离子会影响电泳效果。
4)电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸,否则电路不通,无法电泳。
5)拔梳子时最好浸没在电泳缓冲液中拔,一方面由于液体润滑梳子更容易拔,另一方面不会产生气泡。另外拔梳子时越慢越好,如此可防止梳齿被拔断或拔歪。
6)在电泳后开板取胶时,用小号一字螺丝刀或中号镊子插入左右两板间缝隙,用力搬动,两板即可应声分开,此时两板底部还不能分开,要通过掰开两板取出凝胶。
7)在上样前,使用“V”型卡加固前后板(加样和电泳过程“V”型卡不可移动或拔出),使用时只需将一个“V”型卡“轻轻地”(不必卡到底,不掉即可)卡在前后板的上端中间区域,可确保上样不会产生板胶间的缝隙从而导致样品泄露,电泳时“V”型卡不必取出如此可有助于稳定跑胶质量。
8) 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露,可通过两种方式解决本问题:一是内槽加满缓冲液,外槽液面加至距内槽液面3-5mm,从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装,使其没有凸起的平滑面朝外,从而防止漏液。
除北京10%预制胶,12孔厂家外,我公司正在打折促销以下产品:
·聚凝胺
编号:SY0605
英文名称:Polybrene (hexadimethrine bromide)
规格:500ul
聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物,常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染,慢病毒介导的基因转染,作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序,因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。
本产品为即用型溶液,粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液,并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1:2000稀释,依细胞种类不同稀释比例不同,具体查阅相关文献。
注:Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元,DC细胞)毒性较大,初次应用建议先做毒性测试。
操作步骤(仅供参考,具体使用浓度请参考相关文献)
实验1:逆转录病毒感染(Retroviral Infection)
(1)重组逆转录病毒原液的制备:取5ml生长培养基(5%血清)加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后,吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
(2)待感染细胞的培养:100mm培养盘内加入10ml完全培养基,细胞密度为5×105/盘。
(3)病毒感染:细胞培养24h后,吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 (或将病毒原液稀释到2ml)感染细胞,polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
(4)收集病毒颗粒:加入8ml完全培养基。感染3天后,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
实验2:转染
(1)完全生长培养基培养细胞,培养细胞密度约50%;
(2)孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液,按如下操作制备混合液:①添加完全培养基(60mm培养皿2ml,100mm培养皿3ml),37℃预热;②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀;③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
(3)去除培养基,在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液,在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
(4)去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution(15%DMSO in 1X HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3ml,100mm培养皿4ml)。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s,使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
(5)立即去除DMSO shock solution,用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗,100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
(6)加入完全培养基到细胞中;
(7)稳定转化:去除生长培养基,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达:去除生长培养基,加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期2年。
北京10%预制胶,12孔厂家关键词:Precast Protein Gels, 10%, 12 wells,SY0373,10%预制胶,12孔
ARB11798 人碳酸酐酶2(CA-2)定量分析 Human carbonic anhydrase 2,ca-2 ELISA KIT
ARB11972 大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)酶联免疫定量检测 Rat cxc-chemokine receptor 3,cxcr3 ELISA KIT
ARB12023 大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)含量测试 Rat β2-glycoprotein 1 antibody iga/g/m,β2-gp1 iga/g/m ELISA KIT
3-吲哚基-β-D-吡喃葡萄糖苷酸环己*(代"胺")盐 D-Ribose 35804-66-1
FMOC-L-天冬*酸 5-Nitro-1,10-phenanthroline 119062-05-4
BOC-L-*甘*酸 Diaphorase 2900-27-8
ARB11226 人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA检测服务 Human intercellular adhesion molecule 3,icam-3 ELISA KIT
B0301 优级新生牛血清(辐照灭菌)
ARB10967 人免疫球蛋白E(IgE)Elisa分析 Human immunoglobulin e,IgE ELISA KIT
F030220 HRP标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*HRP
ARB10482 人白介素1可溶性受体I(IL-1sRI)酶联免疫定量检测 Human soluble interleukin-1 receptor i,IL-1sri ELISA KIT
BTN81102 石蜡包埋组织RNAOUT FFPE RNAOUT
ARB13704 兔金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)elisa测定使用说明书 Rabbit tissue inhibitor of metalloproteinases-1 ,timp-1ELISA KIT
刀豆素A Potassium oleate 80890-47-7
北京10%预制胶,12孔厂家关键词:Precast Protein Gels, 10%, 12 wells,SY0373,10%预制胶,12孔
·SRF Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0141
英文名称:SRF Luciferase Reporter Plasmid
规格:1μg
SRF Luc荧光素酶报告基因质粒(SRF luciferase reporter plasmid)是用于检测SRF转录活性水平为目的的报告基因。SRF(Serum response factor)是转录因子MADS box超家族的一员,主要调控即早基因的激活(例如c-fos),从而参与细胞的周期调控、生长和分化等。
SRF Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Serum Response信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。
pGMSRF-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个SRF结合位点,可以高灵敏度地检测SRF的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得SRF报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

使用说明
pGMSRF-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
我公司正在优惠促销蛋白质研究等系列产品,期待您的咨询选购北京10%预制胶,12孔厂家。
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文献和实验。预制聚丙烯酰胺凝胶一般信息:基质: 聚丙烯酰胺厚度: 1.0mm或者1.5mm大小: 8cm(h)x8cm(w)cassette 大小: 10cm(h)x 10cm(w)加样孔格式:17孔,15孔,12孔,10孔,9孔,5孔,1孔,2D/准备 孔或者IPG孔堆积胶:大多数Novex® gels为4%堆积胶* Novex®预制胶适用于XCell SureLock™ Mini-cell和大部分其它设计为10cm(h)×10cm(w)gel cassette的mini-cells。E-PAGETM预制胶
槽都有详细的步骤和图示。 目前有两种梯度浓度(8-16%、4-20%)和三种固定浓度(8%、10%、12%)可供选择,规格是最常用的10孔、12孔和15 孔。10孔的上样量达50ul,几乎是其他预制胶的两倍。蛋白分离 范围请看下表,大部分蛋白都可以得到很好分离,但是如果蛋白特别大或特别小,估计就不适用了。目录价是1526元(10块),有点小贵。 浓度 8% 10% 12
也很贴心,针对不同的电泳槽都有详细的步骤和图示。 目前有两种梯度浓度(8-16%、4-20%)和三种固定浓度(8%、10%、12%)可供选择,规格是最常用的10孔、12孔和15 孔。10孔的上样量达50ul,几乎是其他预制胶的两倍。蛋白分离 范围请看下表,大部分蛋白都可以得到很好分离,但是如果蛋白特别大或特别小,估计就不适用了。目录价是1526元(10块),有点小贵,不过6月10日前有促销,买一送一,相当于每块76.3元。 浓度
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