北京双链DNA定量检测试剂盒价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

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名称：北京双链DNA定量检测试剂盒价格
编号：SY0260
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：2000T
Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料，常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建，DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义，疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。

常用的检测核酸的方法有:1）紫外吸光法（A260），该法操作简便，但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大，还容易受到核酸样品中污染物的干扰，不能区分DNA和RNA，而且灵敏度低（ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA）；2）探针杂交法，该法是传统检测微量DNA的常用方法，基本能满足目前疫苗和治疗性生物制品的检测需求，但是该法耗时较长，操作繁琐，稳定性、敏感性和特异性较差；3）Hoechst33258染料法，Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料，基本不受蛋白质等污染物的干扰，可以检测低至10ng/ml的DNA；在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。

Picogreen dsDNA定量法：Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性，且几乎无序列依赖性，可以精确地测量多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。

相比传统的方法，Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势：
①灵敏度高：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省宝贵的样品；
②特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性；
③耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
④易于使用——只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
⑤适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

若每次分析体积为2 mL，本试剂盒各组分试剂足够200次分析使用，若使用微孔板或96孔板检测，每次使用量200µl，则各组分试剂足够2000次分析。

产品组份：

 

组分名称	产品编号/规格	保存
dsDNA Quantitation Reagent	100µl×10	2～6℃避光干燥
2×TE buffer	50ml	2～6℃（短期）或-20℃（长期）
Calf thymus DNA standard (100µg/ml)	1ml	2～6℃（短期）或-20℃（长期）

注意事项

1）Picogreen定量试剂含有DMSO（已知有毒试剂），请小心操作；
2）尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性，但是该试剂能结合双链DNA，请操作时务必小心。

试剂准备
1）1×TE buffer 的配制：将2×TE 用无菌去离子水（不含Dnase）等体积稀释至1×工作液。
2）PicoGreen工作液的配制：使用前将PicoGreen dsDNA定量试剂回温至室温；PicoGreen是以100µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的（共10管）。实验当天，根据实验需求用1×TE按1:200 的比例稀释适量定量试剂浓缩液。例如要准备足够的操作溶液以2ml检测体系测定20个样品，可向19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
【注】：
a、由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。
b、PicoGreen 试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
c、溶液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。

检测步骤
1、 2µg/ml的Calf thymus DNA standard浓缩液的配制
用1×TE对Calf thymus DNA standard (100µg/ml)进行50倍稀释，即向30µl Calf thymus DNA standard加入1.47ml 1×TE混匀即可。
2、 标准曲线的制备
① 比色皿体系检测---（2ml）
a、按照表1 向一次性微量比色皿中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard，随后加入1ml PicoGreen定量试剂，混匀后，于室温避光孵育2-5min，并以1×TE缓冲液为blank。
【注】：确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。
 

TE (µl)	2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl)	稀释的PicoGreen定量试剂(µl)	Calf thymus DNA standard终浓度
0	1000	1000	1µg/ml
900	100	1000	100ng/ml
990	10	1000	10ng/ml
999	1	1000	1ng/ml
1000	0	1000	blank

表1 比色皿体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

b、于荧光仪中检测各浓度荧光值，Ex/Em=480nm/520nm。
【注】：为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内，应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致；为了减少光漂白，应保持所有样品的检测时间一致。
c、各浓度得到的荧光值减去空白对照荧光值，对DNA浓度和荧光值做标准曲线。
② 微孔板体系检测（200µl）
a、按照表2 向96孔板中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard，随后加入100µl PicoGreen定量试剂，混匀后，于室温避光孵育2-5min，并以1×TE缓冲液为blank。【注】：确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。
 

TE (µl)	2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl)	稀释的PicoGreen定量试剂(µl)	Calf thymus DNA standard终浓度
0	100	100	1µg/ml
90	10	100	100ng/ml
99	1	100	10ng/ml
99.9	0.1	100	1ng/ml
100	0	100	blank

表1 酶标板体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

b、于荧光酶标仪中检测各浓度荧光值，Ex/Em=480nm/520nm。
【注】：为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内，应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致；为了减少光漂白，应保持所有样品的检测时间一致。

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·30%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺，19:1
编号：SY0342
英文名称：30% Acryl/Bis Solution, 19:1
规格：500ml
Acr-Bis常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶)，包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶是由丙*(代"烯")酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂甲叉双丙*(代"烯")酰胺（N，N’-methylene bisacrylamide，简称Bis ）在催化剂的作用下，通过自由基引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度（交叉连接的程度）所决定。

聚合链的长度与丙*(代"烯")酰胺的浓度有关，交联度由Acr 与Bis的相对比例决定，调节单体丙*(代"烯")酰胺与交联剂（Bis）的浓度比例，可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度愈低，凝胶的孔径愈大，适用于分离较大的分子；Bis的浓度愈高，网孔越小，分辨率越高，越有利于分离较小的分子。

30% Acr-Bis(19:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为19:1。
30% Acr-Bis(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。
30% Acr-Bis(37.5:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。

储存条件：4℃,避光。

·RORE-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0139
英文名称：RORE Luciferase Reporter Plasmid
规格：1μg
RORE-Luc荧光素酶报告基因质粒（RORE luciferase reporter plasmid）是用于检测RORE转录活性水平为目的的报告基因。RORs（RAR-related orphan receptors）是细胞内转录因子核受体家族的一员，主要有三个形式RORα、RORβ和RORγ。

RORE-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Retinoid-Related Orphan Receptor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMRORE-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个RORE结合位点，可以高灵敏度地检测RORE的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得RORE报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMRORE-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


北京双链DNA定量检测试剂盒价格关键词：双链DNA定量检测试剂盒,Picogreen dsDNA Assay Kit,SY0260


·STAT4-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号：SY0142
英文名称：STAT4 Luciferase Reporter Plasmid
规格：1μg
STAT4 Luc荧光素酶报告基因质粒(STAT4 luciferase reporter plasmid)是用于检测STAT4转录活性水平为目的的报告基因。STAT4主要是被IL-12激活，它在Th1/Th2的分化调控及因此失调引发的各种炎症性疾病中发挥着重要的作用。

STAT4 Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Inflammation信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMSTAT4-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个STAT4结合位点，可以高灵敏度地检测STAT4的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得STAT4报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMSTAT4-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


北京双链DNA定量检测试剂盒价格关键词：双链DNA定量检测试剂盒,Picogreen dsDNA Assay Kit,SY0260

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