Alexa Fluor 488标记驴抗鸡IgY(H+L)折扣

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Alexa Fluor 488标记驴抗鸡IgY(H+L)折扣价在内的一系列抗体抗原产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：Alexa Fluor 488标记驴抗鸡IgY(H+L)折扣价
品牌：百奥莱博
英文名：Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Chicken IgY (H+L)
产地：国产|进口
编号：SY0740
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 488标记的驴抗鸡IgY（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的鸡IgY分子，也会与其他鸡免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理，ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应，但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC，Amax（最大激发波长）为493nm，Emax（最大发射波长）为519nm。本品适合做多标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。

浓度：0.75 mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*， pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
防腐剂：0.025% 叠氮化*
荧光素：Alexa Fluor 488, Amax=493nm; Emax=519nm
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

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·零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)
编号：SY0284
英文名称：Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit
规格：20T
本试剂盒是利用拓扑异构酶（Topoisomerase）高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成，与传统的T4连接酶相比，具有以下优势：
1）快速，仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2）高效，无自连现象，阳性克隆率接近100%，无需设置蓝白斑筛选；
3）操作简单，从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏。
4）可连接长达10kb目的产物；
5）本产品不含多克隆酶切位点（MCS），使用者在引入后续酶切位点进行酶切操作时，不会受到MCS位点的影响，从而增加酶切效率以及克隆成功率。

产品用途：平端PCR产物的克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。

产品组份：
pESI-Blunt simple vector (30ng/µl)————20µl
1kb control insert (40ng/µl)————5µl
10×Enhancer——————20µl

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。


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·10×STE Buffer(无菌)
编号：SY0009
英文名称：10×STE Buffer (Sterile)
规格：500ml
STE Buffer，即Sodium Chloride-Tris-EDTA Buffer，又称TEN buffer，是分子生物学常用的一种缓冲试剂，可用于DNA提取、DNA电泳等，也可用于蛋白纯化相关实验。本品为10×STE浓缩液，使用前只需稀释10倍即可。另外，本品已经除菌处理，可直接用于相关实验。

产品组分：1×STE缓冲液含有100 mM NaCl; 10mM Tris-HCl pH8.0; 1mM EDTA pH 8.0

储存条件：常温，有效期一年。

·AFP1-GFP报告基因质粒
编号：SY0204
英文名称：AFP1 GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
AFP1-GFP报告基因是用于检测AFP1转录活性水平为目的的报告基因。

AFP1-GFP报告基因主要应用于Hepatoma Nuclear Factor信号通路、药物研究以及细胞中AFP1的调控机制的研究。

pGMAFP1-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个AFP1结合位点，可以高效地检测AFP1的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得AFP1-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM AFP1 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMAFP1-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


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·即用型腔肠素h
编号：SY0236
英文名称：Ready To Use Coelenterazine h
规格：10 vials
本品是即用的腔肠素h，特别设计用于体内成像研究。通过最小化产品成分的变化，最小化冻融次数和严格控制不同批次的产品，确保客户得到高重复性的结果。产品的优点在于：1）溶于丙二醇和柠檬酸的腔肠素h，稳定性高，即开即用，不用考虑粉末配置成液体的稳定性问题。2）预制配方，不同批次间严格控制，特别设计用于体内研究；3）即用型产品通过最小化预成像准备步骤，减少时间和精力；4）经IVIS成像系统验证，控制体内成像质量；

本包装含有10瓶无菌腔肠素h即用型溶液，每瓶含1.2ml浓度为150 μg/mL的Coelenterazine h。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
腔肠素h（Coelenterazineh）是海肾荧光素酶（Rluc）和Gaussia荧光素酶（Gluc）等多种荧光素酶的作用底物，其发光强度比天然腔肠素高10倍以上，适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子，可用于检测活细胞中*离子浓度。

运输和保存方法：冰袋运输。≤-20℃避光保存，最好放到-70℃长期避光保存。

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