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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
23
- 供应商：
上海谷研
- 检测范围：
仅用于科研实验，禁用于临床
- 检测方法：
采用双抗夹心法
- 应用：
详见说明书
- 适应物种：
小鼠，大鼠，猪，狗，猴，兔，羊，鸡，牛，鸭子，鱼，植物，昆虫等
- 标记物：
人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
- 样本：
Human Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
- 规格：
48T/96T
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 人脂多糖/内毒素(LPS)elisa免疫组化试剂盒图片 | Human Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit | 48Ｔ/96Ｔ |
1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或 者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上 清。
5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人脂多糖/内毒素(LPS)elisa免疫组化试剂盒图片操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中 先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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人脂多糖/内毒素(LPS)elisa免疫组化试剂盒图片技术原理：
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
温馨提示：使用前，请彻底阅读说明书。本酶联免疫试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
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文献和实验，成本相对较高； 两者各有各的优势，可根据实验数据要求及实验室条件选择合适的方法，也可结合两种方法兼顾效率与准确性。 2. 质粒中内毒素残留对下游实验的影响 内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，又叫脂多糖（LPS）。脂多糖对于宿主是有毒性的，当细菌破碎时，会释放到环境中。在细胞转染中，高内毒素会与 DNA 竞争转染试剂，从而减少质粒 DNA 的摄入量，导致转染效率下降。内毒素具有两亲性和负电荷性，性质类似于 DNA，因此在质粒纯化过程中容易伴随质粒一同被纯化出来。在细胞培养中，内毒素
脂多糖和脂多糖识别蛋白 脂多糖是PAMP的一个代表。对脂多糖的识别在固有免疫中有特殊的地位。首先，脂多糖为革兰阴性菌的胞壁成分，免疫刺激作用最强，全身感染会引起内毒素休克(endotoxinshock)。这一致命的综合征是全身细菌感染后大量细胞因子特别是TNF~a的分泌所引起，可导致脑、心、肾、肝等要害器官的衰竭，因而LPS又称内毒素。不仅如此，LPS是固有免疫信号转导研究的突破口之一，由此发现了相应的受体TLR4(详后)，及一些当初未知的炎症基因信号转导和激活方式，开拓了研究固有
摘要 脂多糖（LPS）通过与膜受体CD14作用将信号从胞外传到胞核而刺激多种细胞合成和释放TNF-α、IL-１和IL-6等 生物 活性物质而表现复杂的 生物 学活性，但其详细机制尚未完全清楚。本文就近年来对LPS激活巨噬细胞的信号传导机制的研究作一简要综述。 关键词:内毒素；信号传导；内毒素结合蛋白；蛋白酪氨酸激酶 内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁的组成成份，其化学本质为脂多糖，为细菌死亡或活跃繁殖时所释放。LPS
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