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PMSF(100mM)

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  • 2025年11月27日
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      10 ml

    本产品是 100mM PMSF 溶于异丙醇。 异丙醇工作浓度:0.1~1mM。

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      ,直到全部溶解,用 HCl 调节 PH 值到 7.4; 2.加 10 ml 10% 的 NP-40; 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠,搅拌,直到溶液澄清; 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA,用量筒定容到 100 ml,2~8 ℃ 保存; 5.理论上,蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入(抑蛋白酶肽,亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl;PMSF,Na3VO4,NaF 各 500 μl),但是 PMSF 在水溶液中很不稳定,30 分钟就会降解一半,所以 PMSF 应该

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      mM HEPES, 100 mM NaCl, 1.5 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA, 0.1 mM DTT, 5 mM PMSF, pH 7.9). (3)After incubating for 20 min at 4℃, samples were centrifuged at 10,000 rcf at 4℃ for 20 min. (4)The nuclear extracts were then quantified for protein levels

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      液加 10 μ PMSF100 mM),摇匀置于冰上。(PMSF 要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。) 4.每瓶细胞加 400 μ 含 PMSF 的裂解液,于冰上裂解 30 min,为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。 5.裂解完后,用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧(动作要快),然后用枪将细胞碎片和裂解液移至 1.5 ml 离心管中。(整个操作尽量在冰上进行。) 6.于 4℃ 下 12000rpm 离心 5 min。(提前开离心机预冷) 7.将离心后的上清

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