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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20度
- 保质期:
12个月
- 库存:
现货
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
1 ml
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文献和实验BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线:用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线,具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品,每个浓度(0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA,其余用 PBS 补齐至 20 μL)梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度:10 倍稀释法:取 18 μLPBS+2 μL 样品上清(经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
•如只运行一块凝胶,则需要把胶门(很厚的玻璃板)插入到电极空着的一边。将SDS-PAGE电泳缓冲液倒入凝胶三明治夹与胶门之间,直到缓冲液表面距离玻璃板上缘1cm(图 11)。检查是否有渗漏。将1升的SDS-PAGE电泳缓冲液倒入槽内凝胶组件的周围。 样品制备和装载: •将试管插入至制冷恒温金属浴(4℃),以解冻冷冻牛血清白蛋白(BSA)(1 mg/ml)样品。 然后,加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。 •把样品加样到凝胶中前, 请在恒温金属浴中以
大体积螯合物。因此减少蛋白质样品和BCA工作缓冲液的稀释比例应当保持反应的动力学并且保证标准曲线的工作范围能够覆盖到低蛋白浓度。 表1.蛋白标准品和BCA工作缓冲液体积比为20:1时,其中BSA标准品和BCA工作缓冲液的有效成分的浓度和摩尔量的比。 推荐的是1:1体积混合的BCA工作缓冲液和蛋白质样品,这里我们使用10ul蛋白质样品和10ulBCA工作液进行混合反应。大大减少蛋白质样品的稀释比例,并且也改变了BCA分析方法的动态范围,将检测浓度降低到0.01mg/ml. 我们修改了实验






