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文献和实验流式细胞术是分析细胞或颗粒特征常用的技术:将细胞表面或胞内、核内的抗原标记上荧光抗体,荧光素被激发光激发时产生荧光,从而被检测。 DAPI 即 4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一种可以透过完整的细胞膜,与DNA强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。当 DAPI 与双股 DNA 结合时,在紫外光的激发下,发出蓝光。而红细胞无细胞核(无 DNA),因此不会被 DAPI 染色。 在免疫
(Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释,终浓度为10 ug/ml。 DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为10 ug/ml。 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期
、变圆、脱落。(2)染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的 DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三种种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在 DNA 的 A-T 碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。Hoechst
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KGMP012-2细胞质蓝色荧光染料 CMAC,修订日期:20150713.pdf 附 (下载 1 次)
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