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5 mg
染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元,0.2~0.6mm/每天/固定标本,在活体组织里,可以达到 6mm/每天。经过醛固定的 组织,Dil 的扩增可以持续长达 1~2 年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移,除非质膜被破坏,比如切片部位。
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文献和实验实验目的: 通过 DIR 染料标记外泌体,通过尾静脉注射 DIR-labeled Exosome,24 小时内观察外泌体在体内的代谢情况。 实验材料: DIR- Exosome,裸鼠; DIR-Exosome:染料终浓度 1uM,外泌体 200ug,体积 200ul; Exosome 来自 HEK293 无血清培养基(Umibio,UR51102)条件下获得,通过外泌体提取试剂盒提取(Umibio,UR52121)。 实验内容: 1、通过尾静脉注射 200 ug/支的 DIR- Exosome
/mL。 f、基于以下两个原因,建议准备2倍于正常共孵育实验所需外泌体的量来进行染料标记。一是使用过量染料进行标记,外泌体的染色效率仍无法达到 100%;二是去除游离染料的过程中存在外泌体回收率的损失。 21、关于外泌体荧光染料(DIR)相关实验注意事项 a、活体成像对外泌体浓度要求较高,建议用于染料标记的外泌体原始浓度达到 0.5~1.5μg/μL,外泌体浓度过低实验失败风险较高。 b、外泌体染色步骤中去除游离染料的第 4、5 步必不可少,以避免游离染料对后期实验的干扰。这一步相当于重新提取外泌
的强度:PE > APC > FITC > PerCP。 3. 多色流式细胞检测中荧光染料荧光图案的选择原则 1) 根据机器配置选择最亮的荧光染料 了解你使用的流式细胞仪的性能,大多数流式细胞仪有两个或者多个激光器,有五种波长可供选择:紫外(355 nm)、紫色(405 nm)、蓝色(488 nm)、黄色(561 nm)和红色(640 nm)。除了激光器,具体的虑光片和检测器也决定了你的配置可同时检测多少种颜色。 多色标记荧光染料尽量选用不同激光激发的染料。荧光染料









