腔肠素f(国产,进口)

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北京百奥莱博专业生产供应腔肠素f(国产,进口)，我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：腔肠素f(国产,进口)
英文名：Coelenterazine f
规格：1×500μg
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：SY0237
本品为粉末形式供应的腔肠素f（Coelenterazine f），与天然腔肠素结构上的唯一差别在于将其R-1位酚基上的羟基替换成*（F），是水母发光蛋白（aequorin）的首选底物。当腔肠素f和水母蛋白（Apoaequorin）一起被部分氧化得以活化，生成腔肠素的亚稳态复合物（aequorin）。与天然腔肠素-水母蛋白（Apoaequorin）复合物产生的光子总数相比，此复合物仅产生80%的光子能。但是其优点在于：仅需非常少的时间来生成aequorin复合物（通常来说此步反应很慢，比如60min内仅有40%的天然腔肠素完成反应）。另外，当其与Ca2+接触，即可快速且高产量的发光，产能强度是天然腔肠素的20倍。具有最好的细胞渗透性。当需要极高的Ca2+检测灵敏度来研究水母蛋白再生实验，推荐使用本底物。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物（见附录1，腔肠素及其衍生物的特性）。

CAS：123437-16-1
分子式：C26H20FN3O2
分子量：425.46
外观：黄色至褐色粉末
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不可溶于DMSO
纯度：＞95%（TLC）
结构：



运输和保存方法：冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存，最好保存在惰性气体下以避免接触空气。

注意事项
1）腔肠素f粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成f氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

我公司的腔肠素f(国产,进口)，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
ARB10797 人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)代做ELISA实验 Human anti-cardiolipin antibody igg,aca-igG ELISA KIT
PY02-242  牛津琼脂(OXA)基础  250克  
5-*基荧光素 DMT 3326-34-9
ARB11149 人肿瘤标志物(CA724)定量分析 Human ca724 ELISA KIT
BTNpyj19 细胞培养基 Cell Culture Medium
B0501 马血清(辐照灭菌)
ARB11397 人神经肽Y(NPY)含量分析 Human neuroPeptide y,np-y ELISA KIT
ARB13066 小鼠乳腺癌标志物-CA153含量检测 Mouse mammary carcinoma marker-ca153 ELISA KIT
酚红 BCP,Na 143-74-8
ARB11733 人富亮*酸α2糖蛋白1(LRG1)含量测试 Human leucine-rich alpha-2 glycoprotein 1,lrg1 ELISA KIT
BL0934 RBITC标记兔抗豚鼠IgG抗体
邻甲*(代"酚")酞络合剂 CSA 2411-89-4
PY02-185  葡萄糖半固体发酵管  250克  
BL1319 4×dNTPs(100mM)
ARB10295 人天门冬*酸转*酶/谷草转*酶(GOT/GPT)ELISA检测服务 Human aspartate aminotransferase,got/gpt ELISA KIT
乙二*(代"胺")四乙酸二*锰盐 Boc-Glu(OtBu)-OH 15375-84-5
L0203 IgG(1、2a、2b)类单克隆抗体腹水纯化试剂盒 
腔肠素f(国产,进口)关键词：腔肠素f,123437-16-1,Coelenterazine f


·RIPA裂解液(强)
编号：SY0302
英文名称：RIPA Lysis Buffer (Strong)
规格：100ml
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液（强），含有sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

注意事项

1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


使用说明：

(一) 培养细胞样品：

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。


腔肠素f(国产,进口)关键词：腔肠素f,123437-16-1,Coelenterazine f

7647-17-8 Cesium choride(CsCl)   *化铯
HC0113 透析袋MD34 (  截留量7000  )
O-*并三氮唑-N,N,N,N,-四甲脲六*磷酸酯 TLCK 94790-37-1
PY04-045  复达欣/头孢他啶  0.8mg/支×10支  每支添加于100mlPALCAM培养基基础中，用于李斯特氏菌的选择性分离培养
C0301 优级新生牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
马来酰肼 ACP 123-33-1
F030206 HRP标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*HRP
BL1309 2×Taq PCR MasterMix(含染料)
ARB11804 人雌激素诱导蛋白PS2 尿液中含量检测 Human estrogen-induced protein ps2 ELISA KIT
BTN130616 Bsu DNA聚合酶,大片段 Bsu DNA Polymerase,Large Fragment
麦芽糖一水合物 Methyl orange 6363-53-7
SJ0091 Ciprofloxacin 环丙沙星
吉西他滨 TMAC 95058-81-4
ARB10549 human皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA代测服务 Human cutaneous t cell-attracting chemokine,ctack ELISA KIT
二硫代苏糖醇 1,1,3,3-Tetramethylbutylamine 3483-12-3
9041-37-6 Sephadex LH-20 (葡聚糖凝胶LH-20)

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