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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
Lyophilized or Liquid
- 保存条件:
-20℃
- 克隆性:
Polyclonal
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig........
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB, ELISA, IHC, IHC-P, IHC-F, IF......
- 浓度:
1mg/1ml
- 抗体英文名:
ZPBP1
- 抗体名:
透明带结合蛋白抗体
- 规格:
50ul/100ul/200ul
多克隆抗体与单克隆抗体的区别
多克隆抗体
特点:
- 识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。
- 多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。
- 通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。
- 制备成本低廉且制备速度较快。
- 制备过程比单克隆抗体简单。
优点:
- 高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。
- 可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。
- 与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。
- 可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。
- 通常是检测变性蛋白质的首选。
- 多表位通常可提升检测的稳定性。
缺点:
- 易产生批次间差异。
- 产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。
- 由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。
- 不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。
单克隆抗体
特点:
- 易产生批次间差异。
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文献和实验一、原理: 免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法,基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc段结合的proreinA/G(预先结合固化在琼脂糖小珠上),形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物,纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白,应用Westernblot或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。 与其它研究方法相比,免疫
的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。(二)试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4 缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制。 荧光标记的抗人球蛋白抗体:以0.01mol/L,pH7.4的PBS
的方法。但是也存在一定局限性。酵母双杂交可以大规模的筛选未知的互作蛋白,但是假阳性高,免疫共沉淀及pull down只是对已知的蛋白互作关系进行验证,不能发现新的未知蛋白。 免疫沉淀-质谱联用IP-MS技术 随着蛋白质组学技术的发展,将免疫亲和与质谱技术结合产生的IP-MS技术则逐渐显示出他的优势。原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体结合的protein-A/G(预先结合固化在琼脂小珠上),形成”结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体
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